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1、蒲公英多糖体外抑瘤和抗突变作用研究蒲公英多糖体外抑瘤和抗突变作用研究 (1)(1)【摘要】 目的观察蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制和抗突变作用。方法采用 MTT 法测定蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制作用，用微核实验检测抗突变作用。结果蒲公英多糖随浓度的增加对肝癌细胞的抑制率增加，但不明显；可以显著提高外周血细胞免疫力，拮抗由环磷酰胺诱发的微核突变（P） 。结论蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制作用不明显；能有效地拮抗环磷酰胺诱发的微核突变。【关键词】 蒲公英多糖抑瘤微核突变蒲公英 TaraxacumL.是中医临床常用的中草药,具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋、健胃消炎、保肝利胆等功效1 。研究发现，蒲公英有抗
2、菌2 、抗突变3 、抑瘤4 、抗氧化5等多种药理作用，并能提高机体免疫性，对抗环磷酰胺引发的 DNA 损伤6 。蒲公英根部富含多糖7 ，研究发现多糖具有广泛的药理作用，其中多糖诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖是目前研究的热点；同时外界环境诱发的突变是肿瘤细胞形成的重要因素之一。本文就蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制以及对环磷酰胺诱发的突变的拮抗作用进行了研究。1 材料与仪器试剂 PMI1640，美国 GIBCO 产品；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料研究所产品；环磷酰胺（CP） ，上海华联制药公司产品；噻唑兰（MTT） ，Sigma 公司产品；植物血凝素（PHA） ，金尔康动物药业有限公司；DMS
3、O，北京索莱宝科技有限公司产品；Giemsa，Sigma 公司产品。材料东北蒲公英 Kitag.采自黑龙江省五大连池自然风景区。蒲公英多糖的制备参照文献8法进行。肝癌细胞Bel-7402 和正常人外周血淋巴细胞均由齐齐哈尔医学院馈赠。仪器 KHB 全自动酶标仪（ST-360） ，北京桑翌实验仪器研究所产品；细胞培养箱，河北省虹宇仪器设备有限公司产品；96 孔板，Greiner 公司产品；超净工作台，ESCO公司产品。2 方法MTT 法9检测蒲公英多糖对肝癌细胞 Bel-7402 的抑制作用运用改良的 MTT 实验9计算蒲公英多糖对肿瘤的抑制作用，蒲公英多糖的终浓度为25，50，100，200，
4、400，800，1600，3200g/ml。阳性对照加 CP，终浓度为 260g/ml；每个浓度均设 6 个平行孔。酶标仪的吸收波长采用 570nm。抑制率（IR）=（空白对照组 OD 值-多糖组 OD 值）/空白对照组 OD 值。采用 SPSS 数据包进行方差分析。微核实验检测蒲公英多糖拮抗环磷酰胺诱发的微核突变常规采人外周血与培养10 。细胞培养 24h 后，将蒲公英多糖用 PBS 溶液配成溶液，微孔滤膜过滤（m） 。将多糖溶液加到培养瓶内，使多糖浓度分别为50，200，800，3200g/ml。继续培养 24h 后，向每瓶内加入 25mlCP，使 CP 浓度达到 100g/ml。另设空白对照组和 CP 阳性对照组，空白对照组加 PBS 不加 CP，CP 阳性对照组加 CP 不加多糖。制片采用文献10法进行。统计：观察计数 1000 个可计数转化细胞的微核（MN）数，计算千分率（MN） 。用 SPSS 软件包分析各组数据。抑制率（%）=（阳性组 MN 数-实验组 MN 数）100/阳性组MN 数。（作者：未知本文来源于爬虫自动抓取，如有侵犯权益请联系 service立即删除）
