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1、 动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养、 植物体细胞杂交强调：动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术 的基础。问题讨论:烧伤病人的治疗通常是取烧 伤病人的健康皮肤进行自体 移植，但对于大面积烧伤病 人来讲，健康皮肤很有限， 使用他人皮肤来源不足，而 且会产生排异反应。请同学 们想一想如何来治疗该病人 ？取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞 后再移植一、动物细胞培养动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后， 放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和 增殖。1、
2、概念2、原理细胞增殖(1) 选材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官3、培养过程：原因：它们细胞增殖能力强，分裂旺盛， 分化程度低，容易培养。(2)处理：分散成单个细胞,制成细胞悬液在进行动物细胞培养时，剪碎，用胰蛋白酶 或胶原蛋白酶分散细胞。既然用胰蛋白酶等处理细胞，表明细胞间的 物质是蛋白质，用胃蛋白酶行吗？想一想：不行，因为动物细胞培养适宜的PH为7.27.4， 此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白 酶(7.2-8.4)的活性较高。(3)动物细胞生长特性：细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长
3、到表面相互接触时，细胞就会 停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞 悬液部分细胞无 限传代动物细胞培养不能 最终培养成生物体细胞 贴壁原代培养传代培养胰蛋白酶10代细胞50代细胞(4)具体过程(4)具体过程细胞 悬浮 液10代 细胞50代 细胞无限传 代原代培养传代培养细胞株细胞系强调几个概念：多数组织细胞固定在 表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变 定义：将动物组织消化后的初次培养称为 原代培养 定义：当原代培养的细胞生长停止，这时如果 要使细胞继续生长，就要及时用胰蛋白酶等， 使细胞从瓶壁上解离
4、下来，然后加入新的培养 液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到 新的培养瓶内，这个过程称传代培养传代培养原代培养有关概念：细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活 到4050代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改 变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种 传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制。有关概念：探究：多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？【资料一】细菌、真菌
5、和病毒等均可造成细胞 培养环境的污染，而离体培养的细胞已经失 去了对微生物和有毒物质的防御能力，一旦 受到污染或自身代谢物质积累等，培养的细 胞就会死亡。探究：结论一： （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）无菌、无毒【资料二】培养的细胞就像体内细胞一样，需 要一些基本的营养物质和生长因子，如氨基 酸、葡萄糖、无机盐、维生素、核苷酸等。 不同组织来源的细胞需要不同的生长因子， 而且需求量也不同，所以必须精心设计这些 成分的搭配比例。探究：结论二：（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）全部的营养物质【资料三】人体细胞培养的标准温度为（ 36.5+ （-）0.5度），偏离这一温度范围，细
6、胞的正常代谢就会受到影响。培养的细胞对低温的耐 受能力比高温的耐受力大。探究：结论三：适宜的温度和PH值36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4【资料四】开放培养时一般把细胞置于95%空 气和5% 二氧化碳的气体环境中。氧气参与细胞呼吸作用，二氧化碳可以维持培养基的 PH。探究：结论四：O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）必要的气体条件无菌、无毒全部的营养物质适宜的温度和PH值必要的气体条件（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）保证细胞顺利的 生长增殖36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）4、
7、条件：维持培养液的PH5、应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质 ，判断某种物质的毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据细胞的全能性细胞株、细胞系植株培养结果获得细胞或细胞产物快速繁殖、培育无病 毒植株等培养目的动物血清植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 -（ ） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞 2、动物细胞工程技术的基础是
8、- （ ）A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养AD课堂检测：3、在动物细胞培养过程中，下列哪种现象是不可能的（ ）A细胞一直在细胞悬液中分裂生长B有少部分细胞可能在培养条件下无限地传代下去C有部分细胞核型会发生变化 D. 个别细胞会发生基因突变4、下列过程与细胞培养无关的是-（ ）A.检测有毒物质 B.生产单克隆抗体 C.筛选抗癌药物 D.杂交育种AD课堂检测：离体的植物组织或细胞在适当的培养条 件下可发育成完整的植株，那么，是否能用 类似的方法使动物细胞发育成一个完整的动 物个体呢？思考：二 动物体细胞核移植技术和克隆动物将动物的一个细胞的细胞核，移入一 个已经去
9、掉细胞核的卵母细胞中，使其重 组并发育成一个新的胚胎， 这个新的胚胎 最终发育成动物个体。用核移植的方法得 到的动物称为克隆动物。核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植（难度高）1、概念卵细胞母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞2、过程供体细胞（供核）细胞培养体细胞卵母细胞（减中期：供质）去核无核卵母细胞注入电刺激重 组 细 胞重组胚胎胚胎移植 代孕母体新个体(与母体 相同的个体)3、应用前景（1）加快家畜遗传改良进程（2）保护频危物种（3）利用生物反应器生产生物蛋白（4）器官移植供体4、存在问题 成功率低 存在健康问
10、题 克隆动物食品的安全问题许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。1、在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到 A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术2、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去 掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎 ，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多 数性状 A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙DB课堂检测：3、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡， 以下较易成功“复生”野驴的方法是 （ ）A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体C动物体 细胞核 移植技术和克隆动物过程应用 前景存在 问题小结： 动物细胞工程动物细 胞培养培养 过程培养 条件应用动物细胞培养液的主要成分 ：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物 血清等。与植物培养基相比其特点是 ：（1）液体培养基（2）含有动物血清动物体细胞大都生活 在液体的环境
