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1、6 Sigma 在临床生化检测的应用: Architect c16000,Kasal C, et al. Evaluation of general chemistry assays on the Abbott Architect c16000 clinical chemistry system. Clin Chem 2007;53(S);A175. www,westgard,cin.qcapp42,Alb BCG 15.5 s,AlbuminBCG = 15.5 s Albumin BCP = 24.3 s Total Bilirubin = 11.9 s Calcium = 10.1 s
2、Cholesterol = 9.1 s Creatinine = 5.8 s Glucose = 5.9 s Total Protein = 14.8 s Triglycerides = 14.2 s,Lambert-Beers Law,当一束平行的单色光通过一定均匀的某吸收溶液时，该溶液对光的吸收程度 与吸光物质的浓度c和光通过的液层厚度b的乘积成正比。这种关系称为朗伯-比尔定律，其数学表达式为 。A = Kbc c=A *1/kbF=KbA称为吸光度，I0和I分别为入射光和透射光的强度，b为光通过的液层厚度，c为吸光物质的浓度，K为比例常数。b的单位为cm, 若c的单位以mol/L表示，则
3、用表示K，称为摩尔吸光系数，单位为L/(molcm)；若c的单位以g/L表示，则用a表示K， a称为吸光系数，单位为L/(gcm)。由于吸光度与吸光物质浓度的关系最为重要，有时又被简称比尔定律。,光学检测原理,光路系统为直接光检测，后分光，采用凹面衍射光栅，有16个检测波长。光路系统主要组成有：卤钨灯，隔热玻璃，凸镜，Shutter，狭缝，反光镜，光栅，线性硅二极管矩阵，前置放大板，数据处理板和CPU板等。光路组件将光聚焦后射入反应杯，当反应杯中的物质发生化学反应时，其吸光度会发生变化。光经狭缝到光栅后被分成不同的波长，线性硅二极管矩阵根据不同波长进行检测。用单波长或双波长测定每个读数点，一般
4、分析项目都使用双波长检测。,关于反应时间,反应时间包括反应杯转盘的转动，转动的时间和转盘周围组件的位置 每次转动都发生在特定的时间和到达特定的位置 反应转盘按逆时针方向每4.5秒旋转近1/4圈（41个反应杯的位置）使反应杯到达特定位置 每一次旋转，有41个反应杯会经过光路系统，每个反应杯中的吸光度值都会被检测到,关于反应的几个点,1. 起始位置，样品探针将样品吸入反应杯 2. R1位置，试剂探针1将1试剂（或样品稀释液）加入反应杯 3. 无动作 4. 混匀位置1，样品和1试剂（或样品稀释液）被混匀 45.反应杯经过光路系统被读取吸光度值 5. 以上总共转了4个1/4圈共164个反应杯位置，此位
5、置为起始1号位置的后一个反应杯的位置（总共有165个反应杯）。如果样品需稀释，在此位置样品探针将稀释样品吸入放入1号位置的反应杯。 31.如此样品进行ICT检测，在此位置被ICT系统的探针从反应杯吸入稀释样品进行检测 67.R2位置，试剂探针2将2试剂加入反应杯（此前时间为5.1分钟） 68.混匀位置2，样品/试剂1和试剂2被混匀 6135.为持续旋转孵育时间，当反应杯每经过一次光路系统将被读取吸光度值，总共最多33次读数 136164.反应杯清洗系统对反应杯进行8步清洗步骤 165.此位置为到重新使用的1号位置前的最后一个循环位置（至此全部反应时间为9.6分钟）,REACTION TIME
6、TABLE,Total reaction time = 9.9 min. (same for each assay),- 10 -,读数点示意图,仪 器 详 述,分配组件加液量,光路,反应时间常见报警,- 6 -,雅培诊断,各分配组件加液量详述,范围,步进,Sample Volume 样本体积:,DS Vol = Diluted sample Volume:稀释样本,Reagent 1 Volume R1 试剂量:,Reagent 2 Volume R2 试剂量 :,Smartwash Volume 智能冲洗洗液量,Water/Diluent Vol for Conc. Reagent: 浓缩
7、试剂使用水或稀释液的量,Total Volume in Cuvette:反应杯最小量及最大量,* Not including overaspiration volume,* Water- and reagent volume entered determine the dilution ratio,- 7 -,Volume Tolerance: Volume range Min/Max Range Precision 20 to 50 L nominal +/- 5% /= 2 % 51 to 345 L nominal +/- 2.5% /= 0.5%,光路详述,波长,Specificati
8、ons,Options,光径,测量体积:,读数点:,吸光度范围,吸光度线性,- 8 -,项目反应类型,- 11 -,终点法: End upEnd down速率法 (Kinetik):Rate upRate - down,- 11 -,终点法:,反应达到平衡 单双试剂都可以使用 双试剂推荐使用Self blank,反应类型 终点法1,反应类型终点法2,- 9 -,Absorbance,反应类型终点法2,- 13 -,R2 addition= Reaction Start,反应类型 速率法 1,- 11 -,酶类- 使用因子物质- 定标曲线- 未达到平衡时段,速率法 :,Absorbance,Ti
9、me,反应类型 速率法 2,For Enzymes 因子用于计算,- 12 -,Sample Dispense + R1,R2 addition= Reaction Start,未知待测物浓度 = D Abs 变化 / min x Enzyme Factor or D Abs 变化/ sec x Factor,D Abs change / min = U/L,D Abs change /sec = kat/L,1,16 17,33,Abs reading points,Flex Time Reading酶的线性扩展,样本稀释,- 91 -,雅培诊断,速率法 - FLEX TIME READIN
10、G 弹性速率,Absorbance,Photometric Points,S,R1,R2,Flex Read Time,Main Read Time,正常样本,高浓度或高活性样本,Abs Range Substrate Depletion,- 92 -,样本稀释,加样本 ( 2.0 to 35.0 L),用来稀释的反应杯,用量反应的反应杯,加入稀释液 (10 to 345 L,4.5 s x 1 cycle,混匀100 L 或 更多,加入稀释后的样本 ( 2.0 to 15.0 L),4.5 s x 1 cycle,4.5 s x 2 cycles,- 94 -,- 42 -,样本稀释,CC
11、Application Training,- 42 -,空 白,空 白 选 择,Self - Blank,Reagent Blank 试剂空白 (R1 + R2 + Water as Sample),(R 1 and Sample),- 43 -,终点法 /速率法 试剂空白,Sample Dispense first Reagent Dispense First Mix,定标过程使用,R1 + R2 + (Sample) = 水, 生理盐水或定标液 A,Photometric Points,Absorbance,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
12、 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33,Second Reagent Dispense Second Mix,BLK Abs Range,- 44 -,终点法 - SELF BLANK,Absorbance,Photometric Point,Sample Dispense first Reagent Dispense First Mix,Second Reagent Dispense Second Mix,1,5,10,16,Self-Blank,Main Read Time Option,DAbs,17,20,25,30,33,-
13、46 -,CC Application Training,- 50 -,定 标 的 报 警 设 置,7个检测功能:,试剂空白吸光度检测定标重复次数间的离散度检测斜率检测Factor Comparison Check *SD 检测Monotonic Check *Approximation Convergence Error *,- 51 -,终点法 /速率法 试剂空白,Sample Dispense first Reagent Dispense First Mix,定标过程使用,R1 + R2 + (Sample) = Water, Saline or Calibrator A,Photome
14、tric Points,Absorbance,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33,Second Reagent Dispense Second Mix,BLK Abs Range,- 44 -,定标离散度检测,Absorbance,Concentration,C1,C2,calibrator deviation,- 54 -,定标 斜率检测,Absorbance,Concentration,Blank,Calibrator 1,min. & max. allowed Span i.e. between Blank and Cal 1,x,x,- 56 -,定标方法,定标推荐:在手册上没有官方的明确限定 到定标周期或换批号时，建议全线定标 换盒进行空白定标,选项:Blank1-Point2-PointFull,
