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1、 第八章 肠杆菌科第1节 概述 n一、分类与命名 31个属、120多个菌种 （P102表8-1） 对人类致病力强的四种（属）：埃希菌、志贺菌、沙门菌、耶尔森菌； 与医院感染有关的八种条件致病菌（属）：枸橼酸杆菌、克雷伯菌、肠杆菌、泛菌、沙雷菌、变形杆菌、普罗威登菌、摩根菌； 其他：巴特维菌、布丘菌、西地西菌、爱德华菌、欧 文菌、爱文菌、哈夫尼亚菌、克卢瓦菌、勒克菌、 勒米诺菌、穆勒菌、肥杆菌、普拉奇菌、光杆菌、 普城菌、兰恩菌、塔特姆菌、致病杆菌、约根菌。 1为了量化肠杆菌科成员在临床标本中出现的概 Farmer等根据60篇文选中的资料，提出了一个“相关频 率”（relative freque
2、ncy) 010级的评估法：相关频率10：最常见的细菌，1种，大肠杆菌相关频率8：十分常见的细菌，2个种，肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌相关频率7：常见菌，弗氏枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、粘质沙雷菌、产酸克雷伯菌等相关频率6：有时可见，如异型枸橼酸杆菌、聚团肠杆菌、蜂窝哈夫尼亚菌等2相关频率5：不常见，如液化沙雷菌、产碱普城菌、 无丙二酸盐、 枸橼酸杆菌等相关频率4：少见，每年至多几次，如迟钝爱德华菌、红色沙雷菌、摩氏摩根菌等相关频率3：很少见，一年以上遇到1次，如坂崎肠杆菌、弗氏耶尔森菌、雷极普城菌相关频率2：十分罕见，大多数实验室1年也不见到1次，如戴氏西地西菌、痰踏特姆菌等相关频率1
3、：已知只有少数临床分离物，如无花果沙雷菌、赖氏西地西菌相关频率0：临床标本中未曾发现只从环境、昆虫和无脊柱动物中分离，如产粘变形杆菌、致病杆菌属等3二、临床意义n致：化脓性疾病、肺炎脑膜炎菌血症以及伤口、 泌尿道和肠道的感染；还是医院感染重要病原。1、人类肠道外感染大、肺克、产酸克、产、阴 、黏质沙雷菌伤口、泌尿道、呼吸道和中枢神经系统感染、 医 院感染、 鼠疫 2、人类肠道感染埃、志、沙、耶急、慢性肠道感染、 食物中毒、 旅行者腹泻、肠热症4肠科常见菌致病性比较 属名 所致疾病 致病因素 埃希菌属 肠外感染 肠道感染 菌毛、K、肠毒素、内沙门菌属 伤寒、副伤寒(肠热症) Vi-Ag、内、肠毒
4、素菌/败血症 胃肠炎 携带者 志贺菌属 细菌性痢疾(急、慢）携带者 菌毛、内、外毒素耶尔森菌属 鼠疫 肠炎 菌/败血症 FI / V/W/pgm/C/F/Pu/T、内、鼠毒素枸橼酸杆菌属 腹泻 菌血症 脑膜炎 脑脓肿 内克雷伯菌属 肺炎 肠炎 菌血症 脑膜炎 泌尿道感染 荚膜变形杆菌属 泌尿道感染 菌血症 脑膜炎 肠炎 食物中毒 菌毛、 内5三、生物学特性(1) 形染结构特征：G- 杆菌,多有周H、有菌毛、无芽 胞，部分菌株有荚膜、包膜(2) 培养特性：兼、低求,液培混浊,多用“选择鉴定培养 基”(?) 如: SS、EMB、MAC、中国兰等(3) 生化反应活跃：触+ 氧- 葡F 硝+ G- 杆
5、定科依据 （痢疾志贺菌1型、发光致病杆菌触-；欧文菌、致病杆菌、臭鼻杆菌、多源杆菌属和 耶尔森菌属某些菌株硝酸盐-） 经典：KIA、MIU、I M V C U S P L O A 靛甲伏枸尿硫苯赖鸟精；6(4) Ag结构：复杂, “O” Ag菌体抗原，LPS，内毒素，耐热；“H” Ag 鞭毛抗原，Pro.，不耐热；表面AgViAg、K Ag等，可阻止O-AgAb反应；(5) 抵抗力：不强；耐胆盐；7四、 M学检验n（一）标本采集 肠外标本（取自感染部位）、肠道标本（早期新鲜脓血黏液） n （二）检验程序 （三）标本直接检查：难以鉴别n（四）分离培养 生化（常规+试剂盒）与鉴定 血清学分子生物学
6、n（五）抗菌药物敏感试验n（六）抗体检测 8G- 杆菌鉴定一般操作流程 标 本 分离培养 G 染色镜检：G- 杆菌（SS、MAC、EMB、中国兰、普、血） 纯培养（KIA、MIU、H-L） 增菌培养 初步多价血清凝集（GN、SF、TT） 葡O/F、 氧化酶 、触、硝酸盐 F 、- 、+、+ 接种肠杆菌科细菌生化编码鉴定管（15E） 血清学玻片凝集：多价、O、K、H 单价 + 编码册+各菌鉴别特点 9分离培养选择性培养基n原色：SS红、 EMB淡紫兰、MAC淡红、中 国兰紫蓝n特点：加抑制剂促进剂，乳糖指示剂致病菌/非：乳 -/+ 无色菌落/有色菌落n非致病菌菌落颜色：SS、 MAC、远藤氏红色
7、EMB紫蓝带金属光泽中国兰紫蓝 10生化反应KIA： 克氏双糖铁斜面原色：为浅红色，PH7左右,中性红指示剂用途：1、 增菌 2、生化反应：结果判断：斜面：乳糖 黄+、红-底层：葡萄糖 黄有气裂+、黄+、红-动力穿刺线模糊/清晰 + / - H2 S 黑柱+、无-MIU：动力吲哚尿酶 原色: 黄红色，酚红指示剂结果判断：1看穿刺线（M）2看颜色（红U+）3加I试剂红I+11鉴定步骤：定科属种（群、型）1、定科： 触+ 氧- 葡F 硝+ G- 杆周H或无 2、定属（1）依PAD、VP试验结果分三组PAD、VP第一组： - - 埃 志 沙 枸 爱第二组： - + 克 肠 哈 泛 沙 耶第三组： +
8、 - 变 摩 普（2）依PAD、葡萄糖酸盐 试验结果分三组：n 变 普 摩 克 肠 沙 哈 埃 志 沙 枸 爱 耶 苯丙氨酸脱A酶 + + + - - - - - - - - - - 葡萄糖酸盐 - - - + + + + - - - - - -12肠杆菌科主要致病菌生化特性比较表 属名 生化反应 葡 乳 动 I M V C U S L O A埃希菌属 + + + + + - - - - + +/- -/+ 沙门菌属 +/+ - + - + - + - + + + +/- 志贺菌属 + - - -/+ + - - - - - - -耶尔森菌属 + - - - + - - - - - - - 1
9、3第二节 埃希氏菌属 种类？大肠杆菌：1885年德Escherich发现一、临床意义致病物质：侵袭力（K、菌毛）、内、肠毒素（LT、ST）所致疾病：肠道外感染（各种？炎）肠道内感染（腹泻）14五组致病性大肠杆菌比较 （1955年Neter提出肠致病性大肠杆菌概念）种类及英文缩写 致病因素 疾病产毒素性大 定植因子抗原(CFA或称粘附素) 儿童急性腹泄、ETEC 肠毒素(ST及LT:似霍乱肠毒素) 旅游者腹泄肠致病性大 粘附因子(EAF) 流行性婴幼儿腹泄EPEC 微量ST、LT (又称:EPEC肠炎、夏季腹泄、婴儿霍乱)肠侵袭型大 侵袭力(毒力标记Ag) 肠炎(似志贺氏菌)EIEC 食物中毒肠
10、出血型大 志贺氏菌样毒素 出血性肠炎EHEC ( N、Cell、肠毒)肠道聚集-粘附性大 外毒素 小儿顽固性腹泄EAggEC (似志贺氏菌样毒素,损伤肠细胞) 旅行性腹泄 15二、生物学性状n1、G-短小杆菌周H有菌毛微荚膜；n2、低求，普平长灰白菌落，血平溶血选择性培养基呈有色菌落：SS、MAC粉红色；EMB蓝紫色+金属光泽n3、葡乳麦甘+蔗+/-，IMVCUS+-，KIA：斜A底A+气 ；MIU+-n4、抗原：O：K：H， 16三、微检 标本？程序？报告？ 致病性大肠杆菌检查: 17分离培养、生化反应、血清学分型 、毒力检测 EPEC:生化反应+血清学分型 （O、H分型）ETEC:生化反应
11、+血清学分型+肠毒素LT、ST检测EIEC:生化反应+血清学分型+毒力测定；生化似志(H-乳-/迟+葡+)，但赖(L)-鉴别：醋酸盐 、葡萄糖胺利用、粘质酸盐产酸 +毒力试验(Sereny，豚鼠眼结膜试验)+EHEC:生化反应+血清学分型；（O157 H7 最常见）山梨醇麦康凯（SMAC）培基(动-山-，无色菌落) 17大肠埃希菌鉴定依据1. 先确定为肠科菌: G- 杆状cb-触+硝+葡F2. 菌落扁平有色不透明3. KIA: 底A+气斜A无黑柱(+-+)； MIU+-、IMVCUSLOA+- + +/- -/+ 详细生化反应结果查编码册得埃希氏菌属4. 致病大肠菌鉴定: 血清学反应分型+毒力
12、检测18第三节 沙门氏菌属 一、分类 种类？P113表8-7 二、临床意义 致病物质： 侵袭力（ Vi-Ag ）内毒素致肠热症主要因素肠毒素类似ETEC的LT及志贺菌ST 所致疾病：胃肠炎（食物中毒）：鼠、猪、肠炎沙门菌菌/败血症：猪、丙、鼠、肠炎沙门菌肠热症：伤寒、甲乙丙副伤寒菌带菌者 免疫性：牢固；CMI19三、生物学性状n1、G-杆菌周H、菌毛；n2、抗原：O、H、表面（Vi、M、5）抗原3、变异性:S-R、H-O、位相、V-W变异n4、菌落无色或淡或中心黑、小、半透葡麦甘+乳蔗-，IMVCUSLOA-+-+-+/- ； KIA：斜K底A或A+气）;MIU:+-n5、抵抗力：不强20各抗原特点
