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1、临床微生物标本 的采集与送检,主要内容,1、标本采集的意义和原则 2、标本的运送与拒收原则 3、各种标本的采集 血液、骨髓标本 尿液 粪便 痰及上呼吸道标本 穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等） 脓液及创伤感染分泌物标本 生殖道标本,标本采集是指采集患者体内的一小部分血液、体液、排泄物、分泌物以及组织细胞等标本进行检验，以反映机体正常的生理现象和病理改变。,标 本 采 集,标 本 采 集,60%以上的实验误差发生在分析前！标本采集正确与否与检验结果的准确性有密切的关系! 因此，我们应掌握正确的标本采集方法。,标本采集的意义,正确的微生物标本采集和运送是准确的病原学诊断的前提,掌握正确的标本采集
2、方法,为保证标本的质量，获得阳性结果，应掌握正确的标本采集方法、采集量和采集时间并应及时送检，特殊标本还需注明采集时间。,基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.混有正常菌群标本，不可置肉汤培养 6.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 7.送检标本应注明来源和检验目的,标本的运送原则,1、所有的标本都必须立即送往实验室，最好在2h内,保存时间不应超过24h. 2、最佳的临床标本送检首先取决于所获取标本的量.量少的标本应在采集后15-30min内送检. 3、对环境敏感的微生物如志贺菌、奈瑟氏菌和流感嗜血杆
3、菌（对低温敏感）应立即处理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、内耳道标本。,标本的拒收原则,无标签、无检验单 不检测，并与送检的医生和护士联系。 送检延误 不接收，提醒送检者，要求重新采集。 送检容器不当或渗漏 不接收，告知送检者，要求重新采集。 标本不符合要求 不接收，联系送检者，指出不符合要求之处，要求重新采集符合试验要求的标本.,临床微生物检验常见标本,血液、骨髓标本 尿液 粪便 痰及上呼吸道标本 穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等） 脓液及创伤感染分泌物标本 生殖道标本,一、血培养标本采集,血培养送检指征,病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。 1 、发热（38）
4、或低温（36） 2 、寒战 3 、白细胞增多（10109/L，特别有“核左移”时） 4 、粒细胞减少（成熟的多形核白细胞1109/L） 5 、血小板减少 6 、皮肤、粘膜出血 7 、昏迷 8 、多器官衰竭 9 、血压降低 10 、呼吸加快 11、特殊情况：可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细 菌，应增加尿液和脑脊液培养。,血培养采集须知,应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集 ！ 对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。 必须同时或间隔短时间内采集套以上血培养标本。,血培养采集容器,法国梅里埃公司血培养仪
5、配套血培养瓶或安图公司血培养瓶,血培养标本采集方法,1、皮肤消毒 2、培养瓶消毒 ：(1) 用75酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。(2) 酒精作用60s。(3) 在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 3、血液注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固 。,血培养采集次数,成年患者：推荐同时采集套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本）。 婴幼儿患者：推荐同时采集次（不同部位）血培养标本。 原因： 血培养做1套的检出率为65%。 做2套和3套检出率的检出率分别为80%和90%。 单瓶的血培养检出率不高，而且结果很难临床解释。 在采取血培养后的
6、2至5天内，无需重复采取血培养。 两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。,血培养采血量,成年患者：推荐采血量每瓶不少于5ml。婴幼儿患者：儿童3-5ml，婴儿为1-2ml，推荐采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）,注意事项,1、严禁在输液、输血的针头处抽取标本，以免影响检验结果。（最好在对侧采集） 2、若同时抽取几个项目的血标本，一般注入容器的顺序为：血培养瓶抗凝管干燥试管. 动作要迅速准确，避免溶血。注入标本后的血培养瓶务必立即送至检验科细菌室 3、每次领培养瓶不宜过多，以防过期，未使用的培养瓶亦应室温保存（15-30），切勿放冰箱保存。,骨髓标本的微生物学检查,采集
7、部位：骨髓穿刺法从髂骨采集标本。 采集时间：在用药前、发热初期或高热期 当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率远高于血液培养,二、尿液标本的采集,尿液标本的送检指征,1 有典型的尿路感染症状； 2 肉眼脓尿或血尿； 3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性； 4 不明原因的发热，无其他局部症状； 5 留置导尿管的病人出现发热； 6 膀胱排空功能受损； 7 泌尿系统疾病手术前。,尿液标本采集容器,无菌试管或无菌尿液标本留取容器,尿液标本采集方法,1、 清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿
8、道口周围，开始排尿，将前段尿排去，插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检，于一小时内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。,尿液标本采集方法,2 、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集,尿液标本采集方法,3 、直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能
9、将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。,尿液标本采集方法,4 、小儿收集包：对于无控制能力的小儿可应用收集包收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复查。,尿液标本采集方法,5、 留置导尿管收集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本。,注意事项,严格进行无菌操作，因为尿液标本的采集和培养中最大的问
10、题是污染杂菌 通常应取晨起第一次尿液送检 多数药物均通过尿液排泄，因此采集尿液应在用药前进行,三、粪便标本的采集,粪便标本的送检指征,1 急性腹泻：大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。 2 慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。 3 无痛性大量水样便或米泔样稀便。 4 先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。 5 抗生素治疗后腹泻：常发生于长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。 6 高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。,粪便标本的采集容器,一次性无菌便盒,粪便标本采集时间,1采样原则 腹泻病人应在
11、急性期采集（3天以内），以提高检出率，亦最好在用药之前。 2沙门菌感染 肠热症在2周以后；胃肠炎病人在急性期，早期采集新鲜粪便,粪便标本采集方法,自然排便采集法 自然排便后，挑取其脓血、粘液部分2-3g，液状粪便取絮状物2-3ml，盛于灭菌容器内或保存液中送检 直肠拭子方法 如不易获得粪便时，或排泄困难的患者及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm（幼儿2-3cm）轻轻转动取出，插入无菌试管内送检。,注意事项,虽粪便含有多种杂菌，但应尽量采用无菌容器（一次性无菌平皿）。 为提高检出率，要采集新鲜粪便作培养，且应挑取其脓血、粘液部分。,四、痰及上呼吸道标本的
12、采集,痰标本送检指征,1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。2 咯血：肺结核病人常痰中带血。3 呼吸困难 4 发热 5 胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛。 *肺部感染的患者有2550可能发生菌血症，应同时作血培养。,上呼吸道标本送检指征,1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。 2细菌性咽扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39以上。 3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。,痰标本和上呼吸道标本采集容器,一次性无菌留痰盒 咽拭子或鼻咽拭子,痰及上呼吸道标本 采集时间,痰：一般以晨
13、痰为好；支气管扩张症患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。 咽拭标本：时间上虽无严格限制，但应于抗菌药物治疗前为好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集为宜,痰标本采集方法：,自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口水漱口，再以开水或生理盐水漱口，以减少口腔常居菌群的污染，然后用力自气管深部咳出第一口痰于无菌痰怀内送检 小儿取痰法：用压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，送检,上呼吸道标本（咽拭子）采集方法：,采集上呼吸道标本通常采用无菌棉拭子。采集前患者应用开水或生理盐水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉
14、拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，但拭子要避免接触口腔和舌粘膜,注意事项,1 采集标本以清晨为佳，以减少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。 2 做结核分枝杆菌和真菌培养的标本若不能及时送检，应放4冰箱保存，以免杂菌生长。 3 作结核分枝杆菌检查，痰量要多或留取24小时痰液，以提高阳性检出率。,五、穿刺液标本,穿刺液标本,采集时间：当怀疑感染存在，应尽早采集标本，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集 采集容器：无菌容器采集方法：采用无菌方法用注射器抽取体内可疑感染部位的液体，注入无菌试管立即送检,注意事项：,如果用于检测细菌，收集脑脊液后，最好能在常温下15-
15、30分钟内接种培养皿。脑脊液标本不可置冰箱保存，否则会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌（能产生自溶素迅速自溶）、肺炎链球菌和嗜血杆菌 。,注意事项：,如果只采集了一管脑脊液，应先送细菌室做细菌培养，再做脑脊液生化、常规等检查 穿刺时应严格无菌操作 作脑脊液培养时，建议同时作血培养,注意事项：,为了防止穿刺液的凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液 尽可能采集更多的液体，至少1ml,六、脓液及创伤感染分泌物标本,脓液及创伤感染分泌物标本采集,开放性脓肿和脓性分泌物 先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支无菌棉拭子拭取溃疡深处的分泌物后插入无菌试管送检。一支为涂片检查用，另一支作培养用 大
16、面积烧伤的创面分泌物 用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物，置无菌试管内送检 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入无菌试管内送检,注意事项：,不能立即送检的标本，应放4保存；培养淋球菌、脑膜炎奈瑟菌的标本除外 用药前采集标本，严格无菌采样,七、生殖道标本,生殖道标本检验,生殖道标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养；解脲支原体、沙眼衣原体、淋菌的培养；淋菌涂片；细菌性阴道病相关检测、真菌涂片,生殖道标本送检指征,1 皮肤黏膜损害：原发损害可有斑疹、丘疹、结节、水疱、囊肿、糜烂、溃疡等。继发损害由原发损害演变而来，有萎缩或斑痕等，患者可出现疼痛或瘙痒症状。 2 全身症状：多数无全身症状。偶有发热、乏力、食欲不振等。 3 男性生殖系统表现 4 女性生殖系统表现 5 疑为下列疾病时需送检标本：前庭大腺脓肿、外阴阴道念珠菌病、细菌性阴道病、急性子宫颈炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、产褥期感染。,生殖道标本采集容器,
