《免疫学检测原理》由会员分享，可在线阅读，更多相关《免疫学检测原理（41页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第 二十一章 免疫学检测原理 u 免疫学检测乃借助免疫学、细胞生物学和分子生物学理 论或技术，对抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因 子等进行定性或定量检测。免疫学检测技术在医学生物 学研究领域得到广泛应用，并在临床实践中用于探讨免 疫相关疾病的发病机制及其诊断、病情监测与疗效评价 等。随着现代免疫学以及细胞生物学、分子生物学等相 关学科的进展，免疫学检测技术
2、不断发展和更新。u第一节 基于抗原-抗体反应的检测方法u第二节 免疫细胞的检测u第三节 免疫分子的检测 制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用学习指导u1、掌握凝集反应和沉淀反应的概念u2、掌握免疫细胞和免疫分子常用检测方法的名称u3、熟悉三大标记技术的原理和方法及其应用u4、了解免疫学方法的研究概况、进展及在临床中的应用制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页
3、下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 基于抗原-抗体反应的检测方法u一、抗原抗体结合反应的特点（熟悉）u （一）特异性和交叉反应u （二）抗原-抗体结合的带现象与可见性u抗体反应中，可能出现抗原或抗体过剩的情况，由于过 剩一方的结合价不能被完全占据，多呈游离的小分子复 合物形式，或所形成的复合物易解离，不能被肉眼察见 ，此为前带现象（prozone）即抗体过剩，或后带现象 (postzone)即抗原过剩。u （三）可逆性u抗原-抗体反应为分子表面的非共价结合，结合
4、虽稳定但 可逆。制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 二、抗原-抗体反应的影响因素（熟悉）u （一）电解质u （二）酸碱度抗原抗体反应的最适pH是68。u （三）温度 抗体-抗原反应的最适温度为37。u （ 四）抗原和抗体的性质u抗体的特异性和亲和力是决定抗原-抗体反应的关键因素 。u抗原和抗体的浓度、比例对抗原-抗体反应的影响最大， 是决定性因素 制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;08
5、52-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（一）凝集反应（图21-1）（掌握）u 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在一 定条件下出现肉眼可见的凝集物，此为凝集反应 (agglutination)。u 1直接凝集 u 2间接凝集 u3间接凝集抑制试验 制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学
6、应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用各种凝集反应示意图制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（二）沉淀反应（掌握）u 可溶性抗原（血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液、各 种微生物蛋白分子等）与相应抗体结合后，在一定条件 下出现肉眼可见的沉淀，此为沉淀反应(precipitation)。u1单向免疫扩散(
7、single immunodiffusion) u2双向免疫扩散(double immunodiffusion) u3免疫电泳(immunoelectrophoresis)u 4免疫比浊(immunonephelometry)制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用单向免疫扩散(single immunodiffusion)制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页
8、下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用双向免疫扩散(double immunodiffusion) 制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用免疫电泳(immunoelectrophoresis)制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下
9、一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用对流免疫电泳制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用火箭免疫电泳制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOI
10、NTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（三）补体参与的反应（了解）u应用抗体与红细胞表面抗原结合，激活反应体系中的补 体成分，根据溶血现象判定试验结果。补体结合试验和 溶血空斑试验（后叙）均属此类反应。补体结合试验曾 用于检测多种细菌、病毒的抗原或抗体，因易受多种试 验条件影响，已渐被其他方法取代。此外，补体依赖的 微量细胞毒实验曾用于HLA的血清学分型，方法是：将标 准分型血清与待检淋巴细胞反应，再加入兔补体，若细 胞表面表达相应HLA抗原，则被溶解。溶解细胞可被台盼 蓝或伊红染料着色，而活细胞不着色，藉此判定结果。制作：姚新生 审校：
11、孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（四）免疫标记技术（熟悉）u 免疫标记技术（immunolabelling technique）乃用荧光素 、酶、放射性核素或化学发光物质等标记抗体或抗原， 进行抗原-抗体反应的检测，是目前应用最为广泛的免疫 学检测技术。标记物与抗体或抗原连接后并不改变抗原 抗体的免疫特性，具有灵敏度高、快速、可定性、定量 、定位等优点。u。制作：姚新生
12、审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（四）免疫标记技术u1免疫荧光法(immunofluorescence，IF) 此法乃用荧光 素与抗体连接成荧光抗体，再与待检标本中抗原反应， 置荧光显微镜下观察，抗原-抗体复合物散发荧光，借此 对抗原进行定性或定位。u （1）直接荧光法：u （2）间接荧光法：制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页
13、 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用免疫荧光法(immunofluorescence，IF)制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 三、抗原抗体反应的基本检测方法u（四）免疫标记技术u2酶免疫测定(enzyme immunoassay， EIA)u （1）酶联免疫吸
14、附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)：是酶免疫测定中应用最广的技术，用于 测定可溶性抗原或抗体。其基本方法是：将已知抗原或 抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，使 抗原-抗体反应在固相表面进行，借助洗涤将固相上的抗 原-抗体复合物与液相中游离成分分离（图21-6）。ELISA 的操作方法很多，以下简介几种基本方法。 制作：姚新生 审校：孙万邦 联系：;0852-8204419 上一页上一页 下一页下一页返回返回本章首页 第一节 第二节 第三节免疫学应用免疫学应用本科免疫学本科免疫学POWERPOINTPOWERPOINT讲稿讲稿免免 疫疫 应应 用用第一节 基本检测方法-（四）免疫标记技术u1）双抗体夹心法：u2）间接法：u 3) 酶联免疫斑点试验(ELISPOT): 其原理是：u4）BAS-ELISA：uELISA技术的优点是灵敏度高、操作简便、稳定性强，可 自动化检测，从而被广泛用于检测
