《不同工艺处理的烟草中游离态氨基酸含量分析研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《不同工艺处理的烟草中游离态氨基酸含量分析研究（27页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、不同工艺处理的烟草中游离态氨基酸含量分析研究王蕾 1，孟广宇 2，于瑞国 1，郗继忠 2， 韩杰锋 1，李荣 1（ 1澳华达国际香料（广州）有限公司）（ 2将军烟草集团有限公司）前 言烟草中含氮化合物对烟草的感官评吸质量和吸者健康都有重要的影响，历来受到人们的关注。氨基酸含量与烟草的品质有着密切的关系，是重要的致香前体物质。烟草中氨基酸有 20余种。中性氨基酸有：甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、缬氨酸、 氨酸、半光氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等，酸性氨基酸有：天门冬氨酸、谷氨酸；碱性氨基酸有：苯丙氨酸、酪氨酸；杂环氨基酸有色氨酸、组氨酸、脯氨酸、羟氨酸。在烟草调制、醇化或发酵、加工乃至燃烧过程中，游离氨基酸
2、与还原糖之间可发生酶催化及非酶催化的棕色反应。前 言生成多种具有蒸煮、烤香、爆米花香味特征的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶类等杂环化合物，某些氨基酸如苯丙氨酸还可以自身分解成香味化合物，如苯甲醇、苯乙醇等。烟草加工过程特别是不同工艺处理所产生的氨基酸变化研究未见报道。本试验针对同一年份同一等级的几个不同地区的三种工艺处理后的烟叶样品中游离态氨基酸进行分析研究。开展此类研究对烟草在加工过程中香味物质损失的控制与补偿有着积极的指导意义。1. 料与试剂材料 ：选取三个地区，同一年份同一等级 不同处理工艺的烟叶作为样本。仪器 ： 转蒸发仪）；超声波萃取仪（自制）；固相萃取仪；微波炉。试剂 ：氨基酸标样，邻苯二
3、甲醛和氯甲酸芴甲酯，硼酸缓冲溶液；三乙胺、四氢呋喃、二次蒸馏水 。制在 1618之间后切丝。将烟丝分别进行薄板干燥和高温气流干燥工艺处理。主要工艺参数见表 1。待参数稳定后取样，且取样数 3次。将其混合均匀后从中取出一定数量得到实验室样品。表 1 样品制作主要工艺参数参 数工艺名称入口水分（ %）热风温度（ ）薄板气流干燥 26 125高温气流干燥（ 28 准确称取一定量的样品于干燥洁净试管中，用一定比例一定体积的乙醇水溶液在室温下用微波萃取。 滤液经活化的离子交换萃取柱并经离心分离、过滤后，用 柱前衍生化 用自动进样器吸取 针一次，再吸 冼针一次，原位混合 8次，吸取 针一次，再在原位混合
4、5次，进样。相色谱条件 色谱柱： 18（ 200 流动相 A：（ 入500 90 2%醋酸调加入 合均匀； 流动相 B：（ 入 100 2%醋酸调 加入 200200合均匀； 流速： 温： 38 ；荧光检测波长为：激发， 340射， 4502； 发， 266射， 3051。 梯度： 100%A， 17分钟时 60%B， 18分钟时 100%B，24分钟时 100%B，流速 25分钟时 0%B。基酸的定性、定量分析对应标样谱图，应用保留时间进行定性。以正缬氨酸为内标物，采用内标法进行定量。2. 方法选择浸取又称固液萃取，是利用液体提取目标产物的扩散分离操作。但传统的萃取手段存在：时间长；光、热不
5、稳定；溶剂 /样品量比大等不足。微波协助萃取及超声协助萃取技术是新型的萃取技术，具有快速、高效、高选择性、对环境友好等特点。经微波萃取与超声波萃取的试验比较表明，微波萃取比超声萃取在样品量、萃取时间、萃取回收率等方面有明显的优势（见表 2）。本试验确定样品处理采用微波协助萃取。表 2：微波萃取与超声波萃取的比较指标 超声波法 微波法样品重量 /g 5 30 300 10 20时间 60 微波协助萃取中，应尽量选择对微波透明或部分透明的介质作为萃取剂，也就是选择介电常数较小的溶剂。水、乙醇、稀酸溶液等都对氨基酸都有效好的溶解能力。我们选取了纯水、 50%乙醇、 70%乙醇、 80%乙醇、 90%
6、乙醇、 100%乙醇和 l、 l、 l、 为水是介电常数效大的物质，所以在萃取过程中用盐酸水溶液得不到很好的萃取较果，结果表明 50%乙醇水溶液在微波协助萃取中能达到满意的提取效果。般微波协助萃取辐射时间在 10 100于不同的物质萃取的时间不同，但连续辐射的时间不可以太长，否则容易引起溶剂沸腾。本实验所用的样品量为 1g，经试验确定采用短时间多次的方式进行。萃取时间控制不超过一分钟，且分三次完成。回 收 率 采用标样加入法测定回收率，mg/g。结果见表 3，结果表明，除了丝氨酸、甘氨酸和和酪氨酸的回收率低于 90%，其于各类氨基酸的回收率均在 90%以上，说明该方法测定氨基酸的结果是比较准确
7、的。表 3 氨基酸回收率氨基酸 英文缩写 样品含量 （ mg/g）测定量 差值回收率（ %）（ mg/g） （ mg/g）天门冬氨酸 01谷氨酸 7丝氨酸 9组氨酸 5苏氨酸 9精氨酸 1酪氨酸 5蛋氨酸 3异亮氨酸 6亮氨酸 5赖氨酸 4脯氨酸 02工作曲线及其线性范围取浓度为 2、 4、 5、 8、 10、 25 和 50 L，分别加入等体积的 5 行 以氨基酸浓度为横坐标，氨基酸与内标的色谱峰峰面积之比为纵坐标作图，得到各个氨基酸的工作曲线，其线性方程如表 4所示。从表 4可以看出，各氨基酸在2 50 6 氨基酸的工作曲线氨基酸 线性方程 相关系数 y= y= y= y= y= y= y
8、= y= y= y=y= y=y=y=y= y= y=烟丝经不同工艺处理后游离氨基酸的变化 分别选取 2002年产等级为 南和贵州烟叶作为样本，按 图 1、 2、 3可以看出：生丝分别经薄板干燥和高温气流干燥后氨基酸的含量均呈现不同程度的下降。其中以高温气流干燥处理的下降尤为明显。图 1 云南烟丝不同工艺处理的液相色谱图 2 河南烟丝不同工艺处理的液相色谱图 3 贵州烟丝不同工艺处理的液相色谱 不同的氨基酸对工艺处理的敏感程度表现不一，表 5所列为变化较显著的几种。该结果与文献报道基本吻合 。氨基酸 生丝（ mg/g） 处理后 (mg/g) 变化（）天门冬氨酸 38高温气流干燥 55脯氨酸 4
9、0高温气流干燥 80赖氨酸 65高温气流干燥 90组氨酸 54高温气流干燥 92精氨酸 58高温气流干燥 91 不同地区的烟丝经工艺处理后游离氨基酸的变化同样表现出不同的差异。薄板干燥处理后烟丝的氨基酸变化不明显，除精氨酸和脯氨酸等几种有一定的下降外，大多数的变化不明显。而高温气流干燥处理后烟丝的氨基酸则表现出特征性差异。河南烟丝相对表现稳定，组氨酸、脯氨酸下降明显；云南烟丝的游离氨基酸变化显著，下降明显，有些氨基酸的下降高达 90如：组氨酸、精氨酸、脯氨酸、丙氨酸 。3 高温气流干燥处理烟丝，某些特定的氨基酸含量有所下降。提示我们在除杂、降刺改善内在品质的同时，同样亦会带来可能存在的某些特定物质的损失。活化的阳离子交换柱进行纯化，用柱前衍生反相高效液相色谱进行分析的方法。具有简单、快速、高效等优点。我们所选用的样本来看，云南烟丝经高温气流干燥处理，表现出较为明显的“热”不稳定性。提示我们在工艺处理时应采取较为柔和的处理方式。色
