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1、,分 析 化 学 实 验,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和 色谱参数的测定,一、实验目的,熟悉高效液相色谱相关参数的测定方法,2. 了解高效液相色谱仪的使用方法,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,1. 仪器与试剂 仪器:日立L-9100输液泵,L-7400紫外检测器;ODS色谱柱。 试剂:甲苯(分析纯),萘(分析纯),苯磺酸钠(分析纯),甲醇(色谱纯),纯净水(重蒸水)。,二、实验条件,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,2. 色谱条件 色谱柱:ODS柱(4.6150mm, 5m); 流动相:甲醇-水(80:20,v/v); 流速:0.8 ml/min ; 检测
2、器:UV 254 nm ; 进样量:20 l。,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,1高效液相色谱法方法的特点作为一种分离分析方法,应用广泛,具有分析效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高等优点,三、实验内容,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,2高效液相色谱仪介绍(1),实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,2高效液相色谱仪介绍(2),实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,进样系统,检测系统,泵,色谱柱,流动相,3N2000色谱工作站的使用在线工作站(on-line)离线工作站(off-line),实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱
3、参数的测定,4高效液相色谱仪性能检查 流量精度 噪音和飘移 定性重复性考察定量重复性考察,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,5色谱参数的测定,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,四、实验操作,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,操作步骤 1)观察流动相流路;,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,操作步骤 2)开电源开关; 3)启动泵; 4)设定压力上、下限; 5)设定分析流速及压力上下限;,设定流速及压力上/下限,泵启动停止键,电源开关,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,操作步骤 6)设定波长,波长设定键,零点调节键,检测器 电源开关,实验九 高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定,操作步骤 7)通过进样器进样; 8)进样分析; 9)记录数据与数据处理; 10)分析结束后停泵,将进样阀手柄置LOAD位置; 11)停泵; 12)关闭电源开关。,Thank you,