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1、酸性 -醋酸萘酚酯酶染色液（ANAE）预期用途： 供骨髓细胞图片及血液细胞图片染色检查检验原理： 盐酸副品红与亚硝酸钠反应生成六偶氮副品红（重氮盐），底物 -醋酸萘酚在酯酶的作用下水解 -萘酚， -萘酚再与重氮盐偶联，生成棕红色沉淀，定位于细胞浆中，本染色液对酯酶染色无特异性，故又称作非特异性酯酶染色主要组成成分：组成主要成分1,、固定剂（ A 液）甲醛2、偶氮溶液 (B 液) 副品红3、亚硝酸钠溶液(C液) 亚硝酸钠4 磷酸盐缓冲溶液(D 液) 磷酸盐5、-醋酸萘酚溶液（E液）-醋酸萘酚6、甲基绿溶液（F液）甲基绿7、NaF溶液氟化钠储存条件及有效期：有效期：一年储存条件：本试剂盒应储存于2
2、-8低温 环境。样本要求 ：新鲜骨髓细胞涂片及血液细胞涂片（切勿使用抗凝血）检验方法：一、工作液配制（一） 、浸染工作液配制（一份浸染工作量是33ml, 至少可同时放置8-10 张涂片）1、重氮盐溶液的准备：B 液 1ml 与 C 液 1ml 彻底混匀，静置2 分钟；2、染缸（自备染液缸）内加入D 液 40ml ；3、将重氮盐溶液倒入染缸内，混匀4、再加 E 液 1ml 入染缸内，轻轻混匀B 液C 液D 液E 液NaF 液A 染缸1ml 1ml 30ml 1ml - B 染缸（抑制试验）1ml 1ml 30ml 1ml 1ml （二）滴染工作液配制（一份滴染工作液是1.65ml ）使用器材：一
3、次性塑料试管、微量移液器，一次性吸嘴，滴管。操作：于试管内加B 液 50 L，C 液 50 L 混匀，静置1 分钟，再加D 液 1.5ml ，E 液 50l,混匀，静置2 分钟备用（ NaF 抑制试验加NaF 液 1 滴） 。B 液C 液D 液E 液NaF 液A 染缸50 L 50 L 1.5ml 50 L - B 染缸（抑制试验）50 L 50 L 1.5ml 50 L 1 滴二、染色步骤1、 干燥涂片，直接滴加工作液做第二步或滴加A 液（用前恢复室温，并充分摇匀）固定约 30-60秒，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干（涂片不固定直接做ANAE 染色，阳性反应强于固定者） ；2、 滴加或浸入工作液
4、布满涂片（37 ）孵育分钟，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干3、 F 液复染 1-2 分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检参考范围： 1.单核细胞系统：呈阳性反应，其反应可被氟化钠抑制。2.粒细胞系统： 各期粒细胞多呈阴性反应，有时少数粒细胞可呈弱阳性反应，其反应不被氟化钠抑制。3.巨核细胞及血小板为阳性。4.淋巴细胞多呈点状阳性，部分淋巴细胞及浆细胞为阴性反应。5.单核细胞源性的组织细胞、巨噬细胞呈强阳性反应，高雪氏细胞、 海蓝组织细胞为阳性。6.幼红细胞呈阴性反应。检验结果的解释细胞浆内红色或棕红色颗粒为阳性。点样型：主要见于成熟T 淋巴细胞，阳性反应呈棕色或棕红色1-4个圆形、团块、边界清楚的大点状颗粒
5、定位于细胞浆中。弥散型：阳性反应呈棕红色尘粒状、弥散分布，可位于细胞浆的某一局部，边界不清。单核细胞型：阳性反应为均匀棕红色弥漫性遍布整个细胞浆。检验方法的局限性仅限于形态学染色观察使用注意事项1、5Tests 只限滴染使用2、本染色又名酸性非特异性酯酶染色。3、使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂；B,C 液请充分混匀，所用容器必须洁净。4、工作液临用前新鲜配制，应采用新鲜涂片染色。5、每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果6、本品应由专业人士使用及进行结果的判读7、使用前应详细阅读使用说明书及产品包装标识，在有效期内使用，并做好个人卫生防护8、生产批号、效期见外包装9、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物
