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1、注意: 不要打开培养皿!,实验5 厌氧细菌和白喉杆菌,实验目的： 了解厌氧菌的培养方法及其常用培养基介绍. 熟悉常见厌氧菌的形态结构特征和厌氧培养基内生长现象. 熟悉白喉杆菌的形态结构特征.实验内容： 厌氧培养方法介绍和厌氧培养示教. 常见厌氧菌的形态结构观察. 厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察. Albert染色观察白喉杆菌形态结构.,一、厌氧菌培养方法 厌氧菌所需的气体环境: 无游离氧，5%-10%的CO2 1.化学方法 2.物理学方法 3.生物学方法,1 化学法： 保险粉法: Na2S2O4+2NaHCO3+O2=2CO2+Na2SO4+Na2SO3+H2O 产气袋法：KMB4+H2OH
2、2+O2 H2O 焦性没食子酸法：焦性没食子酸+碱液+O2焦性没食子橙,钯,2 物理法： 抽气换气法,厌氧手套箱,3 生物法,牛乳基,庖肉基,庖肉培养基: 生成不饱和脂肪酸、还原性谷胱甘肽肉汤 肉渣凡士林 牛乳培养基:pH6.8 牛奶(糖 、蛋白）石蕊(pH指示剂8,蓝色)凡士林.,保险粉法培养破伤风杆菌。（示教）,2.常见厌氧菌的形态结构观察（示教镜）,破伤风梭菌的芽胞：正圆形、比菌体大，位于菌体末端（特殊染色，x1000）,产气荚膜杆菌粗大的菌体和宽厚荚膜（负染，x1000）,双岐杆菌：G+b，有时有分支生长（GS，x1000）,3.厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察,乳糖 酸+气体 牛乳酪蛋白 凝固冲烂,“汹涌发酵”现象的发生机理：,产气荚膜梭菌,4. Albert染色观察白喉杆菌形态结构,吕氏血清斜面培养基-白喉杆菌 （1）制片：涂片干燥固定 （2）Albert染色步骤：染液A： 3-5 min，水洗.染液B： 1 min，水洗，干燥。 （3）油镜观察：形态，排列，异染颗粒.,典型排列呈L, V 型或栅栏状，一端或两端有比菌体染色深的异染颗粒。,实验报告绘图描述白喉杆菌Albert染色结果,THANKS,
