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1、最新猪人工授精技术,SWINE ARTIFICAL INSEMINATION,郑州牧专畜牧工程系繁殖教研室 张长兴 副教授,最新猪人工授精技术,一、猪的人工授精简介,（一）猪人工授精的历史,100多年人工授精的历史 1870年意大利科学家Spalanzini用狗作为试验对象，获得了首次人工授精的成功。 70年的猪人工授精历史 20世纪30年代：在前苏联的集体农庄已经广泛地开展的猪的人工授精 最早的专著 最早的1956年英国科学家Cries Polge 出版了第一部猪的人工授精专著 我国的人工授精 20世纪50年代受前苏联的影响，我国南方各省也广泛地开展了猪的人工授精 20世纪90年代初，由于大
2、量引进国外品种，传统的人工授精技术不能适应新猪种的要求，而使许多养猪场重新回到本交配种。 20世纪90年代末，由疫病控制、引种和降低配种成本需要，在广东省首先引进国外最新人工授精技术，并取得良好效果。,（二）猪的工授精的基本流程,精液保存,精液品质检查,新鲜猪精液,精液稀释与分装,输精,采精,精液稀释液,（三）猪的人工授精与本交的区别,（四）最新人工授精与传统人工授精的区别,（五）猪的人工授精大件耐用品及费用,一台单目显微镜 一台恒温冰箱 恒温载物台 一台恒温消毒柜 一台恒温水浴锅 一台热封口机 电子秤 一个假母猪,（六）猪人工授精的优越性,有效减少传染病 公母猪的不直接接触，避免了通过交配传
3、播传染病问题 有利于提高猪群品质 最优秀的种公猪但到更充分的利用，使采用最优秀的种公猪更经济，大大提高了种猪群的总体质量 配种受胎率可靠 全部用于输精的精液均经过质量检查 以最快的速度进行后备公猪的配种能力鉴定 解决了因公母猪体重悬殊而造成的配种困难 方便了母猪自繁自养 通过购买精液配种，可经济地实现种母猪的自繁自养,节约了公猪饲养成本 猪场种公猪的存栏数量只有本交的1/10，大大降低了培育或购买种公猪的数量，节约了费用；同时也降低了饲养种公猪的成本。 提高了健仔率 混合精液配种可在不增加种公猪数量的情况，增加卵子受精的机会，提高了母猪的产仔数和健仔率 可治疗不发情 强制人工授精，可以对长期不
4、发情的母猪进行诱导发情 解决了配种在时间和空间上的限制 精液的保存和运输，使猪场间“种公猪”的交流成为可能，解决了纯种公猪数量少造成近交的问题,（七）猪场人工授精失败原因分析,人工授精设备及用品不完善、选用设备不合理 消毒卫生不严格或流于形式 有效精子数太少，配种时机掌握不准 稀释液配制不规范，没有合适的保存方法 操作不规范 满足感和走捷径,传统的人工授精的缺陷,1、重复使用的手套和过滤网及集精杯极易因消毒不彻底而污染精液 2、用手将柔软的输精器送入母猪生殖道内易使生殖道受污染 3、用注射器输精易形成“涡流”而使精子受到损害,（八）怎样在猪场中开展人工授精,人工授精员上岗前必须进行必要的培训
5、本交+授精 在一个配种情期内，首次采用本交，二次配种采用人工授精 部分人工授精 先对部分母猪进行人工授精：在发情好的、健康的、经产的父母代母猪中开展 提高输入的精子数 初学者开展人工授精时，一次输精的精子数比推荐量高一倍，以确保可靠性 受胎率和产仔数评估 在全面开展人工授精时，应对猪场开展的人工授精进行全面的评估。以后应定期对人工授精成绩进行评估。 半年后全面推广 用5-6个月时间逐步达到全面开展人工授精,（九）猪的人工授精的限制,不要期望大幅度提高受胎率和产仔数 如果种公猪都是健康的，则人工授精与本交相比，并不能提高母猪的受胎率和产仔数 精液不能长期保存 猪精子对低温耐受力差，因此精液冷冻保
6、存效果较差，且成本高。一般只采用常温保存，保存时间为3-7天 人工授精人员必须进行一定的培训 必须有相应的设备条件、实验室及耗材 操作必须谨慎 如果操作不当可能影响受胎率和产仔数甚至会造成母猪不育 规模越大人工授精的意义就越大,(十)人工授精的投资,设备费6000元 实验室10平方米 采精室10平方米,(十一)人工授精站的经营模式,个体小规模：2-3头公猪，1-2位授精员 中型规模：5-8头公猪，3-5位授精员 大型规模：10头以上，设立分站，定期进行猪场授精员及分站授精员培训,(十二)人工授精的关键性环节,公猪的调教（调教在假母猪上采精） 采精（获得公猪的精液） 输精时间掌握,二、人工授精器
7、械及设备,（一）采精用品,采精室 防护栏 假母猪、防滑垫、水龙头、水管、扫把、刷子 集精杯、集精袋、过滤网、橡皮圈、纸巾、一次性手套 加温壁橱,采精室与实验室,采精室的设计,假母猪设计,采精室及假母猪,消毒纸巾,一次性PE手套,过滤网,集精保温杯,（二）精液品质检查用品,人工授精实验室 100、400倍显微镜（必备） 载物台加热板 载玻片、盖玻片、玻璃棒、纸巾、擦镜纸 计数板、计数器 吸管（100、200倍）、微量移液器、移液管 3%氯化钠溶液 分光光度计或比色计,恒温加热板及显微镜,如果有条件可进行实验室升级，增加设备,电子秤,比色仪,微移液器,带恒温台的双目显微镜,（三）人工授精实验室,人
8、工授精实验室一角,（四）稀释液配制用品,软水机(或软水):生产纯水用来冲洗器皿 电脑程控三重消毒柜 分析天平、托盘天平：称量药品 量筒或量杯或电子天平(500或1000毫升):量纯水 各种容器如锥形瓶、大烧杯、输液瓶 常用药品(或精液稀释粉),精液稀释粉,电子秤,（五）精液稀释、分装及保存用品,恒温水浴（34-37）、温度计 1000毫升烧杯或塑料杯 分装架 输精瓶或精液袋及操作台（泡沫塑料板） 精液分装管、5毫升一次性注射器 泡沫塑料箱 恒温冰箱（15-18）,精液分装及运输容器,袋装精液,瓶装精液,泡沫塑料运输箱,电子恒温运输箱,各种精液容器,精液袋,分装管,精液的分装,（六）输精用品,输
9、精器：多次性输精器、一次性输精器 输精瓶或输精袋（不采用注射器） 纸巾 润滑剂-红霉素软膏或专用润滑膏 洗瓶、软水、75%酒精 恒温干燥箱 自来水、纯水,各种输精器,三、人工授精操作,（一）公猪的调教,1.公猪的调教注意事项,要有足够的耐心 采精室要能防止公猪逃跑 谨慎接近公猪，保证安全 必要时采精员亲自饲喂和管理待调教公猪 公猪没有爬上假母猪前不过分靠近公猪 公猪爬上假母猪后从后面靠近公猪，并轻轻按摩其包皮 采精成功后应在第二、三天同一时间重复一次,2.调教公猪爬跨假母猪的方法,将发情母猪尿或分泌物涂在假母猪的后部，然后让公猪与接触、熟悉，待其爬跨后从后侧上前采精 用发情母猪尿涂在布上，让公
10、猪嗅闻，并逐步诱导其爬上假母猪 先将发情母猪赶入采精室，并在其背部搭上麻袋，让其爬跨发情母猪，并抓耳拉下，待其达到性高潮时，用麻袋遮住公猪眼，赶走发情母猪，将麻袋搭在假母猪上，诱导公猪爬跨假母猪 用发情母猪作台畜采精一次,（二）采精前的准备,1.人工授精用品清洗与消毒,量筒、三角瓶用洗涤剂洗过，冲净，用装有蒸馏水的洗瓶冲洗其内壁四次，并将外壁冲洗干净，空水后放入消毒柜，用100-125温度消毒1小时。 多次性输精器：用过立即用自来水冲洗内外，甩去水分,用75%酒精冲洗一遍，再用蒸馏水冲洗三遍，放入消毒柜中，100消毒1小时。 精液分装管：用过后立即用蒸馏水冲洗，并用75%酒精冲洗，可与输精器一
11、起放入消毒柜中，在100温度下消毒1小时。 大烧杯、集精杯：用自来水、洗涤剂洗净，冲洗后，凉干，用前与精液分装管一起放入消毒柜中，温度调至38，预温5分钟。,2.采精前准备（一）,清洗双手 用电吹风或恒温箱加热集精杯，防止集精杯过冷 将恒温载物台电源打开，并在上面放上一张干净的载玻片 准备精液稀释液:在三角瓶中加入稀释粉，然后按说明量取1000ml或500ml蒸馏水，加入使其完全溶解（冬季也可先放入水浴中加热），也可在套有一次性塑料膜的烧杯中配制稀释液 精液稀释液放入33-35的水浴锅中预温,溶解,预温至34 ,3.采精前准备（二）,集精杯的准备 将集精杯加温 在集精杯中放入两层食品袋并将袋口
12、翻向保温杯外，用干净玻璃棒使食品袋与集精杯内壁贴服 将一张专用滤网放在保温杯上 用一根橡皮筋将滤网固定在保温杯口上，并使网面下陷 将一张纸巾盖在保温杯上，将保温杯盖轻轻盖上 在进入采精室后，右手戴两层无毒的聚乙烯塑料手套 带两张纸巾 将集精杯放入实验室与采精室之间的窗内,集精杯的安装过程,（二）采精操作,采精的目标,用最简单的方法采集到全部含较多精子的精液 采集到的精液最大限度地不受到任何污染 尽可能使精液不受到外界气温的影响,1.采精操作（锁定龟头）,将橡胶垫放置于假母猪后，检查假母猪是否松动，并将假母猪擦拭干净 尽可能安静地将公猪赶到采精室 清除公猪肋部和腹部的脏物，用右手按摩公猪包皮尽可
13、能多地排放包皮腔中的尿液,并用纸巾拭干 必要时剪掉包皮附近的阴毛 诱导公猪爬跨假母猪 公猪阴茎勃起后，脱去外层手套,蹲(或坐)在假母猪左侧,右手呈空拳,拳心向上,使阴茎进入空拳中,并立即锁定阴茎的龟头(注意不要抓握阴茎体部),顺其向前冲力,将阴茎尽可能地拉出。,2.采精操作(收集精液),左手打开集精杯盖,取下上面的纸巾 公猪开始射精后，不要立即收集,待公猪射出部分精亮的液体后,再开始收集含精多的部分 如果仍有包皮中的尿液顺阴茎流出,可用纸巾将其吸附,避免流入集精杯中，或者暂时将龟头部位抬高 当公猪开始环顾四周时,说明公猪射精即将结束。注意不要过早终止射精，以免影响公猪的健康 采精后，去除滤网橡
14、皮筋，将食品袋口收紧放在杯口上，用集精杯盖压上面 将精液放入采精室与实验室之间的窗口内,将公猪赶回圈内,公猪精液的收集过程,采精的手势,带安全栏的采精区,塑料假母猪,3.采精要点,在喂食后2-3个小时后采精 最高采精频率为隔日一次，最好每3天采一次精 每天采精时间要固定，以形成良好的条件反射：最好在每天的9点到10点左右 采精前应将公猪的两肋和下腹部及包皮周围污物清除 按摩包皮腔，使其中的尿液尽可能排净 当包皮腔中的尿液顺阴茎流下时，应用纸巾将其吸附，避免其流入精液中 不要收集最初射出的精液（含菌量高） 如果可能尽量只收集浓份精液 不要过早终止采精，以防公猪不适,（三）精液处理,1.精液处理(
15、等温与容量测定),避免精液温度变化太快，防止阳光直射或紫外线照射 从恒温干燥箱中取出1000毫升的大烧杯，将盛有精液的食品袋放入 大烧杯中 将精液放在电子天平上称重（除去杯重） 记录精液容量 如果必要可将大烧杯放入水浴中与稀释液等温 检查水浴恒温箱中的水温是否为34（以温度计为准）,2.精液处理(活力测定),轻轻摇动精液并检查精液色泽、气味 活力检查：轻轻摇动精液，用微量移液器或1ml注射器加吸咀取25ul精液，放于预热到38的载玻片中间，盖上干净的盖玻片。放在恒温载物台上 没有恒温载物台的实验室，可先将一个厚玻璃板和载玻片预温至38 ,用微量移液器取25ul鲜精，再将恒温干燥箱中的厚玻片和载
16、玻片取出，将精液滴于载玻片中间，盖上盖玻片立即推入，调好焦距，再改用400倍观察活力。 做好活力检查结果记录 必要时进行精子的密度检查,3.精液处理(精液稀释),非商业性供精站，可不进行密度测定，只要精液色泽正常，每份精液中鲜精不少于20毫升，可保证足够的有效精子数 精液稀释：将预温后的稀释液缓慢加入大烧杯内的精液中，使总体积分装份数相当，并轻轻摇动或搅拌。,4.精液处理(精液分装),精液分装：将大烧杯放于搁物架上，从恒温干燥箱中取出分装管，将玻璃管一端放入精液中，并将精液搅动。用一支5ml一次性注射器装上一个移液器吸咀，将吸咀插入分装管的另一端，拉动活塞，使精液进管内下降至离管口10cm处，
17、关闭阀门；将分装管一端插入精液袋内，打开阀门，使精液进入袋内；当一袋达到刻度时，关闭阀门，将分装管插入另一袋内，打开阀门。同时将已装满的一袋用封口机封口。 将封口好的精液袋放在一个泡沫塑料盒中，使其缓慢降温，室温在20-30的情况下，可在盒中放置30分钟，然后放入恒温冰箱中,5.精液处理(精液保存),每天两次将精液袋颠倒两次，再放入恒温冰箱中 恒温冰箱应保持171 精液保存时间不一般不超过3天（72小时），超过时间一般丢弃，如果考虑继续使用，应取样检查活力。将厚玻璃及载玻片、盖玻片预热到38，用针头从精液袋封口处刺一小口，用微量移器取20ul放于载玻片中央，盖上盖玻片立即进行观察 可用泡沫塑料盒运输精液或专用电子恒温冰箱运输精液,
