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1、硫化氢矿泉浴治疗高血压及高 同型半胱氨酸血症的研究,郝万鹏,一、立项背景 1、硫化氢（H2S） 2、同型半胱氨酸(Hcy) 3、 H2S与Hcy的关系 4、高血压疾病 5、矿泉浴疗法 6、本课题研究目的,1、 硫化氢：一直以来人们认为它只是一个有毒的废气。 1996年被科学家证明人体内源性硫化氢是一种神经活性物质。硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后发现的一种新的气体信号分子。近年来，内源性硫化氢在神经系统，心血管系及呼吸系统等方面的作用，主要表现为参与一些疾病的病理机制，其在药物开发的前景等方面也越来越多的引起人们的重视。由于其具有多种生理功能，并在多系统多种疾病的生理和病理过程中，起重要作用。
2、近年来大量文献报道了许多学者做的动物实验模型结果、临床研究及流行病学调查,大量临床研究发现，原发性高血压，肺动脉高压、冠心病等疾病的血清硫化氢水平显著降低。在高血压患者中，随着高血压水平的增加，而硫化氢浓度降低。随着血压的升高,患者血压与血浆硫化氢浓度呈负相关。说明内源性H2S的不足已在早期参与了高血压的发生，证实了硫化氢参与人体内心血管功能的调节。特别是高血压合并脑卒中的患者。外源性给予硫化氢的供体（硫氢化钠）后，可以明显抑制血压升高程度。硫化氢可是防治高同型半胱氨酸血症的新吧点。硫化氢具有广泛的生物效应如平滑肌舒张效应，诱导细胞凋亡、促进血管新生等作用，传感分子作用等作用。显示出极大的治疗
3、性应用前景。,硫化氢理化性质为无色气体。常温常压下为气态，易溶于水（20时2.9体积气体溶于1体积水）。正常人体内也有内源性硫化氢。内源性硫化氢的来源，内源性硫化氢是体内含硫氨基酸的代谢产物。硫化氢在体内有两种形式存在。1/3以硫化氢气体形式存在，2/3以硫氢化钠离子形式存在。,外源性硫化氢在人体的吸收：硫化氢可经呼吸道、消化道快速吸收，经皮肤吸收率甚低。但在矿泉水中例外。 硫化氢主要生理学作用有舒张血管平滑肌；抑制平滑肌增值；诱导血管平滑肌细胞凋亡等。内源性硫化氢参与调解平滑肌的舒张功能，故可降低血压。 目前硫化氢治疗主要采用硫氢化钠作硫化氢的供体，部分采用硫化钠作为供体。,2、 同型半胱氨
4、酸：1969年报道第一例因高同型半胱氨酸血症而导致严重动脉粥样硬化的先天性异常患儿以来。学者做了大量的研究。于1996年通过流行病学调查最先提出同型半胱氨酸是心血管疾病的危险因素。同型半胱氨酸是多功能损伤因子。是心脑血管系统（动脉粥化、急性心梗、脑卒中及外周血管病变、神经性退行性疾病）等发病的独立或相关危险因子。,大量研究表明，高同型半胱氨酸血症在动脉粥样硬化和血栓栓塞疾病的发生发展中起重要作用，被认为是心血管疾病的独立危险因素之一。高血压之后成为危害我国居民健康的只要慢性病之一，随着生活水平的提高，高血压的发病率也日趋增长。研究发现，血清同型半胱氨酸水平与高血压成正相关。大量临床研究发现，在
5、高血压患者中，随着高血压水平的增加，血清同型半胱氨酸升高，而硫化氢浓度降低。,3、H2S与Hcy的关系：研究表明同型半胱氨酸与硫化氢存在内源性的 相互调节作用，两者在体内呈负相关。硫化氢可以显著拮抗同型半胱氨酸对血管组织和心肌的损伤。硫化氢的生理作用与同型半胱氨酸的毒性作用是相反的。 硫化氢可作为防治高同型半胱氨酸血症的新策略，抵抗同型半胱氨酸诱导的心血管损伤。,4、高血压疾病：原发性高血压是常见的心血管病之一，不仅致残、致死亡率高，而且严重消耗医疗和社会资源，给家庭和社会造成沉重负担。日益成为世界性的健康问题，是脑心血管疾病、缺血性心脏病、心和肾功能衰竭的重要原因。原发性高血压也是常见的慢性
6、病，也是心脑血管最主要的危险因素，是脑卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性肾脏病等主要并发症。,国内外的实践证明，高血压是可以预防和控制的疾病，降低高血压患者的血压水平，可以明显减少脑卒中及心脏病事件。在原发性高血压发病过程中，同型半胱氨酸在发生、发展中起重要的作用，血清中高浓度的同型半胱氨酸可显著增加原发性高血压的发病率。伴有高同型半胱氨酸的高血压患者高达75%。我国学者将伴有血清同型半胱氨酸升高的原发性高血压称“H型高血压”。建议同时控制高血压和高Hcy 。,对于原发性高血压患者的研究证实，在原发性高血压患者中存在着内源性的高同型半胱氨酸与低硫化氢。高血压人群同型半胱氨酸水平进一步升高，血清硫化
7、氢随血压升高明显降低。因些同时降低原发性高血压患者血压及同型半胱氨酸水平非常重要。可有效降低脑卒中的发病率。研究发现，外源性硫化氢可以通过提高体内硫化氢水平而缓解原发性高血压血压升高程度，可作为治疗原发性高血压的一个新靶点。,5、矿泉浴疗法：矿泉浴是一种古老的物理疗法,历史悠久,源远流长,距今已有几千年的历史。矿泉水的降压原理有三条，一是矿泉浴温度对人体产生的作用。二是矿泉水的机械刺激作用。三是通过化学成分的刺激作用，矿泉水中含有的硫化氢时，机体在浸浴时是通过皮肤的直接作用，通过皮肤被机体吸收作用和溢出空气的H2S被呼吸道吸收到机体的总作用。即硫化氢对血压的调节作用。矿泉水中的硫化氢，进入人体
8、有两条径，一时机体在浸浴时是通过皮肤的直接吸收作用（离子透析作用），二是利用矿泉水中逸出的H2S气体直接吸入呼吸道。,6、本课题研究目的：本课题要解决的问题，应用硫化氢矿泉浴治疗原发性高血压病人，且同时伴有高同型半胱氨酸血症，预防心脑血管疾病的发生，防止脑卒中病人复发。通过测定患者血清中硫化氢、同型半胱氨酸浓度及测量血压，探索硫化氢矿泉浴与患者血压、血清硫化氢及同型半胱氨酸三者之间的关系。摸索硫化氢矿泉浴科学合理的治疗方案。从而为硫化氢治疗疾病建立一个新的方法。,二、研究过程、内容与结果 1、实验室准备 2、实验设计及研究对象选择 3、对选择研究对象采集血清样本 4、检测指标测定 5、实验组的
9、治疗方法 6、统计学处理 7、课题研究成果,1、实验室准备：购买仪器及试剂。购买了测定血清硫化氢仪器离子计及配套用电极。同时购买了所需试剂。做了预实验，实验成功后，做了方法学评价实验。撰写了论文“离子选择电极法测定血清硫化氢”。并投稿。同型半胱氨酸测定使用仪器Olympus AU400全自动生化分析仪，试剂盒为利德曼产品。,2、实验设计及研究对象选择：本实验采用前后对照研究设计(同病例自身前后对照)。按照中国高血压防治指南（2010年）要求标准选择实验组人员。即收缩在140159mmHg之间和（或）舒张压在9099mmHg之间。并同时伴有高Hcy血症，且血清同型半胱氨酸浓度15 mol/L。经
10、询问病史，体格检查 、心电图X线、超声及血液生化检验等排除继发性高血压、糖尿病、冠心病、高脂血症者。要求初次就诊尚未服用降压药或可停药者。已服药者停药3天再进入实验组，对于口服半衰期长的降压药（如氨录地平等）患者，也不选择。所有患者均签署书面知情同意书。,3、对选择研究对象采集血清样本：对入选的实验组人员空腹12小时以上，采用分离胶真空采血管取时静脉血液5ml, 3000r/min,离心10 min。在30 min内离心血清，当天不能测定时，将采血管置25保存。一周内测定。,4、检测指标测定 4.1血压的测量：所有入选对象，实验组水疗前及对照组至少休息10 min，采用台式水银柱血压计，由专人
11、测量，全部测右侧肱动脉血压。实验组水疗后至少休息30 min；由水疗前同一人员及血压计测量血压。,4.2血清硫化氢测定： 采用离子电极测定法。使用离子计（上海雷磁PXSJ-226型），指示电极为硫电极（上海雷磁），参比电极（上海雷磁型）。采用标准加入法（也称添加法）。检查仪器零点，进行电极标定，再测定血清样品。取血清1 ml，加入等量抗氧化液混匀放置30 min后测定，添加标准液体积为0.02 ml。根据仪器提示操作，记录血清硫化氢浓度值。,血清中内源性硫化氢浓度较低。目前在测定硫化氢的方法中，相比较而言离子选择电极法灵敏度高。采用标准加入法，将会减少误差，较好的消除基体干扰。文献报道用标准曲
12、线法，我们通过实验，发现标准加入法（添加法）准确度、重复性及稳定性均优于标准曲线法。故采用标准加入法（添加法）测定血清中硫化氢。并且做了方法学评价。 本课题测定方法已发表文献未见报道。,方法学评价：本课题建立了血清硫化氢的离子电极测定方法。本法最低检出限为5.1mol /L，批内平均CV为6.2%。批间平均CV为9.1%，线性范围为5.1100mol/L（y=-129.62ln(x)-487.62, R2=0.993），平均回收率为98.7%105% ,正常人体血清硫化氢参考值范围为3555mol/L。 硫离子选择电极电位法具有灵敏、快速、简便、精密度及准确度良好等优点。适用于常规测定血清硫氢
13、。,4.3血清同型半胱氨酸测定：采用循环酶法测定血清同型半胱氨酸。使用仪器为Olympus AU400全自动生化分析仪（日本奥林帕氏公司产品）。由北京利德曼生物技术有限公司产品。循环酶法试剂盒，严格按试剂盒说明书设置参数，按全自动生化分析仪说明书进行操作。,5、实验组的治疗方法：矿泉水疗采用乌鲁木齐温泉I号泉水全身浸浴法，水温3840，空气中硫化氢气体溢出，关闭门窗，保证空气中硫化氢浓度恒定。2030min/次。每天一次水疗，两周为一个疗程。水疗前及一个疗程结束后检测血压、硫化氢及同型半胱氨酸数值。,6、统计学处理:将所得资料整理后，对数据采用SPSS18.0统计软件进行数据分析，所得计量资料
14、采用配对样本均值t检验（简称配对样本t检验）。水疗前后采用自身配对成组样本均值t检验。对分析得出数据整理。撰写文章“硫化氢矿泉浴治疗高血压及高同型半胱氨酸的研究”。已发表。,7.2临床指标:实验组水疗前后观察指标比较:实验组收缩压和舒张压均升高64例，单纯收缩压16例。在矿泉水疗前持续或间断服药21例，未服降压药59例。水疗后收缩压平均下降了20.4mmHg， 舒张压平均下降了12.5mmHg，水疗前后血清中硫化氢明显升高，平均升高了13.7 mol/L，同型半胱氨酸平均降低6.3 mol/L，见表1。同型半胱氨酸水疗前80例全部 15mol/L，水疗后14例15mol/L，66例15mol/
15、L，治愈率为82.5%，见表2。,三、推广应用情况 通过本课题研究，提高疗我院矿泉的知名度，是许多人有了新的认识。目前我院水疗科已对门诊及住院高血压与脑卒中康复病人进行水疗（矿泉浴）。住院病人已将同型半胱氨酸测定作为常规项目。临床科室医护人员及病人反映良好，疗效显著。具有良好的社会效益经济效益。水疗人数大增。起到了一个推广作用，充分体现了科学技术是第一生产力 。,该项目具有推广价值，可使矿泉浴疗疾病更加科学合理可靠。矿泉在国际国内有很多，但硫化氢矿泉有限，住院病人（特别是康复人员）多一个治疗手 端。可预防脑卒中病人复发，减低高同型半胱氨酸血症，可预防冠心病、动脉粥样硬化、脑卒中及老年性痴呆等疾
16、病的发生。矿泉浴疗法作为一种特殊的康复治疗手段，显示了它的优势，有很大的发展前景。矿泉水这一资源造福于人类。为人类健康做出更大的贡献。为开发地下热矿水这一资源的又一途经。,六、社会效益分析 通过本课题的研究，对水疗科起到了一个宣传作用。许多人课题结束后，感觉很好，自费来水疗（矿泉浴）。并介绍亲朋好友来水疗。使用矿泉浴，一级血压降压效果好，无毒副作用，同时还可改善内皮功能，对血脂的代谢、血管弹性改善起着积极的增强效果。具有降压药不可比拟的优点，不失为高血压康复医疗的重要方法。矿泉浴疗法作为一种特殊的康复治疗手段，以显示它的优势，有很大的发展前景。,矿泉浴距今已有几千年的历史。初步利用为秦汉隋唐时期，形成于明清时期，新中国成立后才在疗养康复医学有一个很大的发展。新疆乌鲁木齐温泉有文字记载的历史有今300多年，根据医疗矿泉命名标准，按国家标准局颁布的医疗热矿泉水水质标准（GB1161589）进行评价，氟、硼、 硫化氢三项组分含量达到了命名医疗热矿谁名称浓度，故可命名为氟、硼、硫化氢水。,
