《Nanodrop_2000微量紫外分光光度计中文操作守则》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Nanodrop_2000微量紫外分光光度计中文操作守则（58页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Nanodrop2000独特的创新设计包括：1、微量的样本检测体积-专利液体表面张力技术，仅需0.5ul的样本。2、快速、简单的样本处理-大多数样本无需稀释，直接上样。3、快速的检测时间-不到5秒钟即可得到完美的检测结果。4、更宽广的光谱范围-190-840nm，可以测定低波长下的蛋白广吸收。5、更高的样本浓度检测范围-检测上限高达15,000ng/ul(dsDNA)一、简介NanoDrop 2000 超微量分光光度计是NanoDrop 的最新产品，应用液体的表面张力特性，样品体积只需要0.52ul，在侦测台上，经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材侦测吸
2、收值的优点。它使用高能量氙灯(pulsed xenonflash lamp)可提供190840nm 的全光谱侦测，且不需要暖机，开机后立即使用。搭配高感度CCD array 侦测器，侦测吸收值可高达300Abs(dsDNA 浓度215000ng/ul)，大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可侦测。待测样品的均质性是NanoDrop 2000 的最高要求，一般核酸、蛋白质样品能在侦测前以vortex mixer 震匀为最佳，若无vortex mixer 也应以pipette 吸放数次混匀。若担心genomicDNA 可能因前述动作而断裂，则改以55 ?C 加热约一分钟，使样品在侦测前呈现均匀状态
3、，以确保2ul 具有代表性。侦测时选择不同侦测模式，可以得到最快速的结果： Nucleic Acid 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm 吸收值(换算成10mm 光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio 及核酸浓度。 UV-Vis 190840nm 间所有波长的吸收值及光谱(以1mm 光径吸收值呈现)。 A280 蛋白质定量法 280nm 吸收值(换算成10mm 光径吸收值)、260/280 ratio 及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质，须具有已知的质量消光系数(mass extinctioncoefficient)方可计算。 BCA、Bradfo
4、rd 及Lowry 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果，自动画出标准曲线并计算R square，待测蛋白质浓度。* 蛋白质侦测模式目前提供BCA、Bradford 及Lowry 三种常见定量呈色剂，因呈色剂随时间会逐渐加深，使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品，在最佳时间内完成侦测，以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品，每个标准品最多可做五重复。* 测蛋白质时样品体积需使用2ul，每个样品侦测后需以labwipe 擦拭1520 回，以避免呈色剂与蛋白质的残留。二、技术参数：1、波长范围: 190-840nm；2、波长精度: 1nm；3、分辨率: 1.8 nm (FWHM
5、 at Hg 253.7 nm)；4、其它: 1mm 光程长度(可自动调整到0.05mm)；5、检测下限：2ng/l(dsDNA)；6、检测上限：15000ng/l(dsDNA)；7、吸光率精确度：0.002 absorbance (1mm 光程)；8、吸光率准确性：2%(at 0.76 at 257 nm)；9、吸光率范围：0.02-300 (相当于10mm 光程)；10、核酸检测周期： 5s；11、体积：14cm20cm。三、使用方法举例：dsDNA：在主画面点选Nucleic Acid，计算机与仪器自动完成联机。依照DNA 所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA 溶于二次水、TE buf
6、fer 或哪一组kit 的elution buffer)取出1.5 ul 点在侦测台上，放下上臂后再按Blank。在右上方拉选Sample Type 选DNA-50，在Sample ID 位置输入样品名称，将样品混匀，取出1.5 ul 点在侦测台上，放下上臂后再按Measure。四、结果整理：NanoDrop2000 软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处，若未指定，则档案会存在上一个使用者的档案内。 /BOP%SPQPiYa( /BOP%SPQ K1pBa?-WPSUFYNJYFSKDWPSUFYNJYFS9QJQFUUFbQbHFOPNJD%/V?y-T75 $FBsP-C( VMVaPZ,JNXJQFZb5|Bf|/A8|NMBCPSBUPSZXJQFVQ|=|QZ_QZ%/ Q1SPUFJO QbaBA8?SBQBh-B|BbaVP_VMSA88+8p5V VMbihPVMQJQFUUFE8AEby4&+APVMbaqKpHhW%iGUpbK?3fVAiqC/bV54A/=|DA1HV|8FvVMbAa VPc)ZESPGMVPSJDDJE)KA8VPb
