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1、血液分析仪培训 1、血液基础知识 2、检测项目介绍 3、仪器操作 4、检测原理 5、结构组成 6、液路 7、维护和常见故障处理 8、调试,血液基础知识 血液的组成 白细胞的形态及功能 红细胞的形态及功能 血色素的形态及功能 血小板的形态及功能,做血常规的意义 血液不断流动于循环系统之中,与机体的所有部分均发生联系。参与机体的功能活动,维持正常的新陈代谢和内、外环境的平衡。 在病理情况下造血系统的各种疾患常影响全身组织器官。反之,各组织和器官的病变也可直接或间接引起血液发生相应的病理变化。 因此,血液的检验不仅是诊断各种血液病的主要依据,而且对其他系统疾病的诊断和鉴别也可提供许多重要信息,是临床
2、医学检验中最常用、最重要的基本内容之一。,什么时候需做血常规 许多病人在病因不明时都要做血常规检查,一些已经明确诊断或治疗过程中的患者也需要经常做血常规检查,这是观察治疗效果、用药或停药、继续治疗或停止治疗、疾病复发或痊愈的常用指标。需要特别提到的是,在化疗、放疗及血液病等特殊病人中,血常规检查是个非常重要的和经常需要检测的观察指标。,人体血液的特点和功能,血液的特点 人体血液是由血细胞和血浆两部分组成的红色粘调混悬液。pH值为7.357.45。相对密度(比重)为1.051.060,相对粘度为45。正常成人血量约占体重的8,平均血量5L左右。,血液的功能 通过循环系统与全身各个组织器官密切联系
3、。 参与机体呼吸:携氧和排出二氧化碳。 运输:将营养物质运送到器官组织,将体内代谢废物运往肾、肺 等器官排出体外。 防御:血液中白细胞和抗体参与机体抗感染和其他免疫反应。 调节:调节体液渗透压、酸碱平衡和体温平衡,人体血液的组成,血液,血 浆,血 细 胞,红细胞 白细胞 血小板,水:9092,血浆蛋白,溶质: 810,小分子物质,营养物质 激素 代谢产物,有机物,无机盐(电解质),白蛋白 球蛋白 纤维蛋白原,白细胞的作用 白细胞的数目较少,不足红细胞的六百分之一,但白细胞是机体的“卫士”,它能吞噬和清除侵入体内的微生物,细菌被吞噬以后,白细胞释放出多种物质(如自由基、蛋白消化酶等)可以把它消灭
4、。白细胞也是机体的“清道夫”,它能清除体内已经破坏的组织细胞。 白细胞功能:保护肌体免受外来侵略(感染),白细胞形态,白细胞的组成 粒细胞(75%):中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、 嗜碱性粒细胞 单核细胞(5%) 淋巴细胞(25%),三分类的定义 机器的三分类是指对白细胞中的细胞细分成:淋巴细胞、中间细胞(嗜酸、单核、嗜碱)、中性粒细胞。淋巴细胞(25%) 单核细胞(5%) 粒细胞(75%),溶血素的作用,溶血剂对不同类别白细胞质膜产生不同反应: 淋巴胞质膜内的水溶性胞质释出,膜缩水后包饶细胞核 单核立即产生反应 粒细胞只产生有限的反应,溶血素对红细胞进行破坏,释放出血红蛋白 *机器测量到的细胞体
5、积不是细胞的生理体积*,红细胞的作用 红细胞的主要功能有二个,一是运输氧和二氧化碳;二是维持血液的酸碱度 红细胞的功能主要是由血红蛋白来完成的。血液呈现红色,也正是因为红细胞里含有血红蛋白的缘故。,红细胞形态,血红蛋白测试原理 血液中加入溶血剂,溶血剂会迅速溶解红细胞膜、破坏红细胞壁释放血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合生成稳定的类氰化高铁血红蛋白,该类氰化高铁血红蛋白在540nm处有一吸收峰,测定其吸光度,通过与空白吸光度的比值,可计算出血红蛋白浓度。,血小板的作用 血小板的作用是参与止血和凝血在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其完整性
6、当血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用。,血小板形态,白细胞的生理变化 正常人一般是早低下午高,静息时低,饭后和活动时高,日差可以相差一倍,初生儿比较高达:15-30*10 9个/L,3-4个月后降至:10*10 9个/L 病理变化: 增高:急性大出血,急性中毒,粒细胞白血病 减少:自身免疫性疾病 WBC分类异常 中性粒细胞增加:手术后,中毒或是急性溶血 中性粒细胞减少:过敏性休克 淋巴细胞增加:百日咳,水痘,淋巴细胞性白血病 淋巴细胞减少:免疫性缺陷病 单核细胞增加:伤寒,黑热病 单核细胞减少:无临床意义 嗜酸性粒细胞增加:寄生虫 嗜酸性粒细胞减少:伤寒
7、 嗜碱性粒细胞增加:恶性肿瘤,败血病及大面积烧伤,红细胞生理变化 正常人 男:4.5-5.5*10 12个/L 女:3.5-5.4*10 12个/L 新生儿:6-7 *10 12个/L 红细胞增加:新生儿,精神因素的影响 红细胞减少:妊娠中,后期下降 红细胞的病理变化: 相对增高:严重腹泻,大量出汗 绝对增高:与组织缺氧有关 减少:各种贫血和失血 血小板 正常人100-300*10 9 个/L 减少 低于100*10 9个/L 造血功能受到损害 增加 高于300*10 9个/L 无临床意义,检测项目介绍,基本参数,由直方图得出的参数,由计算得出的参数,线性范围,重复性指标,Mean:平均值 C
8、V=Diff/Mean*100% Diff:标准差 CV:变异系数,临床操作 仪器外部界面介绍 静脉血模式操作方法 末梢血模式操作方法 预稀释模式操作方法,开机本底测试 PE-6800开机后,首先对仪器进行本底测试(空白测试),本底测试参数要求如下:,静脉血模式操作步骤 1、采血 使用真空负压管或在常压下采用普通采集办法,须在静脉采血容积中加入抗凝剂。推荐使用EDTA-K2抗凝剂,不能使用肝素抗凝剂,抗凝效果不好 2、血样混匀 血液样本在测试前必须进行充分摇匀,建议方法:上下颠倒、转动试管3-5分钟。保障测量的正确性。 3、血液样本计数、分析 3.1输入病人信息 3.2将样本置于采样针下,按开
9、始(start)键,仪器前面板的指示灯开始闪烁,仪器吸取样本,等到指示灯停止闪烁后才能将样品杯移开。 3.3仪器开始分析样本,请等待分析结果。 4、打印报告单,静脉血模式注意事项 推荐用EDTA.K2抗凝剂,含量规定为1.5 -2.2 mg/ml血。EDTA.K2是一种比较理想的抗凝剂,它能保持红细胞与白细胞在分类检测与计数时的形态稳定。,末梢血模式操作步骤 1、采血 1.1采血部位 成人以左手中指或无名指的内侧为宜,半岁以上的儿童以中指为好,半岁以下的婴幼儿通常自拇指或足的底部外侧采血。 1.2采血方法 1.2.1轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇消毒局部皮肤,待其干燥。 1.2.
10、2紧捏穿刺部位,用无菌采血针穿刺,取血动作应迅速,深度约2-3mm,以稍加挤压血液能流出为宜。 1.2.3用干棉球擦去第一滴血后,开始采血。将血注入加有抗凝剂的容器内。 1.2.4采血完毕,用干棉球压住伤口片刻。,2、血样混匀 3、血液样本计数、分析 3.1输入病人信息 3.2将样本置于采样针下,按开始(start)键,仪器前面板的指示灯开始闪烁,仪器吸取样本,等到指示灯停止闪烁后才能将样品杯移开。 3.3仪器开始分析样本,请等待分析结果。 4、打印报告单,末梢血模式注意事项 采血时,若血流不畅,可在穿刺部位的远端稍加压力,切记在穿刺的周围用力。避免组织液混入血液,造成测试分析结果不准确。,预
11、稀释模式操作步骤 1、定量加入稀释液 右键加稀释液将干净的样品杯斜放在采样针下,按开始(start)键。 2、采血 使用20L定量采血管采取20L的末梢血。采血部位和方法参考末梢血模式。 3、血液样本计数、分析 3.1输入病人信息 3.2将样本置于采样针下,按开始(start)键,仪器前面板的指示灯开始闪烁,仪器吸取样本,等到指示灯停止闪烁后才能将样品杯移开。 3.3仪器开始分析样本,请等待分析结果。 4、打印报告单,血细胞分析仪的基本原理,白细胞、红细胞、血小板的计数原理 库尔特计数原理 概述:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释液的电阻值;当血细胞通过检测器(tr
12、ansducer)(又称换能器或脉冲信号发生器)小孔管微孔的孔径感受区时,检测器内外之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号。脉冲信号数就等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比。电阻抗型BCA以此进行WBC、RBC、PLT计数。,COULTER原理的局限性 粒子的形状和通过计数小孔时的姿态对测量到的阻抗有影响,使其不能准确地反映被测粒子的实际体积。如两个同体积的粒子,一个是球形,一个是长椭球形,由于球形粒子的横截面积大于长椭球形粒子的横截面积,所以球形粒子测得的体积将明显大于长椭球形粒子的体积。 只能测量粒子的体积,不能测量粒子内部的成分。只能将白细胞按体积大小分
13、为三个亚群,且分析精度差,易受多种因素的干扰。,脉冲的放大、阈值调节、甑别和整形、计数 1放大 由于血细胞通过微孔时产生的脉冲信号非常微弱,不能直接触发计数电路因此必须通过放大器,将微伏信号放大为伏级脉冲讯号。 2阈值调节 在一定范围内调节参考电压的大小,使计数结果尽可能符合实际。 3甄别 通过微孔时各种微粒均可产生相应脉冲信号,信号电平(脉冲幅度)与微粒大小成正比。因此除血细胞外,血细胞碎片、稀释液中杂质微粒均可产生假脉冲,使计数结果偏高。所谓甄别,就是利用甄别器根据阈值调节器提供的参考电压,将低于参考电压的假脉冲去掉,以提高细胞计数的准确性 4整形 经放大和甄别后的细胞脉冲信号波形尚不一致
14、,必须经过整形器调整为形状一致标准的平顶波后,才能触发电路 5计数 血细胞的脉冲信号经过放大、甄别、整形后,送入计数系统。各型血细胞分析仪计数系统通过计算得出计数结果,血红蛋白的检测原理 血液中加入溶血剂,溶血剂会迅速溶解红细胞膜、破坏红细胞壁释放血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合生成稳定的类氰化高铁血红蛋白,该类氰化高铁血红蛋白在540nm处有一吸收峰,测定其吸光度,通过与空白吸光度的比值,可计算出血红蛋白浓度。,HGB计算公式 利用朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律 HGB=常数Log10 HGB(空白透过光强/样本透过光强),结构组成,基本结构 1、显示屏部分 2、记录仪部分 3、变
15、压器部分 4、开关电源部分 5、样品杯部分 6、稀释部分 7、真空负压部分 8、加样机构部分 9、电磁阀部分 10、电缆转接板部分 11、CPU主板部分 12、CCU主板部分,显示屏,参数 显示屏尺寸:8.4 分 辨 率:640*480 输入电压 :+5,记录仪,记录仪功能 记录仪组件主要功能是通过接口接收系统发出的打印数据、处理数据、然后发送到热敏打印头,同时,记录仪板驱动马达,进/出纸,打印出接收到的数据,变压器,参数 输入:220V 输出:110V 30W,开关电源,样品杯,加样机构,稀释单元 稀释器组件 稀释器机构,稀释器组件,稀释器机构,真空室单元 真空室组件 真空室机构,真空室组件,真空室机构,电磁阀部分,电缆转接板,电缆转接板的功能,电缆转接板的主要功能是将各模块与CCU板转接在一起,同时可以通过调节电缆转接板上的可调电位器来调节液体传感器的灵敏度,CPU板,CPU的功能,工控板以CPU为核心,包括其他的一些外围设备,如动态存储器、静态存储器,同时提供一些接口,如COM1接口、COM2接口、USB接口、鼠标接口、键盘接口、显示屏TFT电缆接口、VGA(外接显示器)接口、DOM卡接口、LPT打印机接口CPU、动态存储器和静态存储器组成基本的计算机系统,也是软件运行的基本环境。,