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1、,人体疟原虫镜检技术,概述,疟疾是一种由疟原虫引起的蚊传寄生虫病，在我国属于乙类传染病。人体疟疾有4种，即间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。从2013年起，我省已没有本地感染的疟疾病例，全部为输入性疟疾，主要为恶性疟、其次间日疟和卵形疟，三日疟少见。 疟疾与结核和AIDS病一起并列为全球最严重的三大传染病之一。,疟原虫生活史,人疟原虫完成其生活史需要人和按蚊两个宿主。在按蚊体内进行有性繁殖，按蚊是疟原虫的终末宿主；在人体内进行无性增殖，人是疟原虫的中间宿主。,薄血膜中常见的血液成分,中性白细胞,酸性球,血小板,大单核球,淋巴球,红细胞,薄血膜中被疟原虫寄生红血球形态特征,间日疟原虫被寄生红细胞
2、胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多,恶性疟原虫被寄生红细胞 大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少,薄血膜疟原虫形态,间日疟 环状体 红血球：正常。 大小： 较大，约为红细胞直径1/3。 胞浆： 环状，浅蓝色。 核： 红色，一个，偶有二个。 色素： 没有。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体 红血球：大小正常,颜色较深。 大小： 较小，约为红细胞直径1/51/6。 胞浆： 兰色，环状纤细，有时位于红细胞的边缘。常见多个同寄生一红细胞现象。 核： 红色一个,常有二个。 色素： 没有。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟环状体,薄血膜中小滋养体形态特征,间日疟原虫小滋养体 约为红细胞直径的13；环较粗大；核
3、1个；2个核和一个红细胞寄生2个环状体，不如恶性疟原虫多见,恶性疟原虫小滋养体 约为红细胞的 1/6；环纤细；核12个； 一个红细胞寄生2个环状体的常见,INSTITUTEOFTROPICALDISEASES,薄血膜疟原虫形态,间日疟大滋养体 红细胞：胀大褪色，出现形状大小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。 大小：较大。 胞浆：不规则，浅兰色，出现阿米巴伪足，有空泡。 核： 红色，一个。 色素：有，细小杆状，黄葛色，分布不均匀。,薄血膜疟原虫形态,间日疟大滋养体,薄血膜疟原虫形态,恶性疟大滋养体 红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较粗、大小不一、分布不匀、数目较少红色茂氏小点。 大
4、小：较小。 胞浆：兰色，圆形，坚实，体积小。 核：一个，红色。 色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。,薄血膜中大滋养体形态特征,间日疟原虫大滋养体 虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色素细小，黄褐色,恶性疟原虫大滋养体 体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金黄色，晚期结成块状，黑褐色,薄血膜疟原虫形态,间日疟未成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。 胞浆：较不规则，空泡小或消失，浅兰色。 核： 红色，分裂为二个以上。 色素：黄褐色，分布不均匀。,薄血膜疟原虫形态,间日疟未成熟裂殖体,薄血膜疟原虫形态,恶性疟未成熟裂殖体 红细胞：大小正常，颜色较深，可 有茂氏小点。 大小： 较小。 胞
5、浆： 规则，圆形或卵圆形，兰 色。 核： 分裂为二个以上，红色。 色素： 黄褐色颗粒，常集成黑褐 色团块。,薄血膜中裂殖体前期形态特征,间日疟原虫裂殖体前期 圆形或不规则；核分裂为2个以上，空泡消失；疟色素分布不匀,恶性疟原虫裂殖体前期 圆形，核分裂为2个以上；疟色素集成团快,薄血膜疟原虫形态,间日疟成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可见薛氏小点。 大小： 个体较大。 胞浆和核：裂殖子1224个，常为1618个，排列不规则，核红色，胞浆浅兰色。 色素： 黄褐色常集于疟原虫的一边。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟成熟裂殖体 红细胞： 大小正常，颜色较深，可见茂氏小点。 大小： 虫体较小。 胞浆和核：裂殖
6、子832个，常为8 18个，排列不规则或呈二重排列，核红色胞浆兰色。 色素： 黑褐色，集中于中央或一侧。,薄血膜中成熟裂殖体形态特征,间日疟原虫裂殖体 大于正常红细胞；裂殖子1224个，通常1618个，排列不规则；疟色素常集于一侧，黄褐色,恶性疟原虫裂殖体 小于正常红细胞；裂殖子较小，832个，通常818个，排列不规则；疟色素成团快状，黑褐色,薄血膜疟原虫形态,间日疟大（雌）配子体 形状大小：圆或椭圆，较大。 胞浆： 深兰色。 核： 一个，较小，深红色常偏于一边，核周可见明显不染色带。 色素： 黄褐色，均匀散在，数目较多。,间日疟原虫形态,间日疟小（雄）配子体 形状大小：圆形，虫体较大。 胞浆
7、： 浅兰色。 核： 一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，周围有明显不着色带。 色素： 黄褐色,散在分布。,薄血膜疟原虫形态,恶性疟小（雄）配子体 形状大小：腊肠形，两端钝圆。 胞浆： 浅兰色或淡紫红色。 核： 一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，核周可见不染色带。 色素： 黑褐色，疏松地分布于核周围。,薄血膜中大（雌）配子体 形态特征,间日疟原虫雌配子体 大小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在,恶性疟原虫雌配子体 新月型，两端较尖；核小，致密，深红色，位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周,薄血膜中小（雄）配子体 形态特征,间日疟原虫雄配子体 大于正常红细
8、胞，圆形；核大，疏松，浅红色，多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在,恶性疟原虫雄配子体 腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周,小滋养体（环状体）,间日疟原虫 Plasmodium vivax,恶性疟原虫 Plasmodium falciparum,环状体 Ring stage,大滋养体 Trophozoite,裂殖体 Schizont,配子体 Gametocyte,卵形疟原虫 Plasmodium ovale,三日疟原虫 Plasmodium malariae,读片练习,血小板,6. “New Australian“ previously f
9、rom Malaysia. Intermittent temperatures and headaches.,白细胞,薄血膜间日疟环状体,薄血膜间日疟环状体,7. Aches and pains, with fever. ? Glandular Fever, ?malaria.,间日疟,薄血膜间日疟滋养体,薄血膜间日疟滋养体,薄血膜间日疟未成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟成熟裂殖体,薄血膜间日疟配子体,薄血膜间日疟配子体,间日疟,间日疟,间日疟,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,薄血膜恶性疟环状体,恶性疟配子
10、体,恶性疟配子体,21. A member of the UN forces in East Timor. Presented with high temperature.,恶性疟,三日疟原虫: 大滋养体,三日疟,三日疟原虫: 大滋养体,菊花状裂殖体,三日疟原虫: 成熟裂殖体,4. Unspecified overseas travel. Presented with temperature 38.4C,三日疟,卵形疟原虫: 大配子体,卵形疟,18. Recent trip to Southern India- headaches and vaguely unwell.,卵形疟,卵形疟,卵形疟
11、原虫：大滋养体,卵形疟原虫：大滋养体,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜间日疟滋养体,厚血膜间日疟原虫形态,厚血膜恶性疟环状体,恶性疟,恶性疟,7个环状体散在于5个白细胞之间，每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆,恶性疟,厚血膜恶性疟环状体,厚血膜恶性疟配子体,厚血膜恶性疟配子体,恶性疟,厚血膜中疟原虫的形态特征,厚血膜的优点是能够提高疟原虫的检出率，厚血膜上原虫集中，检出率比薄血膜高出十几倍甚至数十倍，尤其是在轻度感染的情况下。但是，厚血膜的镜检亦受到很多因素的影响：厚血膜层次多、背景深、透光差，虫体收缩，疟原虫的形态结构远不如薄血膜上清晰典
12、型；,疟原虫计数,1.显微镜下厚血膜读片顺序为：由上而下，走之字形。 2.从看到第一个疟原虫起开始白细胞和原虫计数。 3.记录200个白细胞中的疟原虫数，如果原虫密度较低，可增加计数白细胞500以上；如果密度较高，则以8分钟内计录的实际白细胞数折算密度。 4.阳性血片计数方法：每间隔5个视野（这5个视野不做白细胞和原虫记数），记录一个视野（即第6个视野）内所有白细胞和疟原虫的数量，如果该视野只有白细胞数而无原虫就记录白细胞数，反之亦然。 5.每微升血按国际标准以8000个白细胞计算。,显微镜下厚血膜读片顺序,疟原虫计数 读片顺序,在显微镜里读片检查时从厚血膜的上缘开始，由上而下，从左至右，由右
13、至左，一行接一行，一个视野连接一个视野，按顺序查完整个血膜。, 不需要计数的视野, 需要进行白细胞、疟原虫计数的视野 如果该视野无原虫，则计数白细胞数 看到第一个疟原虫，计数开始,疟原虫计数方法,厚血膜, 按视野顺序，从看到第一个疟原虫计数开始，记录200个白细胞中的疟原虫数，如果原虫密度较低，可增加白细胞计数500 1 000 个。 白细胞疟原虫计算公式：疟原虫数 计数的白细胞数 患者每微升血白细胞数 = 疟原虫数/l血。 如果不知患者的白细胞数，则每微升血以8 000个白细胞计数(国际标准) 。,疟原虫计数方法,疟原虫计数方法,例如 计数200 WBC中有35个疟原虫，在不知患者白细胞数的
14、情况下，以每微升血8 000个白细胞计数, 由此计算出每微升血液疟原虫密度为：,35（计数的疟原虫数）200（计数的白细胞）x 8000（每微升血白细胞数） =1400 / l,答：该患者的疟原虫密度为1400 / l。,镜检工作所需注意的事项,1、在镜检中显微镜的使用：油镜、目镜、视野需按顺序逐个检查。 2、疟原虫镜检工作中，凡是发热病人。疟疾、疑似疟疾、及不明原因的发热病人均需进行疟原虫镜检。 3、做好镜检登记：凡是镜检疟原虫的均需如实登记，阴、阳性片保存待考核。 4、每一个月上报一次镜检数。包括镜检人数、阳性、阴性。 5、如发现恶性疟以最快的通信方法，在24小时内报县、市、省疾病预防控制机构，阳性血片留待上级复核。 6、对每例确诊疟疾病人，在进行抗疟治疗前须采集病人静脉血510ml，并制作厚薄血片4张和滤纸血4份，以送省进行分子生物学鉴定。,谢谢！,
