《医学遗传学实验》——小鼠睾丸染色体制备

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1、实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备医学遗传学系医学遗传学系一、实验目的一、实验目的1 1、掌握快速制备动物染色体的方法；、掌握快速制备动物染色体的方法；2 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。、观察小鼠染色体的数目及形态特征。二、实验原理二、实验原理活体内注射秋水仙素使细胞停止在分活体内注射秋水仙素使细胞停止在分 裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染色裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染色 体分散，从而得到染色体的中期分裂相体分散，从而得到染色体的中期分裂相; ; 固定剂处理使染色体结构保持完整，防止固定剂处理使染色体结构保持完整，防止 染色体收缩。染色体收缩

2、。静置5min5min三、实验内容与步骤三、实验内容与步骤腹腔注射秋水仙素腹腔注射秋水仙素 处死小鼠处死小鼠 （损伤脊髓法）（损伤脊髓法）取睾丸，剥离白膜，取睾丸，剥离白膜，剪碎曲细精管剪碎曲细精管第一次低渗：第一次低渗：0.4%KCL,37,5ml10 ml,0.4%KCL,37,5ml10 ml,吹打吹打2 min2 min37 37 静置静置2min2min弃上清弃上清第二次低渗：第二次低渗： 0.4%KCL, 37,10ml0.4%KCL, 37,10ml， 吹打吹打2min, 372min, 37静置静置5min5min弃上清弃上清固定：固定：8ml8ml新鲜固定液，新鲜固定液，10 min10 min离心：离心：1000rpm1000rpm，8min8min弃上清弃上清软化：软化：60%60%冰醋酸，冰醋酸，3ml3ml，3min3min滴片，烘干滴片，烘干染色：室温下染色：室温下10min10min细流冲洗，晾干细流冲洗，晾干镜检观察镜检观察