《凝集反应(肥达反应、血型鉴定)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《凝集反应(肥达反应、血型鉴定)（17页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、凝集反应,实验目的,掌握凝集反应原理 熟悉肥达试验的方法、凝集效价的判定及临床意义,抗原与相应抗体特异性结合，在电解质参与下形成肉眼可见的凝集物，称之为凝集反应。 直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体直接结合所产生的凝集现象。间接凝集反应：将可溶性抗原吸附于载体颗粒(如乳胶颗粒、红细胞等)的表面，称之为致敏颗粒。当致敏颗粒与相应抗体结合，即可出现凝集现象。,直接凝集反应,颗粒性抗原与相应抗体直接结合所产生的凝集现象。,间接凝集反应,将可溶性抗原吸附于载体颗粒(如乳胶颗粒、红细胞等)的表面，称之为致敏颗粒。当致敏颗粒与相应抗体结合，即可出现凝集现象。,协同凝集实验,金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋
2、白(SPA)能与人及多种哺乳动物IgG类抗体的Fc段结合。IgG的Fc段与SPA结合后，两个Fab段暴露在葡萄球菌表面，仍保持其抗体活性和特异性，当其与特异性抗原相遇时，出现凝集现象。称为协同凝集反应。,金黄色葡萄球菌,可溶性抗原,凝集,抗体,直接凝集反应,试管凝集试验肥达反应 玻片凝集试验ABO血型鉴定,肥达反应(widal reaction)是用已知的伤寒沙门菌的H抗原(鞭毛)和O抗原(菌体)以及甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌的H抗原的诊断菌液与病人血清做凝集试验，测定受检血清中有无相应的抗体以及抗体的效价，用于伤寒副伤寒的辅助诊断或流行病学调查。,肥达反应,材料,伤寒沙门菌O、
3、H菌液，甲型副伤寒沙门菌H菌液和肖氏沙门菌H菌液。 生理盐水和患者血清（10倍稀释），试管，1ml吸管，试管架，52水浴箱,方法,取洁净试管28支，分成4排，每排7支，依次编号。 于每个试管内加入生理盐水0.5ml。 在每排第一管各加患者血清0.5ml，进行倍比稀释。,弃去0.5ml,结果,凝集程度：以“+”多少表示 。 （+）上清液澄清，细菌全部凝集沉淀于管底。 （+） 上清液轻度混浊，细菌大部分凝集沉淀于管底。 （+） 上液半混浊，细菌部分凝集。 （+） 上清液混浊，仅有小部分细菌凝集。 （-） 不凝集，液体呈乳状与对照管相同。 效价判定：以能出现“+”凝集现象的血清最高稀释度为该血清的凝
4、集效价。,血清的凝集效价（滴度）：指能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集（即“+”凝集）的血清最高稀释倍数。血清效价代表血清中抗体的含量，血清效价越高，所含抗体的量愈多。一般认为，伤寒沙门菌“O”抗体凝集效价在1:80以上，“H”抗体凝集效价在1:160以上，引起副伤寒的沙门菌H凝集效价在1:80以上才有诊断价值。,O与H抗体的诊断意义,O抗体：IgM H抗体：IgG,ABO血型鉴定,根据红细胞膜表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A，B，AB，O型4种。,实验材料,载玻片、刺血针、消毒牙签、A型和B型标准血清、生理盐水、酒精棉球。,实验步骤,1取一块清洁玻片，在其左右端分别用A、B做好标记。 2在玻片一端滴加抗A型标准血清一滴，在另一端滴加抗B型标准血清. 3穿刺手指取血，玻片的两端标准血清各加一小滴血，用牙签搅拌，使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签，切勿混用。 室温下静置，观察有无凝集现象，,呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表示。 出现细沙状凝集颗粒，表明凝集，用“十”号表示。,结果判断,
