泌尿系统感染的微生物学检验

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1、李惠,泌尿系统感染的微生物学检验,上海交通大学医学院,泌尿系统,泌尿系统包括肾脏、输尿管、膀胱和尿道。 肾是泌尿器官，其余为贮尿和排尿器官。 肾脏排泄代谢产物及异物和过剩物质，调节水、电解质的平衡和酸碱平衡，从而维持内环境的相对稳定。 输尿管、膀胱和尿道是排尿器官，分别有输送、贮存和排尿的作用。 尿道是从膀胱通向体外的管道。男性尿道细长，女性尿道粗而短。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染的微生物学检验,泌尿系统感染 泌尿系统感染的临床特征 泌尿系统感染常见微生物 泌尿系统感染微生物学检验,上海交通大学医学院,泌尿系统感染,泌尿系统感染是细菌感染中最常见的类型之一，仅次于呼吸道感染，居第二位。

2、尿路内有微生物停留、繁殖并导致炎症反应发生（阻塞、尿路改造、尿道长度、膀胱输尿管反流） 上尿路感染：肾、输尿管 下尿路感染：膀胱、尿道 泌尿道感染（UTI）是常见的医院感染,上海交通大学医学院,泌尿系统感染的临床特征,一般：尿频、尿急、尿痛等膀胱刺激征，也称尿道刺激征。 单纯膀胱炎引起发热，耻骨上压痛。尿液混浊，有时血尿。 急性肾盂肾炎：以上，高热寒战、腰肋部疼痛，乏力、恶心呕吐，低血压等全身不适。 新生儿尿路感染的症状往往是非特异性的、模糊的，可表现有厌食，呕吐，倦怠，常有高热；2岁以后的尿路感染才会有典型的临床表现；老年患者的尿路感染常缺乏明显的症状，更易造成菌血症和急性肾功能衰竭，应引起

3、重视。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染的临床特征,上尿路感染：发热、肾区不适、膀胱压痛，常与下尿路感染并存 下尿路感染： 膀胱刺激征；尿频、尿急、尿痛。 排尿次数明显增加； 尿意一来就要立即排尿； 排尿时膀胱区及尿道口产生疼痛，为烧灼感或刺痛。,上海交通大学医学院,膀胱刺激征原因,激惹：炎症性刺激，肾盂肾炎、膀胱炎、 肾结石合并感染和泌尿系结核。急性炎症和活动性结核时明显。非炎症性刺激如结石、异物、肿瘤、妊娠压迫等也可引起膀胱刺激征。 膀胱容量减少：占位性病变或膀胱壁炎症浸润、硬化、挛缩。 膀胱神经功能调节失常：尿频可见于精神紧张和癔病，可伴有尿意，但无尿痛。,上海交通大学医学院,泌尿系统感

4、染常见微生物 细菌,G-菌中最常见大肠埃希菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌属。 G+ 菌中常见为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌属。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见微生物,上海交通大学医学院,MICROBIOLOGY,Catheter-associated urinary tract infections are caused by a variety of pathogens, including :- Escherichia coli- MRSA- Klebsiella- Proteus- Enterococcus- Pseudomonas- Enterobacter：VRS

5、A- Serratia- Candida,上海交通大学医学院,细菌,乳酸杆菌、甲型溶血链球菌或厌氧菌等因难以在尿液中生长，当其在尿液中被检出时，一般认为是污染所致。 致病菌95 以上为单一细菌。 90门诊和50住院病原菌大肠埃希菌。 10 一15尿路感染由革兰阳性细菌引起，主要为葡萄球菌属和肠球菌属。,上海交通大学医学院,性病相关：淋病奈瑟菌,尿痛常为发病的早期症状。 尿道口红肿溢脓，1224小时后疼痛略微减轻，排出稀薄的粘液样分泌物 尿频尿急 与一般泌尿系感染类似 会阴部坠胀痛及全身症状：发热（体温38左右），全身倦怠无力、不适，食欲不振，恶心、呕吐。,上海交通大学医学院,性病相关：淋病奈瑟

6、菌,尿道口红肿充血、水肿，有时有小的、浅表性脓肿、糜烂或小溃疡。 第一周症状重，不治疗或治疗不彻底，23周后症状逐渐减轻，尿道分泌物减少，组织肿胀消退，一个月后症状完全消失。 淋菌潜伏于瘢痕组织中缓慢生长，发展为慢性淋病。,上海交通大学医学院,非淋菌性尿道炎,临床上最常见的一种性传播疾病。严重危及人类健康。衣原体和支原体等引起。 症状 尿道刺痒、烧灼感和排尿疼痛，少数有尿频。尿道口微红，晨起尿道口少量粘液性分泌物，症状与淋菌性尿道炎相似，程度较轻。部分患者无症状。,上海交通大学医学院,厌氧菌泌尿系统感染,起病缓慢，发热寒战、烦躁不安、膀胱刺激征 尿道炎、尿道周围炎、尿道周围蜂窝织炎和脓肿、前列

7、腺炎、迁徙性肾脏感染、肾周脓肿、肾盂积脓、腹膜后积脓、肾切除伤口感染、肾移植感染、化脓性血栓性肾静脉炎、膀胱坏疽等。 常伴肾结石、恶性肿瘤、尿路梗阻、肾结核和先天性尿路解剖畸形。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染：结核,泌尿系结核中肾结核是最为常见、最先发生，以后蔓延至整个泌尿系统。结核从肾脏而影响膀胱，造成膀胱结核时，有一系列症状出现： 膀胱刺激症 血尿 脓尿 腰痛 及全身症状 并发膀胱挛缩、膀胱破裂,上海交通大学医学院,病毒、真菌,麻疹、腮腺炎病毒以及柯萨奇病毒可引起尿路感染，少见，临床多无症状，腺病毒2型感染导致学龄期儿童发生急性出血性膀胱炎；巨细胞病毒偶可引起下尿路感染。 真菌感染(主

8、要为假丝酵母属)多发生于留置导尿、糖尿病、使用广谱抗生素或免疫抑制剂的患者。,上海交通大学医学院,一般特征,下尿路感染患者外周血白细胞通常在正常范围，而尿中红细胞增多，可伴镜下血尿。 尿液涂片染色及尿培养常可发现相应致病微生物。 上尿路感染的病人的尿检结果常提示大量白细胞尿，甚至脓尿。中段尿培养甚至血液细菌培养常常发现致病微生物生长。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染实验室检查 尿常规,上海交通大学医学院,尿沉渣,显微镜对离心后尿液的沉渣物（尿中有形成分）进行检查，尿液干化学分析仪不能替代。对泌尿系统疾病诊断十分重要。有时是无症状情况下的唯一的实验室取证。,上海交通大学医学院,肾功能检查,尿素

9、氮、肌酐、尿酸测定 不是直接诊断指标，但对患者处理有非常重要的参考价值，故必须常规进行。,上海交通大学医学院,微生物学检查,采集指征：（1）有典型的尿路感染症状；(2）肉眼脓尿或血尿；（3）不明原因的发热，无其他局部症状；（4）留置导尿管的患者出现发热；（5）膀胱排空功能受损；(6）泌尿系统疾病手术前。,上海交通大学医学院,样本采集 中段尿,新鲜晨尿：夜间饮水少，尿液浓缩，提高检出率，其他随机留取的尿液也可。 中段尿：尿液分为前段、中段、后段。因前段尿和后段尿容易被污染，因此一般都留取中段尿。尿常规检查时，尿液不少于10毫升。 清洁干燥的容器 尽快送实验室检查,上海交通大学医学院,导尿管,较好

10、的无菌采集法。 1危重病人每小时尿量、尿比重。 2盆腔手术排空膀胱。 3手术后留置导尿管，便于引流和冲洗。 4尿失禁或会阴部伤口的病人引流尿液，保持会阴部的清洁干燥。 5为尿失禁病人行膀胱功能训练。,上海交通大学医学院,肾盂尿,确定是否来自肾脏。冲洗膀胱，末次冲洗尿作对照。 导尿管插入输尿管，标记左右侧，各收集三次尿； 输尿管比对照尿菌数多或第三次尿比第一次多，该菌尿可能来自肾脏；反之，如果第一次尿多于第三次尿菌，可能来自膀胱。,上海交通大学医学院,膀胱穿刺,膀胱穿刺尿采集法：将病人耻骨上皮肤经碘酒、酒精消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。 用于尿液中厌氧菌的培养，故在取得尿液后，针头插于橡皮塞上送

11、检。 儿童或婴儿采集中段尿困难或培养结果与患者病情矛盾，可考虑用此法采集尿液。,上海交通大学医学院,集尿,24h 的尿液，取沉淀于清洁瓶内送检。 污染杂菌，无菌操作。 立即送检，病原菌增殖影响细菌计数的正确性。 不加防腐剂，否则影响检出的阳性率。,上海交通大学医学院,注意事项,严格无菌操作。 用药前采集标本，不加防腐剂或消毒剂。 晨起第一次尿液送检 立即送检，否则导致感染菌和过度生长。 临时存放4冰箱不得超过2h。 淋病奈瑟菌应首选床边接种，否则保温送检，不能存放于冰箱内，以免影响检出。,上海交通大学医学院,直接镜检,一般细菌：Gram染色 淋病奈瑟菌 假丝酵母菌 抗酸杆菌,上海交通大学医学院

12、,分离培养鉴定,一般细菌培养：涂布法、倾注法 淋病奈瑟菌 假丝酵母菌 结核分枝杆菌 厌氧菌 支原体 L型,上海交通大学医学院,定量,膀胱穿刺取尿作定性，只要培养出细菌，不论细菌数多少，均认为是感染，不会出现假阳性。是避免尿培养污染的最好方法。缺点是患者有一定痛苦。 尿液细菌培养：尿道口周围亦有大量细菌。表皮葡萄球菌、链球菌、枯草杆菌、变形杆菌、大肠埃希菌、乳酸杆菌、卡他布兰汉菌及耻垢分枝杆菌等。细菌常混入尿中，但细菌数小于103/毫升。,上海交通大学医学院,定量 清洁中段尿涂布法,目的是运用中段尿培养菌落计数的方法鉴别是否为尿路感染。 常用定量接种环法，取1l 10l的新鲜中段尿，均匀涂划在血

13、液琼脂平板上，37，24小时孵育，整个平板上所见的菌落数乘以1000即得每毫升菌落数。 计数生长的菌落数，生长过多不可计数时，报告105cfu/ml即可。根据菌落形状及涂片镜检特征，选择相应方法进一步鉴定。48h无细菌生长方可报告“无细菌生长”。,上海交通大学医学院,倾注法,液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为10倍系列稀释，参考下图： 随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。,上海交通大学医学院,倾注法,合适稀释度的菌悬液与灭完菌冷却到50-55C的培养基混合均匀，倒入无菌培养皿，冷却形成平板后，培养。 操作较麻烦。热敏感微生物的影响明显；影响严格好氧微生

14、物的生长；表面菌落与培养基内菌落形态影响菌落形态的判别。 分散均匀，计数准确。,上海交通大学医学院,细菌学标准,革兰阴性杆菌落计数105cfu/ml或革兰阳性球菌菌落计数104 cfu /ml，应同时报告鉴定结果及药敏试验结果。 菌落计数低于此标准，并不能完全排除尿路感染。这多见于以下几种情况：1.应用抗菌药物；2.采尿时消毒剂混入尿中3.尿频，细菌停留时间短；4.大量输液或使用利尿剂使尿液稀释；5.尿液PH。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见细菌,大肠埃希菌,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见细菌,铜绿假单胞菌,上海交通大学医学院,铜绿假单胞菌,细长革兰阴性杆菌， 极单鞭毛，严格需氧，

15、氧化利用葡萄糖 蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素 血平板上形成大而扁平，湿润，边缘不齐，有金属光泽，有生姜气味的灰绿色菌落，并形成透明溶血环 最适生长温度35，4不生长，42生长,MAC,上海交通大学医学院,O/F试验（氧化型）,硝酸盐还原试验（）,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见细菌,肺炎克雷伯菌,荚膜染色,上海交通大学医学院,肺炎克雷伯菌粘丝试验,上海交通大学医学院,肺炎克雷伯菌KIA（A A- ）、MIU（）,肺炎克雷伯菌IMViC试验（）,上海交通大学医学院,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见细菌,鲍曼不动杆菌,上海交通大学医学院,鲍曼不动杆菌,严格需氧、无动力、氧化酶阴性、硝酸

16、盐还原阴性的革兰染色阴性球杆菌。 似双球菌，不易脱色，易误认阳性菌； 血平板培养24小时后，菌落半透明到不透明，凸起，边缘整齐，无色素形成； 大多数菌株麦康凯平板上生长良好，呈无色或淡粉红色,上海交通大学医学院,变形杆菌,革兰染色阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两端钝圆的小杆菌。 0.40.61.03.0微米。兼性厌氧。 普通固体培养基上迁徙生长。自然界中存在极广，健康人和动物的肠道中，条件致病菌。,变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板）,变形杆菌菌落特征（MAC）,上海交通大学医学院,变形杆菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +）,变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（）,上海交通大学医学院,根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为KA+，IMViC为-/+-，可鉴定为变形杆菌。,上海交通大学医学院,泌尿系统感染常见细菌,肠球菌、链球菌、葡萄球菌,上海交通大学医学院,肠球菌,肠球菌：营养要求低，正常寄居皮肤、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，引起的感染有尿路感染、心内膜炎等，罹患者多为老年人、女性、体弱或肿瘤患者。 粪肠球菌所致感染中最为常见的，绝大部分为院内感染。,