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1、动物实验基本操作技术,一、实验动物的麻醉方法,全身麻醉法：吸入法，注射法 局部麻醉法：浸润麻醉，表面麻醉,（一）全身麻醉法,1、吸入法,麻醉药： 乙醚 氯仿 三氟乙烷,2、注射法麻醉药：巴比妥类药物氯胺酮乌拉坦水合氯醛,（一）全身麻醉法,（二） 局部麻醉法,1% 盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉0.022盐酸可卡因 表面麻醉,麻醉药物应用原则： 依据动物体重计算麻醉药物的剂量； 依据动物生命体征变化控制给药速度； 掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。,针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。,麻醉具体操作：,家兔全身麻醉,麻醉剂：3%戊巴比妥钠，1ml/kg（30mg/Kg ）,前1/2
2、快速推入，使动物能顺利、快速地渡过兴奋期；后1/2速度宜慢，且边注射边注意观察动物的生命体征变化，当确定已达到麻醉效果时，即停止给药，不必急于将剩余的麻醉药物全部推入。,给药方法：耳缘静脉注射,麻醉成功标志,角膜反射迟钝 或消失,肢体肌肉松弛,疼痛反射消失,呼吸变深变慢,二、动物实验常用手术器械,1、手术刀,由刀片和刀柄组成，可分为大、中、小号不同类型。 大号切开皮肤； 中号切割脏器组织； 小号切割特殊部位。 安装：先用持针器（或直型止血钳）夹住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙对准刀柄上的槽隙，顺势推入即可。,手术刀握持方法,执笔式：即以持笔的手法握住刀柄，适用于小范围内的组织切开，随意性强
3、，可作垂直或水平切割。,持弓式：右手中指、无名指按压在手术刀柄的外侧缘，拇指放在刀柄内侧缘，食指按压在刀片后13处。适用于切开皮肤。,2、组织镊,组织镊和眼科镊。 组织镊钳夹组织，分离组织和筋膜。 眼科镊分离血管。 使用手法：以食指、中指放于器械的外侧缘，拇指放于内侧缘，集3指的力量实施操作动作，而且适用于左右手的同时操作。,3、组织剪,4、止血钳,止血和分离组织。 使用方法：以拇指、中指（或无名指）分别套人止血钳的套扣内，控制止血钳展开的力度，以食指放在止血钳的关节部位，控制止血钳的方向和钳夹组织部位的准确性。 切忌左右手分别抓住止血钳的套扣部位，用两手的合力进行止血或分离组织。,5、持针器
4、,持针器的基本构件与止血钳大致相同，使用方法基本一致。,6、缝合针,有圆针和角针两种，圆针用于缝合组织结构； 角针边缘锋利，除具有穿刺功能外，还具有切割的作用；缝合针需配合持针器同时使用。,7、探针,包括金属探针和玻璃分针；用于对精细部位的分离和游离等操作。有时，在实施血管插管技术时，切开血管壁后往往借助于探针先将切口挑起，然后插入导管。,三、动物实验常用插管技术,气管插管术颈动脉插管术颈静脉插管术导尿管插管术,插管技术的基本步骤,1. 动物称重、麻醉、固定。 2. 插管部位皮肤去毛、备皮。 3. 皮肤切开。 4. 皮下组织结构的分离。 5. 目标器官或组织结构的游离。 6. 导管的插入或固定
5、。,家兔颈部神经和血管的解剖位置,迷走神经 交感神经,减压神经,气管插管术,1、麻醉固定、颈部皮肤去毛、备皮,2、在颈前区正中作一约5-7cm的切口,3、钝性分离皮下组织、肌肉，游离出气管，穿线备用。,4、在甲状软骨下方第3-4个环状软骨上作一倒“T”形切口，插入“Y”形气管插管，并用线固定好。,颈动脉插管技术,1、由颈正中剪开一约5-7cm的口 2、钝性分离皮下筋膜,3、分离一侧颈总动脉，穿双线备用。,4、结扎远心端，在距结扎线约2-3cm处用动脉夹夹闭颈总动脉近心端。,5、在靠近结扎线处用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小约为动脉口径的1/31/2。,6、将压力换能器与动脉插管连接好并充满肝
6、素，向近心端插入动脉插管，用线结扎牢固。,三通的使用：,进入BL410/420系统。,选择“实验项目” 选择“循环实验” “兔动脉血压调节”实验模块；,7、打开换能器开关，观察并记录动脉血压。,或选择“输入信号”选择“通道”“压力”点击“开始”实验按钮，即可在屏幕上观察到正常的血压曲线。,动脉插管注意事项,动脉插管和血压换能器内注满肝素生理盐水以排气抗凝。 压力换能器与动物心脏等高。 动脉插管与颈总动脉呈一条直线，方向一致 。 掌握好三通管的方向。 结扎固定牢固。,颈静脉插管术,尿道插管术,最常用的尿液收集办法，可用于反映较长时间内尿量变化的实验。常用于雄兔。 将动物固定于手术台上（可轻度麻醉）。取一根粗细合适的导尿管，在其头端约12cm涂上液体石蜡减小摩擦。将导尿管从尿道口徐徐插入，当导尿管插入膀胱后，即可见尿液从管中流出，用线或胶布固定。,操作练习,全身麻醉 家兔 气管插管颈总A插管,
