动物细胞工程复习课件

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1、读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念,2.1单克隆抗体的概念,单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体,制备原理:将单个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞细胞融合成杂交瘤细胞分泌的,设计方案: 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂种细胞,B-B 、B-瘤 、瘤-瘤 (未融合的B、瘤),(一选)选择性培养基:只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,(二选):选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点:既能产生特异性抗体,又能大量增殖。,2.3单克隆抗体的应用,诊断试剂最广泛应用 准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要

2、的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。,抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点: 产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢?,单克隆抗体!,用于治疗疾病和运载药物特异性强、灵敏度高生物导弹单克隆抗体抗癌药物疗效高、毒副作用小,结合同位素的单抗,-生物导弹,单抗,放射性同位素,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,本节小结,重点,(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的 细胞,从小鼠体内

3、提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_类物质。 (2)d过程是一个_过程,该过程的进行常用_或_的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种类型的C细胞,因此需用_培养基筛选出D细胞用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是_。,效应B,抗原,细胞融合,聚乙二醇 灭活的病毒,选择性,3,既能无限增殖又能产生特异性抗体,杂交瘤细胞,(4)在培养时通过_分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是(要求答5项)_。(5)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特点是_。,特异性强、灵敏度高,有丝,无菌、无毒的环境;充足的营养;适宜的温度和pH;适宜的气体环境,15、(1)单

4、克隆抗体是指 。,(2)制备单克隆抗体的步骤: 将_注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得淋巴细胞,其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。 将步骤获得的B淋巴细胞与步骤培养的骨髓瘤细胞在_的诱导下融合。 将诱导后产生的多种细胞,放在_培养基的多孔培养板上培养,筛选。 这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_的能力,又具有_的本领。 检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞,培养板中每孔放一个细胞进行培养。 将阳性细胞进行增殖,从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。,化学性质单一,特异性强的抗体,抗原,聚乙二醇,选择性,无限增殖,产生专一抗体,(3)大量制备单克隆抗体的方法主要有两种: 体外培养法,可获得10g/

5、mL的抗体;动物体内诱生法可获得520mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。,(4)用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性,因为它是用小鼠的_细胞制备的,其化学本质是_,应用于人体,会作为 产生 ,解决这个问题的方法是_。,大量生产选,小规模生产选,效应B,蛋白质,异物,免疫反应,采用人的效应B细胞制备,15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答: (1)该方案能达到预期效果吗? 。原因是 _。 (2)图中为 过程,常用 作为诱导剂。该细胞继承了_ ,因此不仅能分泌 _,还有 本领。,不能,没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞的遗传物质,特异性抗体,大量增殖,制备单克隆抗体,(3)该方案的目的是_。,阳性孔,方法抗原-抗体杂交法,在单克隆抗体制备过程中,两次筛选的原理和方法是不相同的。,

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