乙肝检验贾铁文

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1、乙 肝 检 验 1 2 3,山医大二院检验科贾铁文,健康大讲堂,病毒性肝炎（viralhepatitis）是由各种不同的肝炎病毒引起的一组以肝脏损害为主的传染病。类型 病因 血清标志物 甲肝： 甲型肝炎病毒（HAV） 抗HAV-IgG/IgM 乙肝： 乙型肝炎病毒（HBV） 乙肝两对半、前S1/S2 丙肝： 丙型肝炎病毒（HCV） 抗HCV-IgG/IgM 丁肝： 丁型肝炎病毒（HDV） 抗HDV-IgG/IgM 戊肝： 戊型肝炎病毒（HEV） 抗HEV-IgG/IgM,病毒性肝炎,临床症状： 恶心、呕吐、厌油、乏力、食欲减退、肝功能异常 黄疸 无症状感染或自限性隐性感染 慢性肝炎或肝衰竭病理

2、改变：以肝细胞变性、坏死、炎症反应为特点。,病毒性肝炎,乙肝：全称为乙型病毒性肝炎，是一种由乙型肝炎病毒（HBV）感染机体后所引起的疾病。 乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒。,乙型病毒性肝炎,乙肝流行的地区分布图,乙型肝炎感染呈世界性流行，不同地区HBV感染的流行强度差异很大； 据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝癌（HCC）。,乙肝流行现状,国内现状： 乙型病毒性肝炎在我国是一种高发传染病，人群感染率达60%左右； 我国现有乙肝病毒携带者1.2亿人，占世界乙肝病毒携带者3.5亿人的1/3； 根据

3、推算，我国现有慢性乙肝患者约3000万人，每年新发生的急性肝炎病人就有120多万，其中甲型肝炎约占50%，乙型占25%，丙型占5%，戊型占10%，其他型及未定型占10%。 每年约有30万人因晚期肝病而死亡。,乙肝流行现状,乙肝病毒本身并不损伤肝脏 损伤肝脏的本质是人体清除病毒的免疫反应,乙型病毒性肝炎致病机理,免疫系统,免疫功能低下 （慢性乙肝）,免疫功能健全 （清楚病毒）,免疫功能超敏 （重型肝炎）,免疫耐受 （HBV携带者）,幼龄感染 成年感染,90%慢性化 10%清除病毒 急性肝炎 1%暴发肝炎,非活动性携带 慢性肝炎 （HBeAg） （HBeAg + ）,40%肝硬化,95%清除病毒

4、5%慢性感染,非活动性携带 慢性肝炎 （HBeAg ） （HBeAg + ）,1520%肝硬化,中国人感染HBV起始于幼龄期,各种传染途径的本质都是 血液传播,医源性传播,性传播,母婴传播,血液,血液,血液,乙肝病毒的传播途径,什么是血液传播,血液传播的条件：病毒的数量、接触的程度 通常理解的血液传播途径：输血、共用针筒 易被忽略的血液传播的途径：共用剃须刀，共用牙刷，共用毛巾，纹身、纹眉、穿耳、洞鼻、环耳廓等，因刀具的不洁造成传播。 中国因不安全注射造成的乙肝感染者不少于3600万人 中国疾病预防控制中心,乙肝病毒的传播途径,接吻、共餐、共同工作，共餐共宿舍，大量流行病学工作证明无传染危险。

5、中国疾病预防控制中心病毒性肝炎知识问答 ,蚊虫叮咬不能造成传播：有人已做过研究，蚊体内无乙肝病毒繁殖，蚊叮人无胃内容物吐出，蚊繁殖季节与非蚊繁殖季节与乙肝病毒带率的高低无关连。中国疾病预防控制中心病毒性肝炎知识问答 ,乙肝病毒的传播途径,什么是母婴传播?,分娩时母亲的血液、阴道分泌物通过胎儿 的破损皮肤、粘膜而传染； 胎盘剥离时微量血液漏至胎循环中.,乙肝病毒的传播途径,电镜下可见大球形颗粒、小球形颗粒和管型颗粒三种形态。 完整的HBV颗粒为大球形颗粒，又称 Dane颗粒，直径42nm，分为包膜与核心两部分，包膜HBsAg，核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶、HBcAg和HBeAg等，是

6、病毒复制的主体。,电镜下形态,HBV模拟图,完整病毒颗粒，内含DNA，具有复制功能,空泡型病毒颗粒，无DNA，不具有复制功能,乙肝病毒存在的三种形式,HBV基因组,HBV DNA是由长链L (负链) 和短链S (正链) 组成的不完全双链环状DNA，短链的长度相当于长链的50%85%。 HBV DNA长链载有病毒蛋白质的全部密码，有4个开放读码框架(ORF)，分别称为S、C、P和X区 。编码7个蛋白质。 HBV DNA易发生变异，特别是前S或S区基因较易突变。,嗜肝DNA病毒的共同特点： 内含33.3kb松散环状、部分双链DNA基因组 及DNA聚合酶；病毒的复制需逆转录过程。,A(n),mRNA

7、,cccDNA,HBsAg包膜,负链DNA,包裹后的前基因 mRNA,传染性HBV 病毒颗粒,传染性HBV 病毒颗粒,部分双链 DNA,逆转录酶,DNA 聚合酶,肝 细 胞,HBV在肝细胞内的复制,细胞核,胞浆,HBV对外界环境抵抗力较强，30-32至少可存活6个月，-20可存活15年。100干烤1小时；100直接煮沸2分钟；微波（频率2450MHz、输出功率500W、75）1-3分钟，0.5%过氧乙酸，3%漂白粉溶液，5%次氯酸钠和环氧乙烷等处理均可灭活HBV。,乙肝病毒抵抗力,一、肝功能指标的检测（生化检测）（是否有肝功能受损） 二、HBV血清标志物的检测（是否有HBV感染）肝炎病毒本身组

8、成该病毒的成分抗病毒抗体（血清标志物检测） 三、HBV DNA、基因型和变异检测 四、HBV肝组织病理学检查,HBV感染的实验室检查,临床意义：谷丙转氨酶（ALT）主要存在于肝细胞中。当肝脏发生炎症、坏死时，ALT就会从肝细胞内大量释放入血，导致血清中ALT升高，因此ALT升高是判断肝细胞损害的一个敏感指标。但是除了病毒性肝炎外，其它类型的肝炎或肝脏疾病，ALT也会升高。,主要指标： 反映肝细胞损伤的项目（酶学检查）：谷丙转氨酶ALT（GPT）、谷草转氨酶AST（GOT）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GT或GGT）其他酶类,乙型肝炎的生化指标检测,反映肝脏分泌和排泄功能的项目： 总胆红

9、素（TBil） 直接胆红素（DBil）反映肝脏合成贮备功能的项目： 总蛋白（TP） 白蛋白（ALB） 免疫球蛋白（Ig） 凝血因子,乙型肝炎的生化指标检测,反映肝脏纤维化和肝硬化的项目（肝纤四项）： 透明质酸酶（HA） 层粘连蛋白（LN） III型前胶原（PCIII） IV型胶原（IV-C）反映肝脏肿瘤的标志物： 甲胎蛋白（AFP）,乙型肝炎的生化指标检测,机体感染HBV后产生相应的免疫反应，形成多种不同的抗原(Ag)、抗体（Ab）系统。,乙肝的血清学标志物检测,乙肝的血清学标志物检测,表面抗原 HBsAg 表面抗体（HBsAb） 外衣壳抗原 前S1抗原 前S1抗体前S2抗原 前S2抗体核心抗

10、原 HBcAg 核心抗体（HBcAb） 内衣壳抗原e抗原 HBeAg e抗体（HBeAb）,乙肝五项,定性检测： 酶联免疫吸附实验（ELISA）：灵敏性高，成本低，适用于普通病人筛查； 胶体金免疫层析法（金标法）：简便易行，可用于急诊病人快速检测；定量检测： 化学发光法定量检测：可用于HBVMs为临界值的病人的确证；可间接反映宿主HBV的复制水平，在评价抗病毒治疗的病毒学应答、疗效和判断预后方面有重要意义。,乙肝血清学标志物检测方法学,乙肝表面抗原（HBsAg）： 又称为“奥抗”，1963年Blamberg在澳大利亚土著人血清中发现； 是乙肝病毒的外壳，保护乙肝病毒DNA； HBsAg(+)只

11、能说明人体内有乙肝病毒外壳，但有无乙肝病毒DNA则需要结合PCR检查来确定； 乙肝潜伏期（最早出现）； 无症状的乙肝病毒携带者； 慢性乙肝（结合其他几项指标来判断）。 定期复查,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝表面抗体（HBsAb） 保护性抗体，可中和掉乙肝病毒的感染力； 阳性表明既往感染过乙肝病毒，但已经排除病毒； 接种过乙肝疫苗，产生了保护性抗体； 滴度越高，保护力越强；,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝e抗原（HBeAg）:是乙肝病毒内核的主要结构蛋白； 可溶性抗原，血清中可检测到； 是急性感染的早期标志； 是血液高传染性的标志； 通常在血清中存在时间较短，为3-6周； 持续阳性

12、，转变为慢性乙肝的可能性大。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝e抗体（HBeAb）:e抗原转阴数月出现e抗体阳性 一般来说，e抗体阳性预示病毒复制减少或停止。 e抗体阳性，HBV DNA阴性：说明体内乙肝病毒复制减少，但如果HBV DNA阳性，则说明体内还存在病毒大量复制，有可能是病毒变异，需要重视。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝核心抗体（HBcAb或者抗-HBc）: 非保护性抗体；是乙肝病毒侵害的指标之一 HBcAb-IgM：判断HBV急性感染和重新活动的慢性 感染标志，血液中出现最早，持续3-6个月，持续高滴度，有慢性化倾向。慢乙肝活动期阳性，表明病毒在复制，有传染性。 HBc

13、Ab-IgG：是既往感染的标志，可在体内持续存在数年至数十年。是流行病学研究的指标。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前S1抗原（Pre-S1）： （一）、感染状况指标：主要存在于血清中HBV表面，是HBsAg氨基端延长的的一段多肽。提示机体内含有HBV就有前S1抗原。 前S1抗原与HBV-DNA，HBeAg检测率高度符合是一项十分重要的病毒复制指标。可作为HbeAg和HBV-DNA检测的补充和对照。 前S1抗原的测定结合“乙肝五项”检测，可弥补因病毒变异和其它原因造成的HBeAg（-）的“误寻”。 病毒附着于肝细胞上，最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸（AA）21-47片段，变异的病毒

14、只要这一区段完好就有传染性。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前S1抗原（Pre-S1）：（二）、预后及疗效的判断急性乙型肝炎患者前S1抗原阴转越早，预后越好，是病毒清除的最早迹象，反之，前S1抗原持续阳性，将发展至慢性肝炎。 因病毒基因变异的HBeAb（+）慢性乙型肝炎病人，较易进展为肝硬化，甚至肝癌。加强检测前S1抗原，是一种检测疾病预后的良好手段。 前S1抗原可作为药物抗病毒疗效的指标，是对HBV-DNA和HBeAg指标的补充和加强。 前S1抗原出现在急性乙型肝炎感染的最早期，在转氨酶升高前即可查出，提示可作为早期诊断乙肝病毒感染。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝前S2抗原（P

15、re-S2）： 前S2蛋白位于S区的中分子蛋白上。 是反映乙肝病毒感染与HBV病毒复制的指标。 可在HBeAg阳性，HBV DNA阳性的急性乙肝患者早期血清中溅出。 在对慢性乙肝患者动态观察中发现，病情急性发作期ALT升高前就有不同程度的前S2升高，其峰值常与HBV DNA平行而早于ALT峰11周。提示S2抗原可作为早期感染乙肝的指标，更早于两对半及ALT的检测。 与病毒对肝细胞附着及入侵有关；可诱发产生前S2抗体，从而起到清除HBV的作用。,乙肝的血清学标志物检测临床意义,乙肝系列检测常见结果模式的临床意义,九种常见检测结果组合临床意义,乙肝系列检测常见结果模式的临床意义,几种罕见模式的结果分析,在此种少见模式下最好结合HBV DNA指标综合分析结果,HBV DNA定量检测的意义：,HBV分子生物学诊断,HBV DNA是HBV的遗传物质，当HBV侵入肝细胞后，会以HBV DNA为模板，合成新的HBV颗粒并释放入血，故HBV-DNA是病毒复制的一个重要指标。因此，HBV DNA定量检测可反映病毒在体内的复制水平。,