《Vc测定4(1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Vc测定4(1)（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、GB/T 12143.3-89 果蔬汁饮料中 L-抗坏血酸的测定方法（ 乙醚萃取法 ）1 主题内容与适用范围本标准规定了使用2,6-二氯靛酚滴定 -乙醚萃取法测定果蔬汁饮料中L-抗坏血酸含量的方法。本标准适用于浓缩果蔬汁、 果蔬原汁、果蔬汁饮料、 果蔬汁碳酸饮料及果蔬汁固体饮料中 L抗坏血酸的测定 ,尤其适用于深色果蔬汁饮料中L-抗坏血酸的测定。但不适用于脱氢抗坏血酸的测定。2 引用标准GB 601 化学试剂 标准溶液制备方法GB 686 化学试剂 丙酮 HG 3-1002 化学试剂 乙醚3 原理本法根据氧化还原反应原理，2,6-二氯靛酚能被 L-抗坏血酸还原为无色体，微过量的 2,6-二氯靛
2、酚用乙醚提取 ,然后由醚层中的玫瑰红色来确定滴定终点。4 试剂所用的试剂均为分析纯 ,所用的水均为蒸馏水或同等纯度的水(以下简称水 )。4.1 丙酮：符合 GB 686. 4.2 乙醚：符合 HG 3-1002. 4.3 10%硫酸铜溶液：称取10g 硫酸铜 (CuSO4 5H2O)溶解于水 ,并稀释至 100mL. 4.4 2%草酸溶液：称取 20g 草酸(C2H2O4 2H2O)溶解于水 ,并稀释至 1L。4.5 0.1 mol/L I2 碘标准滴定溶液：按GB 601 第 2 章第 10 条配制与标定，贮存于棕色瓶中。4.6 0.01 mol/L I2 碘标准滴定溶液：将0.1mol/L
3、 碘标准滴定溶液在使用时稀释V25mL V250mL ，浓度以 C1 表示。4.7 0.88mg/mL 抗坏血酸标准溶液： 称取 0.22g 抗坏血酸，用 2%草酸溶液 (4.4)溶解并稀释到 250mL。标定：吸取抗坏血酸标准溶液25.00mL，加0.5%淀粉指示液 (4.10)1mL，用0.01 mol/L I2 碘标准滴定溶液滴定至呈 微蓝色 为止。C1 V1 C2 = 176 (1)25 式中： C2-L-抗坏血酸溶液的浓度， mg/mL; C1-碘标准滴定溶液的浓度，mol/L; V1-标定时所用碘标准滴定溶液的体积，mLl; 176-1 mL 1 mol/L 碘标准滴定溶液相当于L
4、-抗坏血酸的毫克数。4.8 0.088 mg/mL L-抗坏血酸标准溶液：吸取0.88 mg/mL L-抗坏血酸标准溶液(4.7) 25.00mL，用 2%草酸溶液稀释， V25mL V250mL 。注： 4.7 和 4.8 的 L-抗坏血酸溶液在 使用时配制 。4.9 2-6-二氯靛酚标准滴定溶液：称取200mg 2,6-二氯靛酚，用少量热的重蒸馏水湿润，然后再慢慢加入热的重蒸水，搅拌溶解，过滤。冷却后，滤液用重蒸馏水稀释到1L。标定：吸取 10.00mL L-抗坏血酸标准溶液 (4.8)置于 250mL 锥形瓶中，用 2.6-二氯靛酚标准溶液滴定至玫瑰红出现为止，耗去体积记为V。m T=
5、(2)V 式中：T-2,6-二氯靛酚溶液的滴定度， 即 1 mL 2,6-二氯靛酚溶液相当于L-抗坏血酸的毫克数， mg/mL;m-10 mL L-抗坏血酸标准溶液中含抗坏血酸的量，mg; V-标定时所用 2.6-二氯靛酚溶液的体积 ,mL. 4.10 5g/L 淀粉指示液：称取0.5g 可溶性淀粉，用5mL 冷水调匀，将所得乳浊液在搅拌下徐徐注入100 mL 沸腾着的水中，再煮沸23min，使溶液透明。5 仪器 实验室常用仪器及下列各项5.1 10 mL 微量滴定管（或用酸式滴定管代替） 。5.2 50 mL 100mL 比色管。5.3 125 mL 分液漏斗。6 试液的制备水果、蔬菜中抗坏
6、血酸的含量见附录 A。6.1 浓缩汁在浓缩汁中加入与在浓缩过程中失去的天然水分等量的水，使成为原汁。然后同原汁一样取一定量样品，稀释、混匀供测。6.2 原汁称取含抗坏血酸 410 mg 有代表性的样品（精确到0.001g） ，用 2%草酸溶液稀释到 250 mL,混匀供测。6.3 果汁饮料、果蔬汁水6.3.1 抗坏血酸含量在 0.05mg/mL 以下的样品，混匀后直接取样测定。6.3.2 抗坏血酸含量在 0.05mg/mL 以上的样品，称取含抗坏血酸410mg有代表性的样品（精确到 0.001g） ，用 2%草酸溶液稀释到 250mL，混匀供测。6.4 果蔬汁碳酸饮料先将样品旋摇到基本无气泡后
7、,按 6.3 条制备。6.5 固体饮料称取含抗坏血酸410mg 有代表性的样品 (精确到 0.001g)，用 2%草酸溶液溶解并稀释 至 200mL,混匀供测。6.6 乙醚抽提处理对于高度乳化或样液色泽较深且易被乙醚抽提的样品，取 10.00mL 样品，置分液漏斗中。加 30mL 乙醚，充分振摇但勿使之乳化。 待分层后将下层样液放入250mL 容量瓶中，分液漏斗中加入 20mL2%草酸溶液。适当振摇，待分层后，将下层水溶液放入上面的 250mL 容量瓶中。如此反复操作4 次,将每次的下层水溶液均放入250mL 容量瓶内，然后用 2%草酸溶液稀释至刻度。6.7 空白试液的制备按试液制备中所确定的
8、取样量称取同一样品(精确到 0.001g)， 置于 250mL 锥形瓶中，加 20mL10%硫酸铜溶液，加水使总体积约为100mL，置于垫有石棉网的电炉上，小心加热至沸并保持微沸15min，然后用流动水冷却到室温。 将此溶液转移到250mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，供空白测定。7 分析步骤7.1 试液的制定取 6 支 50mL 比色管，在每支比色管中加入10.00mL 按第 6 章制备好的试液，各加2. 5mL 丙酮。放置 3min 后，在第一支比色管中加入1 mL2,6-二氯靛酚溶液 ，充分混匀，精确控制 40s后，加入 2 mL 乙醚，充分振摇，放置几分钟，待乙醚与水溶液分层后，观
9、察醚层有无 出现玫瑰红色。 当出现淡玫瑰红色时， 则表明已达到测定的暂定终点。如果 2,6-二氯靛酚全部被抗坏血酸还原，乙醚层保持无色，则在第二支比色管中加入1.5mL 2,6-二氯靛酚溶液， 充分混匀，精确控制40s后，加入 2 mL 乙醚，充分振摇，放置几分钟，待乙醚与水溶液分层后，观察醚层有无出现玫瑰红色 。如还不显红色，再逐一按 2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL 的量加入 2,6-二氯靛 酚溶液，直到乙醚层出现玫瑰红色达到暂定终点为止。这时所加的2,6-二氯靛酚的量常常是 过量的，所以需进一步试验， 确定精确的终点 。如果加到 3.0mL 2,6-二氯靛酚溶液
10、时出现玫瑰红色，则从第六支加有试液的比色管中开始分别加入2.6、2.7、2.8、2.9mL 2,6-二氯靛酚溶液，直至呈现淡玫瑰红色为止。 如在 2.9mL 刚呈红色，则 2.9mL 为精确终点。如加到 2.9mL 2,6-二氯靛酚溶液仍不显玫瑰红色，则上面的3.0mL 就是精确终点。 所用 2,6-二氯靛酚溶液为 毫升。对于抗坏血酸含量低于2mg/100g 的样品，用 100mL 比色管直接加倍取样测定。丙酮与乙醚的加量也相应加倍,操作同上。 对于同一个被测样液需平行测定三次。7.2 空白试液的测定吸取空白试液10.00mL 于比色管中，同7.1 加丙酮并逐一按0.05、0.10、0.15、
11、0.20mL 的量加入 2,6-二氯靛酚溶液， 测得在乙醚层中刚呈现玫瑰红色所需的2,6-二氯靛酚溶液的 量为 b 毫升。8 结果的表示8.1 计算(a-b) T X = 100(3)m 式中： X-100g(或 100mL)样品所含 L-抗坏血酸的毫克数， mg/100g(或 100mL); a-测定试液时所需 2,6-二氯靛酚溶液的体积 ,mL; b-测定空白试液时所需2,6-二氯靛酚溶液的体积 ,mL; T-2,6-二氯靛酚溶液的滴定度， mg/mL,即每 mL 此溶液相当于 L-抗坏血酸的mg 数；m-10 mL 试液中所含样品的量 ,g(或 mL)。注： 以误差在允许范围内的三次测定
12、结果的算术平均值报告结果,精确到小数点后第一位。8.2 允许误差同一样品三次测定结果的相对偏差为：其抗坏血酸含量大于或等于10mg/100g的样品应小 于 2%,含量小于 10mg/100g的样品应小于 5%。实训萃取分离 一、实验目的（1）了解萃取分离的基本原理，乳化及破乳化。 （2）熟练掌握分液漏斗的各项操作。二、仪器药品 漏斗架、分液漏斗（60mL ） 、移液管（ 10mL） 、碱式滴定管（25mL） 、三角瓶（ 50mL ） 、烧杯乙醚（或石油醚、氯仿、四氯化碳）、冰醋酸、 0.1mol/L氢氧化钠标准溶液、酚酞指示剂 三、基本原理 萃取是利用物质在两种不互溶（或微溶）溶剂中溶解度或分
13、配比的不同来达到分离、提取或纯 化目的一种操作。 例：将含有有机化合物的水溶液用有机溶剂萃取时，有机化合物就在两液相之间进行分配。在 一定温度下，此有机化合物在有机相中和在水相中的浓度之比为一常数，即所谓“分配定律”。 四、操作要点和说明 在实验中用得最多的是水溶液中物质的萃 取，最常使用的萃取器皿为分液漏斗。 1、在使用分液漏斗前必须仔细检查：玻璃塞和活塞是否紧密配套。然后在活塞孔两边轻轻 地抹上一层凡士林，插上活塞旋转一下，再看是否漏水。 2、将漏斗放于固定在铁架上的铁圈中，关 好活塞，将要萃取的水溶液和萃取剂（一般为溶 液体积的13）依次从上口倒入漏斗中，塞紧塞 子。 3、取下分液漏斗，
14、用右手掌顶住漏斗顶塞 并握漏斗，左手握住漏斗活塞处，大拇指压紧活 塞，旋转振摇（如图所示），振摇几次后，将漏 斗的上口向下倾斜，下部的支管指向斜上方（朝无人处），左手仍握在活塞支管处，用拇指和食指旋 开活塞放气 （释放漏斗内的压力） ，如此重复几次， 将漏斗放回铁圈中静置，待两层液体完全分开后， 打开上面的玻璃塞，再将活塞缓缓旋开，下层液体自活塞放出，然后将上层液体从分液漏斗的上口 倒出（切记！ ）将水溶液倒回分液漏斗，再用新的萃取剂萃取。如此重复35 次。 五、实验步骤 1用移液管准确量取10mL冰醋酸与水的混合液（冰醋酸与水以1：19 的体积比相混合） ，放入 分液漏斗中， 用 30mL乙
15、醚萃取。（注意实验室内不许有明火）待分层后， 放出水层到50mL三角瓶内， 加 2 滴酚酞指示剂，用0.1mol/L标准氢氧化钠溶液滴定, 记录用去氢氧化钠的体积. 计算 :（1）留在 水中的醋酸量及百分率.（2）留在乙醚中的醋酸量及百分率. 2. 用移液管准确量取10mL冰醋酸与水的混合液于分液漏斗中, 用 10mL乙醚如上法萃取, 分去 乙谜溶液 , 水层再用 10mL乙醚萃取 , 再分去乙醚溶液后, 水层仍用 10mL乙醚萃取 . 如此前后共计三次,最后将三次萃取后的水层放入50mL三角瓶中 , 用 0.1mol/L标准氢氧化钠溶液滴定, 记录用去氢氧化 钠的体积 . 计算 : （1）留
16、在水中的醋酸量及百分率. （2）留在乙醚中的醋酸量及百分率. （3）醋酸的分配系数. （4）比较萃取醋酸的效率. 将乙醚溶液倒入指定回收瓶. 六、注意事项 （ 1） 分液时一定要尽可能分离干净，有时在两相间可能出现一些絮状物，也应同时放去 （下层）。 （ 2）要弄清哪一层是水溶液。若搞不清，可任取一层的少量液体，置于试管中，并滴少量自来 水，若分为两层，说明该液体为有机相，若加水后不分层则是水溶液。 （ 3）在萃取时，可利用“盐析效应”，即在水溶液中加入一定量的电解质（如氯化钠），以降低 有机物在水中的溶解度，提高萃取效果。水洗操作时，不加水而加饱和食盐水也是这个道理。 （ 4）在萃取时，特别是当溶液呈碱性时，常常会产生乳化现象。这样很难将它们完全分离，所图 1 分液漏斗的振摇以要进行破乳，可加些酸。 萃取溶剂的选择要根据被萃取物质在此溶剂中的溶解度而定，同时
