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1、第七章 电化学分析技术和临床相关仪器,第七章 电化学分析技术和临床相关仪器,7-1 概述 7-2 电化学分析原理 7-3 电解质分析仪 7-4 血气分析仪,7-1 概 述,一、电化学临床分析仪器,电解质分析仪 （electrolyte chemistry analyzers）,血气分析仪 （blood gas analyzers）,分类,1.电解质分析仪,测量样品中的指标：钾、钠、氯、钙、锂、pH值等,2.血气分析仪,测量样品中的指标：pH、PCO2、PO2、AB、SB、BB、TCO2、BE blood、BEECF、SO2等,电化学分析法是建立在溶液电化学性质基础上的一类分析方法,二、电化学分
2、析法（Electrochemical analysis）,测 定 物理量,参与反应的化学物质的量,确定,电位 电流 电导 电量,7-2 电化学分析原理,一、pH值测定原理,pH玻璃膜电极 （glass membrane electrode）,玻璃电极对溶液pH的敏感程度取决于电极的玻璃膜,在25时，玻璃电极的电极电位：,通常采用二次测量法，即用相同的仪器测定标准溶液和待测溶液的电动势，以确定待测液的pH。采用的电池组成是：,2. 电化学法测量血液 pH,二、离子选择性电极工作原理( principal of Ion selective electrode ),1. 离子选择性电极的结构,膜电位
3、：膜内外被测离子活度的不同而产生电位差,离子选择性电极又称膜电极（membrane electrodes ）,特点：仅对溶液中特定离子有选择性响应,膜电极的关键：是一个称为选择膜的敏感元件,敏感元件： 单晶、混晶、液膜、功能膜及生物膜等构成,离子选择电极的构造,2. 离子选择性电极的测量方法,ISE与参比电极共同浸入样品试液中构成一个原电池，通过测量原电池的电动势E，便可求得被测离子的活度或浓度。,离子选择性电极作正极时：对阳离子响应的电极，取正号对阴离子响应的电极，取负号,三、氧分压（PO2）电极的工作原理,PO2 电极是氧化还原电极，对氧的测量是基于电解氧的原理实现的,目前用得最多的氧电极
4、是电解式的Clark氧电极，Clark氧电极是由铂阴极、Ag/AgCl阳极、KCl电解质和透气膜所构成,Clark 氧电极的结构,待测溶液中的O2可以借助电极外表面的O2渗透膜 内的PO2梯度透 过膜而进入电极,在测定时，O2在铂阴极表面发生的反应如下：,O2 + 2 H2O H2O2H2O2 + 2 e- 2 OH-,当阴极表面附近的氧被消耗后，阴极表面氧气分压：,PO2= 0.00 kPa/mmHg,样品中的氧将通过渗透膜向阴极发生浓度扩散 当氧浓度扩散梯度相对稳定时，就产生一个稳定的电解电流，称之为极限扩散电流 I0,I0 PO2(样本）,通过测定电流变化即可测定血液标本中的氧气分压,在
5、外加电压超过0.8V时，即使PO2 = 0 mmHg，水本身也会被电解而产生电流外加在PO2电极上的工作电压通常为0.65V,四、PCO2 电极的工作原理,PCO2电极是气敏电极（gas sensing electrode），是由pH玻璃电极和银-氯化银电极组装在一起的复合电极,7-3 电解质分析仪,电解质分析仪（electrolyte analyzer） ：采用离子选择性电极（ISE）测量溶液中离子浓度的仪器,测定指标：生物样品中的K+、Na+、Cl-、Ca2+、Li+、pH值等,具有设备简单、操作方便、灵敏度和选择性好、成本低、快速、准确、微量、不破坏被测试样和不用进行复杂的预处理等优点,
6、优点：,如 Nova 电解质/化学分析仪：Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+、Li+、TCO2、TCa、Glu、BUN、Hct、pH、Creat,一、电解质分析仪的分类,（一）按自动化程度分类,半自动电解质分析仪 全自动电解质分析仪,（二）按工作方式分类,湿式电解质分析仪 临床上常用 干式电解质分析仪,二、电解质分析仪的结构,（一）湿式电解质分析仪,离子选择性电极 参比电极 分析箱 测量电路 控制电路 驱动电机 显示器,湿式电解质 分析仪,基本组成,结构框图,测定过程框图,不同的电解质分析仪在仪器板面上都具有人机对话的操作键。在分析检测样品时，操作者可以通过按键操作控制分析检测过程,1.
7、板面系统,例如：汽巴康宁644 电解质分析仪,只有 yes/no 两个按键，yes 键用来接收显示屏上的提问，no 键用来否定显示屏上的提问，通过这两个键可对仪器进行各种操作和参数设定,2.电极系统,电极系统是测定样品结果的关键，决定测定结果的准确度和灵敏度,指示电极 参比电极,电极系统,指示电极：pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等离子选择性电极。,参比电极：银/氯化银电极,3.液路系统,液路系统通常由标本盘、溶液瓶、吸样针、三通阀、电极系统、蠕动泵等组成,蠕动泵的作用：为各种试剂的流动提供动力,液路系统中的通路：由定标液（calibration solutions ）/
8、冲洗液（Rinse）通路、标本通路、废液通路、回水通路、电磁阀通路等组成,液路系统直接影响到样品浓度测定的准确性和稳定性,标本盘、三通阀和蠕动泵的转动、转换均由微机自动控制,MEDICA全自动电解质分析仪,4.电路系统,电解质分析仪的电路系统由五个模块组成,电源电路模块 微处理器模块 输入输出模块 信号放大及数据采集模块 蠕动泵和三通阀控制模块,提供分析仪的打印机接口电路、蠕动泵控制电路、电磁阀控制电路和其它各种部件所需的电源,电源电路模块作用：,微处理器模块及其作用：,包括主机 CPU芯片，通过地址总线、数据总线与显示板、打印机、触摸控制板相连，通过系统总线与模拟通道液压系统相连,包括主信号
9、放大器变换器（电极、标本检测器）和其它电子系统间的界面，它除了钠、钾、氯等测量通道外，其余模拟信号也在放大系统上处理，所有这些信号被传输到CPU板上的主A/D变换器上,信号放大模块,5.软件系统,提供仪器微处理系统操作、仪器设定程序操作、仪器测定程序操作和自动清洗等操作程序,分析仪的软件系统，是控制仪器运作的关键,软件系统的作用：,监察分析仪的稳定性、调校自动定标频率和自动测定质控标本，并自动将结果与预期的数据作比较评估，也能指导操作者日常保养和帮助解决故障问题,微处理系统程序：,在测定质控范围、质控时间，设定密码及选择自动或手动定标方式时，都需要设定程序,仪器设定程序：,仪器测定程序：,测定
10、操作的控制采用人机对话方式，由操作者按键控制，运行过程包括启动运作、吸取样本、自动分析检测、数据处理及结果打印、自动清洗吸样针等测量组件以及复位等待下次检测分析等,（二）干式电解质分析仪,电解质的干化学测定法目前主要有两类:,基于反射光度法干化学测定,基于离子选择性电极（ISE）方法干化学测定,SPOTCHEM EL SE-1520,通常每测一个项目需要用一个干片，每个干片上带有条形识别码，仪器将自动识别所进行的测定项目,三、电解质分析仪的维护保养与故障排除,（一）仪器的维护保养,1. 电极系统的保养,仪器在工作过程中，由于电极的内充液与样品之间存在着不同程度的离子交换，使电极内充液的浓度逐渐
11、降低，从而使膜电位下降，导致测量结果偏低。需要定期对电极内充液中的离子含量进行调整,钠电极内充液的浓度降低最为严重，要经常检查调整内充液浓度,许多仪器的程序设计中已包含每日保养（daily maintenance）一项。坚持每日用厂家提供的清洁液和钠电极调整液进行清洗和调整是最基本的保养,调整液含有氟化钠-玻璃腐蚀剂,（1）钠电极,钾电极为选择性膜电极,使用过程中会吸附蛋白质,影响电极的响应灵敏度。每月至少更换一次内充液,（2）钾电极,氯电极为选择性膜电极,使用过程中亦会吸附蛋白质,影响电极的响应灵敏度。最好用物理法进行膜电极的清洁,（3）氯电极,每周均需检查电极内是否有足够的饱和氯化钾溶液及
12、氯化钾残片。如果不够或没有，则需及时添加。一般三个月要换一次参比电极膜,（4）参比电极,清洗电极套,保持毛细管通透,使盐桥导通,电极芯无需保养,但不能用水洗或使其干燥,2.流路系统的保养,仪器在测量过程中，由于血清中含有部分纤维蛋白，蛋白将附着在液流通道 (flowpath)的泵、管路和电极系统毛细管的内壁上，当测量工作量较大时，内壁所附的蛋白增厚，造成阻塞管路和影响样品与电极之间的测量电位，影响正常工作和测试结果的准确性,（1）流路保养,多数仪器都有仪器流路保养程序，可以根据保养程序进行保养工作。当流路保养程序结束后，应当对仪器进行重新定标,流路清洗是为了保证仪器流路中没有蛋白质、脂类沉积和
13、盐类结晶,（2）全流路清洗,仪器进入流路程序进行清洗，吸入或注射清洗液、去蛋白液或蒸馏水冲洗流路，重复23次。冲洗完毕，应当对仪器进行重新定标,（二）日常维护保养,仪器维护保养,每日维护 每周维护 半年维护 停机维护,检查试剂量，如不足1/4液面，应及时更换；清洁仪器表面灰尘及吸样探针，保持探针的畅通；及时弃去废液瓶中的废液,1.每日维护,仪器应进行流路清洗，除去蛋白质、脂类沉积和盐类结晶，对仪器进行维护保养,2.每周维护,清洁泵管，用酒精棉球清洁泵管和不锈钢转轴，在泵管的弯处涂硅油或白色凡士林等润滑剂,3.每月维护,4.每季度进行MV值试验,电极的MV值由仪器使用说明书给出,（三）常见故障及
14、其排除方法,一些常见故障、产生原因和排除方法如下：,电极没有稳定，可以在电极稳定30min后定标,是否停电、电源线未插入插座中、保险丝熔断等,1.仪器不工作,2.定标不能稳定,3.重复性不良,（1）电极未活化，应活化电极；（2）电极间有漏液，应装紧电极或更换密封圈；（3）电极间有血样凝块，需拆开电极，用吸球吹净电极；（4）参比电极有KCl结晶，应擦净；电极毫伏偏低，更换电极内液或电极；（5）电极斜率（electrode slope）低于规定值，应更换电极或重新校准；,（6）试剂太少或变质，应更换试剂（7）系统校准没有进行，应运行系统校准23次（8）系统校准能通过，但电极斜率SLOPE值超出规定
15、，重新运行系统校准23次或更换相应电极或试剂,为保证实验室报告的准确性和稳定性，建议操作者每天做一次质控,4.准确性不够,如果所有测定项目准确性差，应更换参比电极,5.样品不能吸入、管路有气泡,（1）进样针堵塞，应拆下进样针用注射器疏通冲洗；（2）三通堵塞，拆下电极用注射器疏通冲洗三通；（3）电极堵塞，拆下电极，并分解单个电极用吸球吹净电极；（4）泵管老化，应更换泵管；（5）管道有破裂或松动，应更换管道或装好管道。,6.管路堵塞,血液中的蛋白、脂类、纤维及血凝块在管路中积聚，造成阻塞,易堵塞的地方主要有下面的4个部分：,（1）采样针与空气检测器部分,（2）电极腔前端与末端部分,（3）混合器部分
16、,（4）泵管和废液管的堵塞,7.电极漂移与失控, 电极漂移的最常见的原因是地线未接好,应检查地线；检查漂移的电极银棒是否未插入信号插座或接触不良； 电压不稳定,最好接UPS不间断电源或质量较好的稳压电源(质量差的稳压电源会引起电极漂移)；, 避免电磁干扰,功率较大的设备应尽量远离本仪器,独立设置电源； 检查标准液及清洗液是否已用完;检查流通池中参比内充液是否太少，应及时注满；, Na、pH电极漂移时应用玻璃电极清洗液清洗,再用蒸馏水反复冲洗即可；, 如果电极全部漂移，则应检查参比电极是否到期； 定位不好，造成溶液未全部浸没电极，应重新进行定位操作；, 参比电极上方有气泡,应轻拍流通池,将气泡移至Na电极上方； 试剂过期或被污染,检查A、B标准液及清洗液瓶,是否有絮状沉淀。,8.测试血样出现异常值, 附近是否有大功率电器开动或漏电(如离心机、电冰箱)，造成电压波动； 测试时吸入凝血；, 溶液未到位,可查看定位是否良好,如果溶液到位不好,可用服务程序中重新定位程序来进行重新定位； 检查盛血样的容器是否污染,是否残留了消毒液等物质； 查看校正因子是否正确,如有异常,可将校正因子清除；是否长时间未标定,可重新标定后再测。,
