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1、渝东北地区细菌耐药 基因表达谱及其传播机制研究,开县人民医院检验科 朱艮苗,“十二五”国际课题（亚洲区）医学研究基金子课题,一、研究背景 二、研究目的 三、研究方法 四、研究基础 五、研究进度 六、经费安排,一、研究背景,1、MRSA的流行,MRSA分离率逐年增加,2、MDR革兰杆菌日趋严重,多重耐药的鲍曼不动杆菌（MDR-AB） 产超广谱-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌 产超广谱-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌 多重耐药的铜绿假单胞菌（MDR-PA） 产超广谱-内酰胺酶（ESBLs）的阴沟肠杆菌,3、渝东北地区的特殊性,渝东北区域地处三峡库区、人口众多（1000多万），流动性相对独
2、立，整体医疗技术水平落后，抗生素使用极不规范，造成库区的各个区县细菌耐药率普遍升高，其耐药性及基因表达谱极为复杂。因此研究本地区细菌耐药基因表态谱，并探索其传播机制，对于本地区合理使用抗生素及控制细菌耐药的传播意义重大。此外，对于丰富主课题的耐药基因表达谱及其传播机制有重要意义，为细菌耐药的生物学控制提供重要基础依据。,我院2013年第一季度检出前五位多重耐药菌,二、研究目的,通过渝东北地区MRSA耐药特征、耐药机制、分子遗传背景和分子流行病学的研究，进一步阐明MRSA多重耐药发生的分子机制。 通过渝东北地区耐药前三位革兰阴性菌耐药特征、分子遗传背景及其主要耐药基因的传播机制研究，为临床合理使
3、用抗生素、为研发新的临床检测和治疗手段提供新的思路。,技术路线,基因分析,建立MRSA感染监控与预防新策略 实现本地区耐药基因及其传播机制的初步分析,MRSA耐药机制研究,耐药性分析,基因 分析与测序,革兰阴性菌耐药机制研究,耐药基因 传播机制研究,分子 流行病学研究,耐药性分析,三、研究方案,MRSA分子流行病学特征分析 收集渝东北地区MRSA菌株，对其临床资料进行回顾性统计分析 采用MLST技术进行分型，了解菌株的遗传学背景及进化路线 采用随机引物PCR进行扩增分析，了解菌株的同源性,MRSA耐药表型与耐药基因相关性分析 采用Vitek微生物分析仪检测收集的MRSA菌株对不同种类抗生素的敏
4、感性 采用PCR方法检测mecA等耐药基因，并对MRSA菌株耐药基因相关性进行分析 对不同耐药谱的MRSA进行基因测序分析，比较突变位点，进行耐药机制研究,革兰阴性杆菌耐药特征分析 收集渝东北地区前三位的革兰阴性杆菌菌株，对其临床资料进行回顾性统计分析 采用Vitek微生物分析仪检测收集的菌株对不同种类抗生素的敏感性,革兰阴性杆菌耐药基因及基传播机制研究 采用PCR方法检测革兰阴性杆菌常见的耐药基因（见附表），并对耐药基因相关性进行分析 通过分子生物学方法，研究耐药基因传播机制（质粒、整合子、基因组）,四、研究基础,1、基本条件 本课题组具有标准化微生物实验室及分子生物学实验室，拥有10名操作
5、熟练技术人员，研究生以上专业人员5名，高级职称以上人员2名，能开展本课题所涉及的微生物及分子生物学所有实验。,2、前期工作 根据课题实验需要，已收集了500多例耐药菌株，为开展相关基因表达谱研究奠定了一定基础。此外，本医院已通过三级医院终评，能保证收集周边区县医院多重耐药细菌标本，为课题的开展提供了充足的标本来源。,五、研究进度,2013年4月-2014年6月：完成细菌多重耐药及其耐药基因表达谱分析。 2014年7月-2015年6月：完成主要耐药基因传播机制的初步研究。 2015年7月-2015年12月：完成课题资料的整理、成果及相关专利的申报，顺利按期结题。,18,1、科研业务费 （测试/计算/分析费、能源/动力费 、会议/差旅费 、出版物/文 献/信息 、生物仪器使用等）,15.0万,2、实验材料费（原材料、生物生化试剂购买等）,75.0万,3、仪器设备费（仪器改造/维修工具/配件等）,5.0万,4、劳务费（支付无固定工资收入的研究生劳务费）,3.0万,5、管理费（依托单位对项目的组织、实施与管理）,2.0万,六、经费安排（经费总预算100万元）,谢谢！,
