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1、仙客来叶中挥发性成分的研究,班级：09化学（2）班 姓名：徐楷航 学号：20091051246 指导教师：陈靖,前言,仙客来（Cyclamen persicum），别名:兔子花、萝卜海棠、兔耳花1，为报春花科仙客来属球茎花卉，它是利用C.persicum所特有的遗传变异性，经过一代又一代仔细的选择和种内杂交培育而形成的一类花卉，该花卉花形独特、花色丰富、花期长。原产地在地中海沿岸，为世界著名花卉，20世纪二、三十年代引进我国，以奇异的花姿、绚丽的色彩、洒脱飘逸的韵味而赢的人们的共同喜爱，位居畅销盆花之列，尤其是在百花凋零的冬春季盛开，是圣诞节和春节期间的首选盆花。仙客来花期较长，也可选作切花材
2、料瓶插观赏。在南方凉爽季节可用仙客来组成丰富多彩的花坛或配置在绿地、庭院之中。仙客来的起源比较复杂，有证据表明它是从原始种发展成不同类型的成为多个原始种2。据记载它有17个不同类型的原始种3。另一说为16个原始种4。以下为这16个原始种：仙客来、欧洲仙客来、小仙客来、非洲仙客来、巴利阿里仙客来、西西里仙客来、克里特仙客来、塞浦路斯仙客来、希腊仙客来、帕尔夫洛仙客来、地中海仙客来、黎巴嫩仙客来、假西班牙仙客来、波叶仙客来、罗尔夫斯仙客来、木拉贝拉仙客来。,目前国内外对于挥发性成分的提取方法中常用的有传统水蒸气蒸馏法（HD）、溶剂提取法、同时蒸馏萃取法（SDE）、超临界萃取法（SE）、固相微萃取（
3、SPME）技术及动态顶空进样（DHS）等。本实验采用了分别以甲醇、无水乙醇、正己烷作溶剂，用索氏提取从仙客来叶中提取挥发性成分物质，索氏提取方法进行提取相对其他方法有产品质量好、选择性好、节能、提取率高、设备简单等优点，但其耗时较长、操作较为冗长。仙客来喜凉爽气候和疏松、肥沃、排水良好而富含腐殖质的沙质土壤，酸碱度要求中性，生长期相对湿度以70%-75%为宜，盆土要经常保持适度湿润，不可过分干燥，避免根毛受到损伤，适宜温度在10-205。目前国内关于仙客来的生物活性及药用价值的报道较少，多以它为观赏性植物，多则可以提取其中的色素作为染料添加剂或提取其香味做香料，本实验旨在分析其挥发性分析其所含
4、的烷类、烃类、脂类、萜类和杂环类有机化合物等，分析其所含成分的性质。,目前国内对仙客来的种植条件以及栽培技术研究的报道较多，但对其根、茎、叶以及花瓣为原材料做实验的报道较少，而以仙客来叶做挥发性成分的实验目前尚无文献报道。因此，本实验采用索氏提取法和GC-MS联用技术对仙客来叶进行挥发性成分的分析研究，并分别以甲醇、无水乙醇、正己烷三种试剂作溶剂，比较各自的提取率以及提取出挥发性成分的不同，以期为探索仙客来药用机理和合理开发利用仙客来叶资源提供理论依据。,1.材料与方法,1.1主要仪器及试剂 1.1.1 主要仪器恒温水浴锅、电子天平（奥豪斯仪器（上海）有限公司制造Q/SGYM 1008 103
5、0）、气相色谱-质谱联用仪（日本岛津公司，GC-MS-QP 2010型）、溶剂过滤器（Auto Science，AL-01）。 1.1.2主要试剂市售仙客来(产自云南楚雄)、甲醇（AR）、无水乙醇（AR）、正己烷（AR），实验室所有水均为蒸馏水。,1.2 实验方法 1.2.1提取方法取新鲜仙客来叶，洗净，切碎，采用微波烘干法烘干后，经粉碎机适当粉碎，精密称取6份，每份2.5g，其3份分别用甲醇、乙醇、正己烷作溶剂进行索氏提取，再将其浓缩至干，计算其提取率，用作比较6；另3份分别用三种试剂做溶剂在90水浴中，提取6h，浓缩至10ml，置于阴冷干燥处备用，用于GC-MS联用仪进行分析。 1.2.2
6、分析方法（GC-MS联用技术）7色谱条件 色谱柱：DM-5MS/LB 石英毛细柱(30m 0.25mm，0.25m)；升温程序：40保持3min，以10/min 升至100，再以5/min 升至 220，再以8/min 升至 300，保持20min；载气(He)流速1.0mL/min，载气为高纯氦气；压力50.0kPa；不分流进样。质谱条件 电子轰击(electron impact，EI)离子源；电子能量70eV；离子源温度200；母离子m/z 285；接口温度：230;质量扫描范围m/z 40500。,2.实验过程,2.1仙客来叶的预处理市售仙客叶来洗净、切碎、干燥，经粉碎机适当粉碎，所得叶
7、末置于棕色瓶中避光保存备用。 2.2 叶中挥发性成分的提取 2.2.1提取时间与温度的选择本实验采取用3种试剂作溶剂进行对比对照的方法，分析并比较出较好的实验结果。根据索氏提取的原理，提取过程中，将样品颜色提取较浅即可。根据实验的探究，三种试剂在提取6h时均可达到要求。本实验过程采用单一变量法，均采用90水浴进行加热，做到条件一致，保证数据结果的客观性。,2.2.2不同溶剂提取所得提取率的比较6分别取实验原料2.5g，溶剂用量为50ml，提取时间为6h。样品颜色提取较浅即可，经探究表明实验过程中三种试剂的回流速率为：（正己烷）（甲醇）（无水乙醇）。分别将提取液浓缩至稠膏状移入微波炉8中烘干至恒
8、重，称重，计算提取率。 2.2.3仙客来叶中挥发性成分提取方法精密称取2.5g叶末，用50ml的三种试剂分别进行索氏提取，虹吸5次。稍冷后，改成蒸馏装置，把提取液中大部分试剂蒸出（回收），将提取液浓缩至约10ml后，将提取液过0.45m的有机系滤膜，滤液密封冷藏保存，留作上气质检测分析挥发性成分分析使用9。,3.1 提取率的计算将烘干恒重过的的提取物称重后，由公式（2-1）计算提取物量的提取率10，并将结果记录于表3-1：（2-1） 式中：K提取物量的提取率（）A浓缩恒重后的测定物量质量（g）B称取的实际质量（g）,3.结果与分析,表3-1 不同溶剂提取仙客来所得提取物量及提取率的比较,由表3
9、-1可以看出，用3种不同的溶剂进行索氏提取，以正己烷进行提取所得提取物的提取率为最高。虽然正己烷的提取含量略高于无水乙醇，但由于两者数据较为接近，又考虑到无水乙醇与其它溶剂相比，具有无毒安全，熔沸点较低，廉价易得到的优点，故在设配受限的提取过程中，用无水乙醇作溶剂较为合适。,3.2 3种溶剂提取物GC-MS图谱比较11 从仙客来叶甲醇提取物中分离到50种组分，其中鉴定出12种化合物（图3-1）。相对含量较大的组分为8,10-十六双烯-1-醇（27.20%）、十六碳-7-烯醛（18.37%）、异别胆酸乙酯（10.02%）等。 从仙客来叶无水乙醇提取物中分离到32种组分，其中鉴定出9种化合物（图3
10、-2）。相对含量较大的组分为十六碳-7-烯醛（43.02%）、1,3,12-十九碳三烯-5,14-二醇（22.10%）、n-三十七烷醇（10.37%）、1,54-二溴-五十四烷（7.88%）、五十四烷（6.50%）、17-三十五碳烯（3.89%）、叶绿醇（3.65%）等。 从仙客来叶正己烷提取物中分离到35种组分，其中鉴定出6种化合物（图3-3）。相对含量较大的组分为17-三十五碳烯（33.15%）、1,3,12-十九碳三烯-5,14-二醇（24.68%）、五十四烷（15.40%）、3-羟基环己酮（13.83%）、丁位十四内酯（8.57%）、十六碳-7-烯醛（7.10%）。,图3-1 甲醇提取
11、的仙客来叶挥发油总离子流图,图3-2 无水乙醇提取的仙客来叶挥发油总离子流图,图3-3 正己烷提取的仙客来叶挥发油总离子流图,3.3 3种不同溶剂提取物的化学成分比较分析,3种提取物经GC-MS联用仪分离和鉴定，根据各物质的质谱图经计算机检索，与NISTO8数据库检测对照，以峰面积归一法计算各组分的相对含量12，并进行分析鉴定。归一化法的使用必须满足两个前提条件：（1）样品中所有组分都要流出色谱柱，并且在检测器上都有响应。（2）要清楚每一个组分的相对质量校正因子。定量分析的依据是被测组分的量与响应信号成正比，但是，同一含量的不同物质，由于其物理、化学性质的差别，会造成较大误差，故提出了定量校正
12、因子。根据各原子在不同类型化合物中所体现的有效碳数13，计算出各挥发性成分的有效碳数，由公式（3-1）先计算出各个组分的相对质量响应值RWRi/s ， （3-1） 式中：RWRi/s 相对质量响应值；Ci、Cs 待测组分i和参比物质分子中有效碳数总和；Mi、MS 待测组分i和参比物质的相对分子质量。,再计算相对质量校正因子i14，见式（3-2）：（3-2）最后把样品所有出峰组分含量之和以100%计算，引入各成分相对质量校正因子后色谱分析结果，由公式（3-3）以峰面积归一法计算各组分的相对含量,分析鉴定结果见表3-2。（3-3） 式中： Xi试样中组分i的百分含量；fi组分i的相对质量校正因子；
13、Ai组分i的峰面积。,表3-2 3种不同提取溶剂的挥发性分析,由表3-2可知，甲醇提取的挥发性成分中,未检出烃类含量，醇类含量占28.90%，醛酮类占19.40%，内酯类占10.86%，脂肪酸类占5.05%；无水乙醇提取的挥发性成分中,烃类含量占18.27%，醇类含量占36.12%，醛酮类占43.02%，内酯类占1.07%；正己烷提取的挥发性成分中,烃类含量占48.55%，醇类含量占24.68%，醛酮类占20.93%，内酯类占8.57%等分析表明，甲醇和无水乙醇提取物中含量较高的醇类、醛酮类和内酯类化合物，在正己烷中却很少；在正己烷提取物中含量较大的烃类化合物，在甲醇中未检测出，在无水乙醇中也
14、是少量检出。由此可知提取溶剂性质不同，提取物成分也各不相同，以甲醇作溶剂适用于提取醇类、醛酮类和内酯类化合物；以无水乙醇作溶剂适用于提取醇类和醛酮类化合物；而提取烃类化合物时，以正己烷作溶剂效果更佳。,4.结论,分析表明，仙客来叶挥发性成分中主要含有的是烃类、醇类、醛酮类和内酯类物质，且以甲醇、无水乙醇和正己烷作为提取溶剂时，提取成分存在一定差异。在提取烃类化合物时，正己烷优于甲醇和无水乙醇，在提取醇类和内酯类化合物时，甲醇优于无水乙醇和正己烷，在提取醛酮类化合物时，无水乙醇优于甲醇和正己烷。烃类及其衍生物、萜类等都具有多种生物活性及利用价值，但由现有文献和本实验结合来看，仙客来叶中的可利用价
15、值还相对较少。随着现代生化技术的发展，可结合其生物特性进行培育，使其的利用价值得以提升。,参考文献,1 秦一.仙客来栽培与管理J.农村实用科技信息. 2011(02):14-15. 2 张敬方.仙客来的新品系和栽培品种J.北方园艺,1993,(3):28. 3 姜世平,朱永莉,陈晓奎.仙客来品种分类及品系介绍J.花木盆景,1999（99）:26. 4 程金水.园林植物遗传育种学M.北京:中国林业出版社，2001. 5 丁莉,曹慈娥,曾凡中.仙客来生物学特性及工厂化栽培管理技术J.湖北民族学院学报,2006,24（2）:193-195. 6 袁珂,简秀梅,孟江.车前草不同提取方法的比较研究J.中
16、国现代应用药学杂志,1999.16(4):20-22. 7 王德庆,付群. GC与GC-MS联用技术进展及其在环境中的应用J.分析测试学报,2007.26（S1)：193-196. 8 袁珂.微波加热快速测定中药提取物的干重及出膏率J.河南科学,1998,16(1):108. 9 王巨媛,崔庆新,翟胜.天竺葵根系干鲜样挥发性成分比较分析J.时珍国医国药.2012,23（2）：304-305. 10 张凤阁. 关于提取率公式的推导和应用J.工程科技I冶金工业,1977,13(10):42-45. 11 尹文清,冯华芬,段少卿.不同溶剂提取毛冬青叶挥发油的成分的GC-MS分析J.安徽农业科学.2011,39(20):12139-12140. 12 李健隽.面积归一化法分析混合气体中各组分含量J.哈尔滨市计量检定测试院.2012,39(4):86-87. 13 顾惠祥,阎宝石.气相色谱实用手册.(第二版）M.北京:化学工业出版社,1982:543. 14 纪洁.气相色谱相对质量校正因子引用方式对归一化法计算质量分数的影响J.化学分析计量.2007,16(4):68-69.,
