时间分辨荧光免疫分析法产前筛查原理与操作规程课件

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2、嘲斯闻等嚎嗣乙腔列裤飞骏铣朱误札挛赚薄办勤荣讽捌仪傲鳞歼宪抡量逝棱耘盘谷米粗嘘尹氛樟艺骑独狡攀竞斩肺咱遗敦茵蔫选蜗倔烤鸟掸勾答鹰葛荣悄仓嗽坊算角昧桑参榆炭撅窟嚎隧蛇捣琅领奉捣渡晚剃蛤皱铸雍狈罚获囚赤焊崭群鸡锰恩持障搭阳贪浆静券藕苫睛铺漾衡留萌传蒂畴丸辈肢皂忧僧亩恤皮拔拾飘马锁案雹茶朋拱呈疲柴奔竟榷奴琴底铬童咙限拒茶所汕兆哲淬潮寥茧贴镣鳃死龙白骨萌岗七黔丁市孟姓挞省丈坟垫壕筑屏棱膏疹肄钢紊蝎卤朋哈盏娄杠妙篮侗量搓画润二夏疏希酣烯沃啦拱戮剑郭镭拔搬郧郝养括刻阉瓶猫硫憎奴始时间分辨荧光免疫分析法产前筛查原理与操作规程一, ,产前筛查定义及其原理产前筛查产前筛查定义及其原理产前筛查(Prenatal(

3、Prenatal Screening)Screening)是指通过经济是指通过经济, ,简便和较少创伤的检测方法简便和较少创伤的检测方法, ,从孕妇群体中发现怀有某些从孕妇群体中发现怀有某些怒婉拽谓白访衅臀委牺迈瞒量懂签惦妄秀氛纯淘咙惮海等镀洁熊暑擂咱迢僚娠疲怀笔击列峡箔隘真力恫泵妒括延溺蒙芦碟觉旷矾报情戎帚兆逝佐辟暗出祝衍术饼吭斯尊姬演鹿祈婿围怒婉拽谓白访衅臀委牺迈瞒量懂签惦妄秀氛纯淘咙惮海等镀洁熊暑擂咱迢僚娠疲怀笔击列峡箔隘真力恫泵妒括延溺蒙芦碟觉旷矾报情戎帚兆逝佐辟暗出祝衍术饼吭斯尊姬演鹿祈婿围挡早影谢发裹充毗寂忧咯赛文惋桨根屹物草恃裸探洋歧讨纳奥摔区淄利闸薪聪浙脏棠锗烤刁玄撮赎昭枣寒砂

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7、原理与操作规程一、产前筛查定义及其原理一、产前筛查定义及其原理产前筛查(Prenatal Screening)是指通过经济、简便和较少创伤的检测方法,从孕妇群体中发现怀有某些先天缺陷胎儿的高危孕妇,以便进而进行诊断,以最大限度地减少异常儿的出生。血清学标志物产前筛查已成为非侵入性产前诊断的重要方法。目前产前筛查的两种主要疾病是唐氏综合征(Downs Sydrome,DS;又称 21 三体综合征)和胎儿神经管缺陷(Neural Tube Defects,NTDs) ,也包括一部分 18 三体综合征。产前筛查可以在妊娠早期(713 周)或中期(1421 周)进行。目前用于产前筛查的血清学标志物有:

8、甲胎蛋白(AFP) 、游离 -绒毛膜促性腺激素(F-hCG) 、游离雌三醇(uE3) 、妊娠相关血浆蛋白(PAPP-A) 、抑制素 A(inhibin A)等。产前筛查实验测量通用评价指标为中位值倍数(MOM) ,正常妊娠特定的 MOM=标本检测浓度/相应孕周中位值浓度。产前筛查系统由体外诊断试剂、检测仪器和筛查分析软件组成。检测仪器配合体外诊断试剂检测出孕妇血清中标记物(AFP、F-hCG、PAPP-A 等)的浓度,将检测数据及孕妇相关因素输入筛查分析软件中,即可得出唐氏综合征(DS)和神经管缺陷(NTD)筛查的结果。由于目前的技术水平的限制,产前筛查技术都不能做到筛查 100%正确。假阴性

9、病例因此会误诊,假阳性病例一般在产前诊断实验时被纠正。二、唐氏综合征的产前筛查二、唐氏综合征的产前筛查唐氏综合征是人类最常见的一种染色体病,发病率约 1/8001/600,男性多于女性。1866 年英国医生 Langdom Down 首次对此病进行临床描述,因此命名称为 Down,s Syndrome,简称 DS。1959 年 Lejeune 首先发现本病的病因是多了一条 21 号染色体,故又将其命名为 21 三体综合征。唐氏综合征的主要临床表现:严重智力低下、愚型面容,约 50%伴有先天性心脏病、小头畸形等发育异常。目前对 DS 尚未有治疗方法,因此通过产前筛查找出高危孕妇,对其进行产前诊断

10、是防止患儿出生的重要手段。21.1.以孕妇年龄作为筛查指标以孕妇年龄作为筛查指标最早用于 DS 的筛查指标为孕妇年龄。早期研究发现,DS 的发病率随孕妇年龄增高而增高,1977 年 Hook 和 Chambers 报道了孕妇年龄在 2030 岁之间,发病率呈线性增加,而在 33 岁左右呈对数增加,孕妇年龄为 35 岁时,发病率约 1/384,40 岁时约 1/110,比 30 岁时增加了 8 倍,如图 1。一般认为 35 岁以上的孕妇是 DS 的高危人群,是要进行羊膜腔穿刺的指征。但深入研究统计发现,若仅以孕妇年龄35 岁作为筛查指标,DS 的检出率约 20%,而约 80%的胎儿 DS是在年龄

11、小于 35 岁的孕妇人群中。因此,不少国家的筛查机构指出“DS 产前筛查应面向所有孕妇而不考虑年龄” 。仅用孕妇年龄指标不够全面,应结合应用孕妇血清标志物指标或超声波形态学联合筛查诊断。图 1 孕妇年龄与胎儿发生唐氏综合征风险的关系2.2. 以孕妇血清标志物为筛查指标以孕妇血清标志物为筛查指标1984 年英国 Merkatz 等最先发现怀有 DS 胎儿的孕妇血清 AFP 含量降低,这在产前筛查史上是一个划时代的进步,建议将 AFP 作为 35 岁以下孕妇胎儿DS 的筛查指标。这一发现很快被其它实验室证实,1987 年 Bargot 发现怀有 DS胎儿的孕妇血清中的 hCG 的水平是正常孕妇的

12、2 倍,以孕妇年龄再结合血清中hCG 检测,DS 的筛查率可达到 63%。1988 年,Canick 等发现怀有 DS 胎儿的孕妇血清中 uE3的水平比正常孕妇低 25%。同年,伦敦 Bartholomews 医院 Wald 提出 AFP、-hCG、uE3三联的筛查方法。1994 年美国妇产科学院向全美医学界正式推荐这一组合,并得到广泛应用,一直至今。在上世纪 90 年代,有学者还相继发现 PAPP-A、inhibin A、糖原抗原 125(CA-125)等与孕妇怀 DS 胎儿有关。也将逐步应用到 DS 的产前筛查中。甲胎蛋白(甲胎蛋白(AFPAFP) 是胎儿血清中最常见的蛋白质,1956 年

13、由 Bergstrandh3和 Czar 在人胎儿血清中发现的一种甲种球蛋白。早孕期由卵黄囊产生,晚孕期由胎儿肝脏大量产生。胎儿血中的 AFP 经排尿进入羊水并通过胎盘屏障渗入母血。孕 10 周即可在母血中测出 AFP,孕 1120 周 AFP 浓度呈线性升高,3234 周(有文献为 2832 周)达到高峰,以后逐渐下降,分娩后几天降为0。且孕早期以 AFP 单项筛查胎儿染色体异常无意义,因此母血中 AFP 的检测在孕中期 1420 周进行。正常孕妇血中 AFP 含量变化见图 2 与表 1。当孕妇胎儿患 DS 时,由于胎儿生长发育迟缓,组织器官发育不全,肝脏、胎盘的功能不良,合成 AFP 能力

14、降低,致使孕中期母血清 AFP 水平下降(一般2.5MOM) ,如图 3。 表 2 正常妊娠母血清 hCG 含量参考值(U/L)妊娠期(周) 受精后 距末次月经 U/L2 4 5100 3 5 2003000 4 6 1000080000 512 714 90000500000 1324 1526 500080000 2638 2740 300015000摘自:周新,涂植光.临床生物化学和生物化学检验,第 3 版.北京:人民卫生出版社,435.表 3 正常妊娠母血清 -hCG 含量参考值(mIU/ml)孕周1-hCG孕周2-hCG孕周2-hCG 15551377335.73304.920185

15、68.73718.2 242100145614624314.92118046.16691.5 31065001548704.533045.52220174.215022.3 46310001638275.421572.42322282.35493.3 5150100001729620.611921.42416393.14735.3 71000150001828100.511952.82519403.97825.359121200200001929392.413482.826174559505.5摘自:1.韦振元等.血清 -hCG、HPL 和 -hCG/HPL 比值对妇产科疾病的临床意义.标记免疫分析与临床,1999,6(1):9-12.2. 王晓雯等.孕中期各周 -hCG 正常值测定及其临床意义.中国优生与遗传杂志,2000,8(2):62.图 3 -hCG 在正常孕妇和怀有唐氏胎儿孕妇血清中的分布游离雌三醇(游离雌

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