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1、寄生虫卵粪便检查法许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外。通过检查粪便， 可以确定是否感染寄生虫及其种类和感染强度。粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。一、目的及要求1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。23、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵，掌握其一般特征。二、实验内容（一）粪样采集及保存方法1. 被检粪样应该是新鲜且未被污染，最好从直肠采取。2. 大动物按直肠检查的方法采集；小动物可将食指套上塑料指套，伸入直肠直接钩取粪便。自然排出的粪便，要采取粪堆上部未被污染的部分。3. 采取的粪便应装入清洁的容器内。采集用品最好一次性使用
2、，如多次使用则每次都要清洗，相互不能污染。4. 采取的粪便应尽快检查，否则， 应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存。当地不能检查需送出或保存时间较长时，可将粪样浸入加温至5060、5 10福尔马林中，使其中的虫卵失去活力，但仍保持固有形态，还可以防止微生物的繁殖。（二）直接涂片法（ Examination of Direct Smears ）在清洁的载玻片上滴1-2 滴水或 1 滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍儿仔细混匀。再用镊子去掉大的注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时，纸上的字迹隐约可见为宜。直接涂片法的优点是简便易行、
3、快速、 适合于虫卵量大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。因此在实际工作中，需多检几片，以提高检出率。检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。因一般虫卵 （特别是线虫卵）2 图 1-1-1 直接涂片法示意另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。取2 3g 粪样加清水23 倍，充分混匀成悬液。后用玻璃棒搅拌0.51min，使之成回旋运动，在搅拌过程中迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖片在镜下检查。检查时多取几滴悬液。该方法的原理是由于回旋搅动的结果，可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。（三）漂浮法（ Metho
4、d Involving Flotation其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵和粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进行检查。本法对大多数线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊均有效；但对吸虫卵、后圆线饱和盐水的制备1000ml沸水中加入约400g 食盐）。精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤，待冷却后即可使用（冷却后的溶液有食盐结晶析出，即为饱和）；粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备用。漂浮方法2g 放在平皿中， 用镊子或玻璃棒压碎， 加入 10 倍量的饱和盐水，搅拌混合， 用粪筛或纱布过滤到平底管中，使管内粪汁平于管口并稍隆起为好，但不要溢出。静置 30 分钟左右，用盖片蘸取后，放于载片
5、上，镜下观察；或用载片蘸取液面后翻转，加图 1-1-2 漂浮法示意注意事项漂浮时间约为30 分钟左右， 时间过短 （少于 10 分钟）漂浮不完全；时间过长（大于 1 小时）易造成虫卵变形、破裂，难以识别；检查多例粪便时，用铁丝圈蘸取一例后，再蘸取另一例时，需先在酒精灯上烧过后再用之，以免相互污染，影响结果的准确性。漂浮液必须饱和，且保存在不低于13的情况下，才能保持较高的比重。否则效果难以保铁丝圈3 在使用饱和食盐液漂浮虫卵时，只能把线虫卵及一些虫卵浮上来，而棘头虫卵和吸虫卵却不能浮上来。所以在把通常的漂浮法进行完以后，可将杯中的上层液体倒掉，再取沉渣进行镜检。除饱和盐水以外， 其他一些漂浮液
6、也可用于一些特殊虫卵的检查。如饱和硫酸锌溶液 （饱和度为1000ml 水中溶解920g 硫酸锌）漂浮力强，检查猪肺丝虫卵效果较好；饱和硫酸镁溶液（饱和度为1000ml 水中溶解440g 硫酸镁）多用于结肠小袋纤毛虫包囊的检查；饱和蔗糖溶液 （饱和度为1000ml 水中溶解 1280g 蔗糖） 性温和， 可适于多种虫卵和卵囊的漂浮。另外，还有一种简单的漂浮技术它可以检查含卵量少的粪便（每g 粪便少于50 个虫卵） 。具体步骤如下：即取3g 粪便放于一塑料杯或烧杯内，加进50ml 漂浮液后用玻璃棒搅匀，通过粪筛或双层纱布过滤到另一个杯中漂浮10 分钟然后用一试管插在滤液的中央底部，并迅速提起。把附
7、在上面的液滴滴落在载片上，加上盖片镜检。（四）沉淀法（ Sedimentation Technique其原理是利用虫卵比重比水大的特点，让虫卵在重力的作用下，自然沉于容器底部，然1、离心沉淀法检沉淀物。方法是取5g 被检粪便，置于平皿或烧杯中，加5 倍量的清水，搅拌均匀。经粪筛和漏斗过滤到离心管中。置离心机上离心2-3 分钟（电动离心机转速约为500 转/分） ，然后倾去管内上层液体，再加清水搅匀， 再离心。 这样反复进行2-3 次，直至上清液清亮为止，最后倾去大部分上清液，留约为沉淀物1/2 的溶液量，用胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁（ 2另外，也可将离心沉淀法和漂浮法结合起来应用。如可先
8、用漂浮法将虫卵和比虫卵轻的物质漂起来， 再用离心沉淀法将虫卵沉下去；或者选用沉淀法使虫卵及比虫卵重的物质沉下去，再用漂浮法使虫卵浮起来，以获得更高的检出率。2、自然沉淀法为自然沉淀过程。沉淀容器可用大的试管进行。每次沉淀时间约为半小时以上。自然沉淀法缺点是所需时间较沉淀法对各种蠕虫卵及幼虫均可查到，特别适用于检查比重大的虫卵（如吸虫卵等）。4 图 1-1-14 牛体寄生虫卵1. 大片吸虫卵 2. 前后盘吸虫卵 3. 日本分体吸虫卵 4. 双腔吸虫卵5. 胰阔盘吸虫卵 6. 东毕吸虫卵 7. 莫尼茨绦虫卵8. 食道口线虫卵 9. 仰口线虫卵10. 吸吮线虫卵 11. 指形长刺线虫卵 12. 古柏线虫卵 13. 犊新蛔虫卵 14. 牛艾美耳球虫卵囊
