《紫杉醇溶解度的改变方法总结》由会员分享，可在线阅读，更多相关《紫杉醇溶解度的改变方法总结（42页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、改善紫杉醇药效问题方法 -TPGS,内容,简要回顾,紫杉醇水溶性差,药物输送 体系,可生物降解聚合物纳米,剂型总结,纳米 水凝胶,前药,前药,前药,基于大分子型前药,刺激响应型前药,靶向型前药,穿过药物屏障型前药,联合用药型前药,可解决PTX低溶解、低渗透、口服吸收差、不稳定、无靶向等问题 通过化学键相连，重复性好、质量可控、大分子前药可实现自组装,血脑屏障 口服胃肠道吸收屏障,联合或多功能前药,温敏 PH敏感 光敏,透过屏障型前药,刺激响应型前药,聚乙二醇-嵌段-聚天冬氨酸-酰肼 N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物超支化聚醚酯聚乙二醇肝素,基于大分子型前药,靶向型前药,联合用药型前药,多糖
2、 肿瘤特异性抗原 过度表达的受体 腺病毒,聚合胶束,聚合胶束,超分子 核-壳结构纳米颗粒,-生育酚琥珀酸 疏水改性壳聚糖PTX胶束（cs-tos）,PTX-脱氧胆酸-N,O- 羟乙基壳聚糖胶束（DHC）,未来，多功能胶束有望解决肿瘤耐药性，降低副作用,mPEGPLA-PTX,脂质体,脂质体,Lipusu 第一个紫杉醇脂质体注射液,LEP-ETU 由1,2 -二油酰锡-丙三基-3-胆碱磷酸(DOPC) 和胆固醇、双磷脂酰甘油摩尔比比例：90:5:5,EndoTAG-1 1,2 -二油酰-三甲基铵(DOTAP), DOPC and PTX 摩尔比 :50:47:3,聚电解质包覆脂质体组成的PTX
3、阴离子聚丙烯酸涂布PTX-阳离子脂质体,固体脂质纳米粒,固体脂质纳米粒（SLN）的研究起始于20世纪90年代，其是新型的亚微粒胶体给药系统，是一种以室温下为固态的天然的或合成的脂质或类脂。1 、提高对水溶性抗癌药物的包封率 2 、改进药物的控释速率和释放程度 3 、避免SLN被网状内皮系统清除 如：羟丙基-环糊精紫杉醇固体脂质纳米粒泊洛沙姆F68F68 - SLN,纳米水凝胶,水凝胶系统是一种常用局部给药系统，广泛用于局部抗肿瘤药物，局部药物浓度高，降低治疗带来的全身性副作用如：热敏-CLA-耦合泊洛沙姆水凝胶,树枝状大分子,树状大分子作为药物载体具有大容量的有效载荷，可结合不同的靶向，成像或
4、小颗粒尺寸（直径2-10 nm）具有治疗作用的成分，成为多功能的输送体系，通过EPR效应促进药物在实体肿瘤部位的积累。,胶束洗脱支架（DES),治疗部位：血管（动脉粥样硬化）,治疗手段：植入药物，抑制血管再狭窄,存在的问题：血管病变部位药物浓度低,解决途径：DES 紫杉醇可抑制平滑肌细胞的迁移和增殖,PEC /紫杉醇支架具有 缓释作用，较好的生物 相容性,TPGS-乳化PLGA-PTX NPs,有望成为第三代血管支架,生物降解聚合物纳米粒子,生物降解聚 合物纳米粒子,聚乙二醇D-生育酚琥珀酸酯 (TPGS)乳化聚 D，L-乳酸-共-乙醇酸（PLGA) 包合物,TPGS-b-PCL-ran-PG
5、A 两分子嵌段共聚物纳米载体,聚乙二醇D-生育酚琥珀酸酯(TPGS),TPGS同时具有亲脂性的生育酚基团和亲水性的聚乙二醇长链极性基团，两亲性质和较大的分子表面积，使其成为出色的非离子表面活性剂。TPGS可以抑制P-糖蛋白的外排作用，提高受体P-糖蛋白的阻滞的药物的利用度并能克服肿瘤细胞的多药耐药性。,应用,1、聚合物纳米粒与聚合物单体共聚生成新聚合物，如聚乳酸连接靶向基团，如叶酸 2、聚合物胶束 3、纳米脂质体,文献讲解-乙二醇1000D-生育酚聚琥珀酸酯-三苯基膦聚合物(TPGS1000-TPP),The anticancer efficacy of paclitaxel liposome
6、s modified with mitochondrial targeting conjugate in resistant lung cancer Biomaterials 34 (2013) 3626-3638 2012:7.604,期刊名：biomaterials出版周期: 半月刊 偏重的研究方向：生物材料、组织工程、药剂学、抗肿瘤、靶向、心血管植入器械、 纳米材料、再生医学、生物化学与分子生物学等审稿速度：平均1.07个月的审稿周期中科院杂志分区材料科学：生物材料分类下的 1 区期刊,Abstract,针对耐药性肺癌化疗，此项研究中合成聚乙二醇D-生育酚1000琥珀酸酯-三苯基膦聚合物
7、(TPGS1000-TPP)作为线粒体靶向分子，包裹在紫杉醇脂质体的表面，治疗耐药性的肺癌。使用人A549 细胞-A549/cDDP耐药肺癌细移植瘤小鼠模型。TPGS1000-TPP 合成率为50%，粒径约80nm。相对于紫杉醇和常规紫杉醇脂质体，靶向紫杉醇脂质体的体内体外的治疗效率最高。靶向紫杉醇脂质体可以促进细胞对药物的吸收，选择性的积累在线粒体中，引起细胞色素C的释放，靶向传递引发半胱天冬酶9和3的瀑布式反应。激活促凋亡蛋白和Bid蛋白，抑制抗凋亡Bcl-2蛋白的活性，因此通过作用在线粒体通路加强细胞的凋亡。总体来看，靶向紫杉醇脂质体有治疗耐药性肺癌的潜力,Introduction,Re
8、sults and discussion,Anticancer efficacy in theresistant lung cancer xenografts,Synthesis of TPGS1000-TPP,Preparation of targetingpaclitaxel liposomes,Cytotoxicity and apoptosis- inducing effect,Cellular uptake and mitochondrial targeting,Apoptosis signaling pathways,肿瘤体积和小鼠体重变化,细胞色素C释放、半胱天冬酶活性 Bcl-
9、2家族蛋白的表达,药物吸收和胞内分布,细胞毒性和诱导凋亡活性,粒径、形状、Zeta电势 药物释放效率,MS、1HNMR检测合成率,1、Synthesis of TPGS1000-TPP,MS检测,TPGS1000+Na,TPGS1000+K,MS检测,TPGS1000-TPP,1HNMR检测,合成效率达50%,2、Preparation of targeting paclitaxel liposomes,靶向制剂的特性：粒径小（约80nm），包封率高（85%)靶向药物带正电，可能是由于带正电的材料，TPGS1000-TPP特别是TPP，这个有利于将带负电的线粒体作为靶标。,TEM和AFM成像确
10、认了载药脂质体的存在。使用激光粒径分析脂质体的大小为80-100nm，紫杉醇脂质体的双层膜清晰可见，靶向制剂的膜的界限不清晰，可能是由于脂质体的表面修饰,靶向药物在最初的2h释放延迟可能有利于避免在传递过程中药物的泄漏，增加进入肿瘤部位的量。,3、Cytotoxicity and apoptosis-inducing effect,在毒性试验中，靶向药物对两种细胞的抑制作用最强，泰素在顺式伯胺耐药性的细胞中细胞毒性减小，说明有交叉耐药性。,细胞凋亡实验，靶向制剂作用最强，两种细胞对不同制剂的应答相似或略微不同，在耐药细胞中较高的凋亡率是由于较高的凋亡基线，在非耐药性细胞中凋亡率低是由于低的凋亡
11、基线。靶向制剂增强紫杉醇凋亡作用。,4、Cellular uptake and mitochondrial targeting,Cellular uptakeA549 cells (A) A549/cDDP cells (B),Mitochondrial uptakeA549 cells (C) A549/cDDP cells (D),Mitochondrial targeting,在H中，只有极少量的香豆素紫杉醇结合物进入线粒体中，说明非靶向性的药物很难进入线粒体。,一种线粒体红色荧光探针,混合标记,流式细胞仪揭示香豆素标记靶向制剂有较高的胞内吸收和线粒体吸收，共聚焦观察线粒体共定位，在非耐
12、药性细胞中药物浓度为1.0um,在耐药性细胞中为2.5um,较高的细胞毒性和诱导细胞凋亡的能力与细胞和线粒体吸收药物的浓度一致。可能是包含TPGS1000，对ABC转运体药物泵有抑制作用，VE促进细胞对药物的吸收。 作为P-gp蛋白的抑制剂，TPGS1000可克服多药耐药性，加强细胞毒性。TPP带正电，促进带负电的线粒体对药物的吸收。从药物的分布区域来看，药物不仅分布在线粒体的表面，还被线粒体内吞。,5、Apoptosis signaling pathways,Release of cytochrome C from mitochondria A1：空白条件下细胞色素C的释放情况 A2：紫杉醇
13、处理 A3：紫杉醇脂质体处理 A4：靶向紫杉醇处理 前三种情况没有细胞色素C的释放 靶向紫杉醇制剂处理之后，释放细胞色素C光学显微镜成像显示靶向紫杉醇药物可以触发细胞色素C的释放，现对于紫杉醇和紫杉醇脂质体，释放量最多。说明靶向药物诱导的耐药A549/cDDP细胞的凋亡涉及线粒体信号转导通路。,Caspase activities加入靶向制剂后，半胱天冬酶3和9的活性显著增加，进一步证明细胞凋亡涉及线粒体信号通路,Bcl-2 family proteins expression Bid蛋白促进细胞凋亡 Bcl-2和Bcl-Xl抑制凋亡蛋白 Bcl-2家族蛋白在细胞凋亡途径中作用至关重要。Bcl
14、-2蛋白的降解在肿瘤形成和细胞对化疗药物的反应发挥重要作用。增加前凋亡蛋白的表达促进癌细胞的凋亡。而抗凋亡蛋白Bcl-2家族蛋白则会促进细胞的存活，在耐药癌细胞中加入靶向药物，促凋亡蛋白Bax、Bid表达加强。而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl被抑制。这些结果表明靶向药物通过激活线粒体内促凋亡蛋白的表达，抑制抗凋亡蛋白达到促进耐药癌细胞的凋亡。,Anticancer efficacy in the resistant lung cancer xenografts,肿瘤体积变化的大小 靶向药物的抑制肿瘤作用最强,体重变化的情况其它紫杉醇制剂的作用相似,在耐药肺癌移植瘤裸鼠的抗癌效果表明靶向药物
15、抑制肿瘤的效果最好，可能是由于以下原因：靶向药物长循环避免被网状内皮系统快速清除；合适的粒径有利于EPR效应被动靶向；增加在耐药性细胞中对靶向脂质体的吸收。在耐药性肺癌细胞中，靶向药物整体提高了抗癌效果。,Conclusions,在本次研究中，合成和修饰线粒体靶向TPGS1000-TPP结合物用于克服耐药性肺癌。膜材料TPGS1000和脂质体合适的粒径由于药物在血液中的长循环，避免被网状内皮系统的快速清除。包含TPGS1000促进耐药性细胞对靶向药物的吸收。TPGE1000-TPP结合物形成线粒体靶向，有助于药物吸收。靶向药物通过增加细胞色素C的释放，触发半胱天冬酶3或9的活性促进细胞凋亡。此外，通过激活促凋亡蛋白Bax，抑制抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白促进细胞凋亡。因此，靶向紫杉醇脂质体治疗耐药性的肺癌很有潜力。,Thank you !,
