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1、山西医科大学 教案（职业卫生与职业医学教学用）单位：公共卫生学院教研室：劳动卫生教研室任课教师姓名：宋静课程名称：职业卫生与职业医学授课时间：2013.9 授课章节职业性铅接触的测定与评价授课对象2009 级预防医学专业授课时数8 7 授课时间2013 年 9 月 24 日27 日授课地点公共卫生学院三层教学目的1.掌握空气中铅浓度的测定方法及意义。2.掌握尿中 -ALA 的测定方法及意义。3.熟悉有毒作业评价的方法。重点难点1.双硫腙比色法测定铅浓度时溶液颜色的变化过程及原因。2.尿中 -ALA 的测定原理。教学方法讲授，操作指导，集体讨论教学仪器722 分光光度计，采样器，采样夹，滤料，镊
2、子，1-10ml 吸量管， 25ml 比色管， 125ml 梨形分液漏斗，容量瓶，三角瓶，分液漏斗架，比色管架10ml 具塞比色管，吸管，沸水浴，离心机，漩涡混匀器教学步骤1.复习理论课相关内容，讲授实验过程及实验注意事项2.指导学生实验操作3.集体讨论实验结果，分析实验的成败原因思考题1.实验中哪些原因可以造成实验结果偏高，哪些原因可以造成实验结果偏低2.实验中需要注意的事项有哪些参考教材1.劳动卫生与职业病学实验讲义，山西医科大学劳动卫生教研室编2.职业卫生与职业医学，牛侨主编，中国协和医科大学出版社（实践 教 学 用）讲授内容注解铅是人类最早使用的金属之一，它的应用范围非常广泛，其广泛程
3、度仅次于铁。其实人们很早就认识到铅中毒的危害，但铅中毒的防治直到今天仍然未得到很好的解决。工业性铅中毒在我国占慢性职业中毒的首位，生活性铅中毒亦不容忽视。央视新闻夜话中一份全国二十八省市的调查显示，超过 1/3 的孩子有铅中毒的迹象。所以，应重视铅污染。铅化合物可通过呼吸道，消化道和皮肤吸收进入人体。生产过程中呼吸道吸入是重要途径。铅经呼吸道吸收较为迅速，所以空气中铅浓度的测定，可以在很大程度上反映人体的铅接触水平。一 空气铅的测定实验目的及意义：1.掌握空气中铅浓度的测定方法2.了解生产环境中空气铅的污染程度，评价生产场所劳动卫生条件以及控制措施的实施效果3.通过效果调查，结合实验研究，为制
4、订和修订铅的卫生标准提供依据实验方法及原理：1.双硫腙分光光度法本次使用2.石墨炉原子吸收光谱测定法实验原理：在弱碱条件下，溶液中铅离子与双硫腙作用生成双硫腙铅红色化合物，可溶于二氯甲烷，四氯化碳等有机溶剂中，根据红色深浅比色定量。实验步骤 ：1样品的处理将已采样的滤料(滤纸或滤膜或超细玻璃纤维滤纸)放在小烧杯中， 加硝酸溶液 20ml ，于电炉上慢慢煮沸1520 分钟，并不时翻动几次。将溶液转入 25ml 比色管中，用热的硝酸溶液洗涤滤料及烧杯34 次，洗液一并转入比色管中，加硝酸溶液至25ml，混匀。此液即为样品液。分析时取样品液 l 10ml，于另一25ml 比色管中，按制备标准曲线步骤
5、3 8 操作。2标准曲线的制备取125m1 分液漏斗6 个，按下表配制标准色列：试剂管号讲授内容注解0 1 2 3 4 5 铅标准应用液（ml）硝酸溶液（ml）0 0.5 1.0 3.0 5.0 7.0 20.0 19.5 19.0 17.0 15.0 13.0 铅含量（）0 0.5 1 3 5 7 3分别向样品管、标准管中加盐酸羟胺溶液1 滴，混匀。4各加柠檬酸铵溶液0.5ml ，混匀。5各加酚红指示剂2 滴，然后滴加氨水至溶液刚显红色，再多加 2 滴。此时溶液呈弱碱性。6各加氰化钾溶液0.5ml(约 10 滴)，摇匀。7各加双硫腙氯仿应用液5ml，充分振摇50 次(注意放气 )。静置分层后
6、，氯仿层呈现红绿(蓝 )混合色调。8吸弃上层，各管加双硫腙洗除液15ml，振摇 30 次。静置分层后，氯仿层呈现单一的红色，吸弃上层，同样方法再洗一次后用分光光度法，在波长 510nm 下，用 1cm 比色杯， 以氯仿作参比， 测其吸光度 (此为单色比色法 )。9以标准色列管吸光度对铅含量绘制标准曲线。10将测得样品管吸光度，查标准曲线，即得样品中的铅含量。【计算】0325/vbcmmg）空气中铅的浓度（式中： c 样品管中铅含量b 分析时所取样品量(m1) V0 换算成标准状态下的采气体积(L)。实验注意事项：讲授内容注解1.双硫腙能与许多金属离子呈色，故并非铅的专一试剂，但通过控制实验条件
7、，能消除别的金属离子的干扰。2.所用试剂如果不纯的话，应进行提纯。3.所有仪器的预处理，泡酸去铅，去除其他金属离子的干扰。4.煮沸时注意控制火力，防止暴沸溅出缺失铁，使结果偏低。5.振摇时注意放气，充分振摇萃取完全，以免影响结果。6.本次实验用水全都为去离子水。7.KCN 属剧毒，应特别注意安全，操作时应特别注意。二尿中 -ALA 的测定实验目的：（1）学习尿中 -ALA的测定方法，掌握尿中 -ALA 的测定在铅中毒诊断中的意义。（2）了解铅吸收的概念。（3）了解铅污染的状况及其危害，以便提出预防铅中毒的更好的措施。实验方法： 乙酸乙酯萃取-对二甲氨基苯甲醛比色法。实验原理：尿中 -ALA 与
8、乙酰乙酸乙酯在一定条件下，可以生吡咯化合物。后者与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色的化合物，可以通过对此红色化合物颜色的深浅进行比色来确定尿中 -ALA 的含量。实验步骤（1）标准曲线的绘制（见下表）：试剂管号0 1 2 3 4 5 应用液（10g /ml ） 0 0.1 0.3 0.5 0.7 1.0 蒸馏水（ ml）2.0 1.9 1.7 1.5 1.3 1.0 -ALA 含量（ g）0 1 3 5 7 10 蒸馏水调零， 1cm 光径， 在 554nm 处测定各管吸光度值（A），并以 -ALA含量（ g）为横坐标，以各管吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。（2）尿样 -ALA 的测定 尿比重的测定
9、（为避免尿液浓淡对结果的影响）：讲解和示范尿比重计的使用及其注意事项。 尿样测定中设有空白管，以扣除本底值的影响。讲授内容注解 具体测定步骤如下：试剂（ ml）样品管空白管尿样1.0 1.0 蒸馏水1.0 1.0 乙酸缓冲液2.0 2.4 混匀乙酰乙酸乙酯0.4 混匀，沸水浴10 分钟，取出冷却至室温乙酸乙酯4.0 4.0 振摇 100 次，离心5 分钟，取出静置分层取上层液体2.0 2.0 显色剂2.0 2.0 静置 10 分钟，半小时内比色定量比色条件： 554nm，1cm 光径，乙酸乙酯调零。注意事项：（1）显色剂应当新鲜配置。因为显色剂极易氧化，故加上显色剂后，应该立即改进盖紧塞子；先
10、加上层液体，后加显色剂。（2）比色应尽快在30 分钟内完成。（3）其他可以与显色剂反应的物质，不被乙酸乙酯萃取，故不干扰测定。（4）萃取时应充分振摇。（5）吸取上层液体时，应小心，避免搅浑影响测定。（6）使用离心机时要配平。结果计算：A样-A空= ，查标准曲线得出样品管中尿 -ALA 的含量（ g）。尿 -ALA（mmol/L）=)1ml(g样品管含量 尿样）（ 000.1000.1020.1 尿比重 0.076 尿 -ALA （mg/L） =)1L(g样品管含量尿样）（m国家卫生部的标准：尿 -ALA 8mg/L 结果讨论： 分析实验结果偏大或偏小的原因讲授内容注解三 有毒作业评价有毒作业危
11、害程度分级评价法是应用国家标准有毒作业分级（GB12331-90 ）对有毒作业危害程度进行评价的方法。它是由毒物危害程度级别权系数（D） 、有毒作业劳动时间权系数（L）和毒物超标倍数（B）三项指标求出的分级指数（C）来进行评定的。1.毒物危害程度级别权系数D 见下表。毒物危害程度级别权系数毒物危害程度级别D （极度危害）8 （高度危害）4 （中度危害）2 （轻度危害）1 注：毒物危害程度级别查职业性接触毒物危害程度分级（GB5044-85）2.有毒作业劳动时间权系数L 见下表。有毒作业劳动时间权系数有毒作业劳动时间（h）L 21 25 2 5 3 3.毒物浓度超标倍数B B=（实测值 /接触限值） 1 4.有毒作业分级指数C 计算C=D L B 5.确定有毒作业的危害程度级别根据计算的分级指数C 值，按下表确定该有毒作业的危害程度级别。讲授内容注解有毒作业危害程度级别分级指数范围级别COO 级（安全作业）O C6一级（轻度危害作业）6C 24二级（中度危害作业）24C 96三级（高度危害作业）C96 四级（极度危害作业）注：当有毒作业工作地点空气中存在多种毒物时，应分别进行作业分级，以最严重的级别定级。
