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1、网织红新参数的临床应用,Sysmex 学术部 学术二课 李覃,病例,一58岁男性患者6年前曾患淋巴瘤。 2008年4月16日初觉头晕，逐渐出现左侧肢体乏力。血液科主任怀疑是淋巴瘤颅内转移，建议先用MTX高剂量化疗再做自身骨髓移植。 5月5日开始对患者进行第一次MTX大剂量化疗。 5月17日患者脚趾关节处已经开始出现溃烂，请来一位年轻皮肤科值班医生，认为药物过敏，开出药水涂擦。患者出现四肢多形红斑，水肿，考虑MTX过敏可能，予激素治疗后好转出院。主任于5月21日下了出院令。 出院次日，该患者手脚溃烂得更厉害，“路都走不了了，晚上痛得彻夜难眠”。 6月15日第二次高剂量化疗后，患者的反应更大，口腔
2、严重溃疡，无法饮食，且手脚溃烂加剧，颜面发黑，白细胞不跌反而剧增。 6月20日出院后，患者的病情急转直下，脸部皮肤有如被灼烧后整体发黑，手脚溃烂，脓水四出，口腔脓肿糜烂且伴有出血，无法张口，滴水未进，更伴有腹泻且大便出血。 6月23日再次入院住外宾病房，病房便开出病危通知，后改为病重通知。次日，开了广谱抗生素，应验了此前说过的话，“即使感染了，还有抗生素可以控制”。 6月25日，患者已经体无完肤，心跳过速，高烧39.540度，滴水不进，每日腹泻5至7次，血像及其他指标急剧下降。 广谱抗生素使用一周后，患者依然高烧不退，腹泻不止，更引起电解质紊乱。最终死亡。,常用抗肿瘤药物分类（按对细胞增殖周期
3、影响）,细胞周期划分为5个时相： G0期：静止期，G1期：合成前期，S期：合成期，G2期：分裂前期，M期：有丝分裂期 周期非特异性药物，即对增殖或非增殖细胞都有作用 如氮芥类、环磷酰胺、抗生素类等。 周期特异性药物，作用于细胞增殖整个或大部分周期 如氟尿嘧啶等抗代谢类药物。 周期时相特异药物：药物选择性作用于某一个时相 如阿糖胞苷、羟基脲抑制S期， 长春新碱对M相的抑制作用。 这类药物对骨髓及瘤 细胞的量效曲线也随剂量增大而下降，但达到一定剂量时即向水平方向转折，成为一个坪，即再增加剂量，不再有更多的细胞被杀死。,抗肿瘤药物的不良反应,白细胞、血小板减少，如白细胞降至30109/L、血小板降至
4、80109L时须暂停治疗。 恶心、呕吐、腹泻、口腔溃疡等消化道反应，可对症处理或用药前给氯丙嗪等。 毛发脱落。 免疫功能降低，病人容易并发细菌或真菌感染。 血尿 一般情况下，第一疗程后隔23个月，待血象恢复正常时，方可第二疗程治疗。,网织红细胞的新参数进展,RET-He:网织红细胞血红蛋白含量,LFR:低荧光强度网织红细胞比率,MFR：中荧光强度网织红细胞比率,HFR:高荧光强度网织红细胞比率,IRF：未成熟网织红细胞百分比,IPF: 未成熟血小板比率,新参数,RET#% 网织红细胞计数的绝对值和百分比,IRF,未成熟网织红细胞IRF(MFR+HFR)： 正常情况下占总网织网红细胞的5%. 胞
5、浆内含有较多量的RNA 在核酸酶降解过程的前三天存在 由于骨髓增生旺盛而释放至外周血,IRF 未成熟网织红细胞,IRF,Immature reticulocyte fraction,正常参考范围,下表是日本一文献提供网织红细胞个参数的参考范围，其中男性2005 名，平均年龄47.4岁；女性450名，平均年龄46.7岁。 建议每个实验室建立自己的参考范围。,1. Evaluating the extent of bone marrow suppression during chemotherapy,解放军总医院 临床检验科,Immature reticulocyte fraction (IRF)
6、-an universal marker of hemopoiesis in children with cancer?,PURPOSE: （Adv Med Sci. 2006;51:188-190) Anemia is one of the most frequent side effects of anticancer treatment, it is also caused by disease itself. Reliable laboratory tests indicating hematological recovery after chemo- and radiotherapy
7、 are needed. Effective erythropoiesis can be monitored by quantitative measurement of reticulocytes. The amount of RNA in these cells can be assessed with flow cytometry and divided into low- (LFR), middle- (MFR) and high-fluorescence reticulocytes (HFR). MATERIAL AND METHODS: The aim of our study w
8、as to find the most sensitive indicator of anaemia among reticulocyte subpopulations assesed by flow cytometry in children with cancer. 46 children with different neoplasmatic diseases were enrolled into the study. RESULTS: 1) we did not find any differences between control and examined group at the
9、 time of diagnosis except for IRF, which was higher in examined group (p = 0.001); 2) IRF was lower already 2-4 days after end of chemotherapy (p = 0.03), and rised before next regimen (p = 0.0006). CONCLUSIONS: n we showed that IRF is not only the first sign of hematologic recovery but also very of
10、 postchemotherapy aplasia in children with cancer and may serve as a additional parameter of bone marrow function in clinical studies.,肝硬化患者未成熟网织红细胞指数的观察,对Child-pugh 不同分级的肝硬化患者IRF 的观察中,A 组患者IRF 检测结果与正常对照组比较显著升高( P 0. 05) ,随着肝硬化患者病情的迁延,B 组、C组的IRF 比正常对照组升高有极显著差异( P 0.01 , P 0. 001) 。 肝硬化患者血红蛋白测定结果显著低于
11、正常对照组, IRF测定结果与对照组相比显著升高,提示肝硬化患者存在贫血现象且较严重,其骨髓造血功能活跃,未成熟细胞增加,因此骨髓释放到外周血中的网织红细胞增加,幼稚网织红细胞亦增加,使IRF 增高。,Anemia of chronic disease: pathophysiology and laboratory diagnosis,Classic iron deficiency (ID) does not represent a challenge for the laboratory and physicians. ACD The anemia that accompanies infe
12、ction, inflammation, and cancer . features apparently normal or increased iron stores. However, 20% of these patients have iron-restricted erythropoiesis (functional ID). Functional ID leads to a reduction in red cell hemoglobiniza-tion, causing hypochromic microcytic anemia. The diagnosis of functi
13、onal ID in real time is based on measuring the hemoglobin content of reticulocytesfor erythropoiesis The therapeutic implications of the diagnostic plot are to differentiate patients who should be administered oral iron supplements, recombinant human erythropoietin (r-HuEPO), or a combination of r-H
14、uEPO and iron.,Authors: Christian Thomas, Lothar Thomas,Laboratory hematology : official publication of the International Society for Laboratory Hematology. 01/02/2005; 11(1):14-23.,肾性贫血患者网织红细胞参数的变化及临床意义,讨论摘要,这种以EPO生成减少为主要原因造成骨髓红系增生相对减低而出现的轻度贫血，在肾病早期Ret的改变并不明显，但IRF已出现明显降低，这表明在红系增生减低时，IRF是反映红系增生减低比较敏
15、感的指标。 因此，网织红细胞参数的检测有助于了解肾病患者的骨髓增生程度和红系的生长情况，IRF对肾性贫血的疗效判断具有重要价值。 经EPO等抗贫血药治疗后，IRF、Ret、MFR、HFR升高，提示EPO等治疗有效。,www.sysmex.co.jp,大卫等人也评价了IRF在骨髓移植病人中的作用。他们发现同RET%相比，IRF通常先于ANC对骨髓活性情况出现反应。IRF的优点在于它不象ANC那样受临床或亚临床感染影响。骨髓移植后IRF升高到20%以上时,表示红系移植成功。 已报道研究结果均提示IRF(MFR+HFR) 是估计是骨髓移植成功最敏感的指标。也是目前实验室常规方法可测得的最早的反应指标
16、。,IRF的临床意义,肿瘤放化疗的监测 避免造成严重的骨髓抑制 评价骨髓增生能力，判断贫血分型，贫血的鉴别诊断 网织红细胞增多：溶贫 网织红细胞减少：再障 贫血的鉴别诊断：缺铁贫和慢性贫血的鉴别诊断 评价疗效 骨髓移植后监测骨髓造血恢复 观察贫血治疗,RET-He,成熟RBC,FSC,RBC-He (MCH),FSC,RET-He,RET测定通道中,FSC（前向散射光）强度不仅反映红细胞的大小，还反映Hgb的量。RET-He根据该信号强度计算，相当于网织红细胞(RET)中的Hgb量。,荧光强度（主要是核酸量）,FSC（大小、Hgb）,RET,RET-He 网织红血红蛋白含量的测定,RET-He = (5.5569 x exp(0.001 x RET-Y) RET-Y为平均网织红细胞前向散射光强度,铁循环,贮存 STORAGE,输送 TRANSPORT,功能 FUNCTIONAL,血清铁 TSAT,血清铁蛋白,含铁血红蛋白,RET-He,sTfR,骨髓,RET,
