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1、沙枣花超临界二氧化碳萃取物清除自由沙枣花超临界二氧化碳萃取物清除自由 基的研究基的研究(1)(1)作者：张振华，俞维，王基云，王晶霞，王妍【摘要】 目的通过 DPPH法测定沙枣花超临界萃取物各组分的清除自由基的能力。方法采用超临界 CO2 萃取技术对沙枣花进行萃取，对萃取物依次用石油醚，醋酸乙酯，正丁醇进行萃取，通过 DPPH 法测定分离釜 I 和分离釜 II的萃取物各组分的清除自由基的能力，进行定性和半定量的研究。结果分离釜 II 总的萃取物的清除能力明显大于分离釜 I 总的萃取物的清除能力，但是分离釜 I 的经石油醚萃取后的水层，醋酸乙酯层，正丁醇层，经醋酸乙酯和正丁醇萃取后的水层的清除能
2、力分别大于了分离釜 II 各组分的清除能力。结论沙枣花超临界萃取物各组分对 DPPH均具有一定清除作用,且与体积浓度呈量效关系。【关键词】 沙枣花；超临界二氧化碳萃取；DPPHAbstract:ObjectiveTostudythescavengingactivityofsupercriticalCO2extractofflowerofElaeagnusangustifoliaagainstextractionwasperformedbyligroin,acetidinandn-butanolinturn,andthemethodofDPPHwasadoptedtocomparethescav
3、engingactivityagainstfreeradicalsbydifferentpartsofextractsofextractedcaldronand ,andcarriedoutqualitationandsemiquantitativescavengingactivitybyotherpartsofextractsofextractedcaldronwasbetterthanthatofextractedcaldron.ConclusionSupercriticalCO2extractofflowerofElaeagnusangustifoliacanscavengeDPPH,a
4、ndthescavengingactivityhasdose-effectrelationshipwithvolumeconcentration.Keywords:flowerofElaeagnusangustifolia； SupercriticalCO2extraction； DPPH沙枣花为胡颓子科植物沙枣ElaeagnusangustifoliaL.的花,主产于西北地区。宁夏沙枣树抗旱耐碱,具有很强的生命力,也是宁夏防风固沙的重要植物。每年 56 月,淡黄色的小花朵释放出浓郁的芳香气味,深受人们喜爱。椐宁夏中药志记载,沙枣花主要含山萘酚、花白素、脂肪油和少量挥发油,具有止咳平喘的功能,
5、可用于治疗慢性气管炎1 。已有学者以食用酒精为提取剂提取沙枣花中黄酮类化合物2 ，另有王永宁等3对黄酮化合物的清除羟基自由基进行了初步研究。本课题组的王妍教授对沙枣花进行了超临界萃取并对其芳香成分进行了研究4 。本文对沙枣花进行了 CO2 超临界萃取，应用DPPH 法对不同分离釜萃取物的不同组分进行了清除自由基的研究，为进一步对其清除自由基活性成分的筛选提供基础，以及为沙枣花的深度开发和综合利用提供技术支持和理论依据。1 仪器与材料HA062502221 型超临界萃取仪;721 分光光度计；电子分析天平,分液漏斗。1,1 二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH） ；无水甲醇（天津天江） ；沙枣花采
6、自宁夏银川地区,采回后立即在-20冷冻保鲜。2 方法超临界萃取沙枣花5称取 100g 新鲜冻存的沙枣花放入 1L 的萃取釜中，萃取压力 20MPa,萃取温度 45,流量30L/min,动态萃取 120min。从分离釜 I 接收分离物 I 共 ml,标记为总萃取物 1；从分离釜 II 接收分离物 II 共 ml，标记为总萃取物 2。各组分的制备将总萃取物 1 倒入分液漏斗中，加入等体积的石油醚进行萃取，充分振荡，放置分层后，得到下层水液，同法再次萃取，最后的水层标记为水层 1，保存石油醚层。同法对总萃取物 2 进行萃取，最后水层标记为水层 2，保存石油醚层。量取 5ml 的水层 1 于分液漏斗中
7、，加入等体积的醋酸乙酯进行萃取两次，合并，得到醋酸乙酯层,自然挥发至5ml,标记为醋酸乙酯层 1；剩余水层中加入等体积的正丁醇萃取两次，合并，得到正丁醇层 10ml,自然挥发至 5ml,标记为正丁醇层 1，最后剩余水层标记为萃后水层 1。量取 5ml 的水层 2 于分液漏斗中，加入等体积的醋酸乙酯进行萃取两次，合并，得到醋酸乙酯层,自然挥发至5ml,标记为醋酸乙酯层 2；剩余水层中加入等体积的正丁醇萃取两次，合并，得到正丁醇层,自然挥发至 5ml,标记为正丁醇层 2，最后剩余水层标记为萃后水层 2。DPPH标准曲线的制作准确称取DPPHmg,用甲醇定容到 100ml,配制成质量浓度为10-2m
8、g/ml 的标准溶液,置冰箱中备用。分别取 0，2，4，6，8，10ml 标准溶液,用甲醇定容至 10ml,最终质量浓度分别为0,5,10,15,20,25g/ml。测定上述标准溶液在 515nm 波长处的吸光度,制作标准曲线。其线性回归方程为:Y=4X+2E-16,R2=7清除 DPPH的测定方法 DPPH在有机溶剂中是一种稳定的自由基,其甲醇溶液显深紫色,在 515nm 处有强吸收。当其与抗自由基活性物质的孤对电子配对时,其吸收消失或减弱,通过测定吸收减弱的程度,可评价自由基清除剂的活性。对 DPPH自由基清除方法的测定参阅 Brand-William6研究。分别取以上制备不同组分各20，40，60，80，100l，量取相应体积的浓度为10-1mol/L 的 DPPH溶液至 4ml。立即混匀，用比色皿,在515nm 波长处进行测定,在一定时间间隔内测定吸光度，直到读数稳定。（作者：未知本文来源于爬虫自动抓取，如有侵犯权益请联系 service立即删除）
