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1、第一章 组织学绪论一 、组织学的研究内容和意义组织学: 是研究机体微细结构和相关功能的科学。其研究内容包括细 胞、组织和器官系统三部分, 又称显微解剖学。细胞: 是人体结构和功能的最小单位, 由细胞膜、细胞质和细胞核构成。在电子显微镜下还可以观察到细胞内部更细微的结构, 即超微结构。在电子显微镜下细胞膜的结构表现在电子显微镜下细胞膜的结构表现“ “两暗夹两暗夹 一明一明” ”的单位膜结构的单位膜结构组织: 结构相同或相似的细胞群及细胞外基质构成组织, 人体的组织可分为四大类型, 即上皮组织, 结缔组织, 肌组织和神经组织。 器官: 不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。 系统: 若干功
2、能相关的器官构成系统。1. 光学显微镜(简称光镜)的发明与细胞、组织概念的提出裸眼分辨率: 0.2mm光镜分辨率: 0.2m 即 210-6 m 2. 细胞学说的提出和组织学的建立 3. 电子显微镜(简称电镜)的发明和超微结构的发现电镜分辨率: 0.2nm 即 210-10 m 4. 当代组织学二. 组织学的发展简史和 当代组织学1. 对组织学内容的审视角度2. 注意形态与功能的统一3. 注意培养观察与空间思维的能力三.组织学的学习方法(一) 光学显微镜技术1. 石蜡切片术取材和固定; 脱水和包埋;切片和染色; 封片。HE染色: 为组织学最常用的染色法, 即苏木精-伊红染色法(hematoxy
3、lin-eosin staining),其中,苏木精为碱性染料主要使四.组织学技术简介 细胞核内的染色质及细胞质内的核糖 体染成紫蓝色;伊红为酸性染料主要 使细胞质和细胞外基质中的成分染成 红色。 嗜碱性:组织结构对于碱性染料亲和 力强的性质。嗜碱性结构可被苏木精 染成紫蓝色。 嗜酸性:组织结构对于酸性染料亲和 力强的性质。嗜酸性结构可被伊红染 成红色。中性: 组织结构对于两种染料亲和力都不强的性质, HE染色着色淡。 其他切片技术: 火棉胶包埋, 冰冻切片,涂片,铺片,磨片。 其他染色法: 硝酸银神经细胞(黑),醛复红弹性纤维(紫), 甲苯胺蓝肥大细胞(紫 红色)1. 透射电镜术电子密度高:
4、 当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时, 电子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜照片呈黑或深灰色, 称为电子密度高。反之称为电子密度低。 2. 扫描电镜术(二)电子显微镜技术组织化学术: 为应用化学、物理、生物 化学、免疫学或分子生物学原理和 技术, 与组织学技术相结合而产生的 技术, 能在组织切片定性、定位、定 量地显示某种物质的存在与否以及 分布状态。 细胞化学术:前述技术用于游离细胞样 品 则称为(cytochemistry)。(三)组织化学术1. 一般组织化学术基本原理是在切片上添加某种试剂, 和组织中待测反应物发生反应, 其终产物或为有色沉淀, 以用光
5、镜观察, 或为重金属沉淀以用电镜观察。(1) 糖类:PAS反应, pariodic acid Schiff reaction(2) 脂类: 油红、尼罗蓝及苏丹类染料(3) 核酸: 福而根反应DNA; 甲基绿- 派若宁反映DNA绿色,RNA红色。(4) 酶类: 酶组织化学术。通过显示酶的催化活性以表示酶的存在。 2. 免疫组织化学术immunohistochemistry: 是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白 质均具有抗原性, 当把人或动物的某种蛋 白质作为抗原注入另一种动物, 其体内则 会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗 体从动物血清中提出后, 与标记物相结合, 即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片孵育, 抗体则与组织中相应抗原特异性结合在显微镜下通过观察标记物而获知肽或蛋白质的分布部位。常用的标记物有荧光素, 辣根过氧化物酶、胶体金。 3. 原位杂交技术即核酸分子杂交组织化学术。其原理为用带有标记物的已知碱基 序列的核酸探针，与细胞内待测的 核酸按碱基配对的原则进行特异性 原位结合，即杂交。然后，通过对 标记物的显示和检测而获得待测核 酸的有无及相对量。常用的标记物 有放射性核素（35S，32P，3H等）和 地高辛。(四) 放射自显影技术 (五) 图象分析术 (六) 细胞培养术和组织工程
