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1、第3章消毒与灭菌11.灭菌 杀灭物体上所有微生物的方法。包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内 的全部病原微生物和非病原微生物。第一节 消毒灭菌的常用术语22.消毒 杀灭物体或环境中的病原微生物。但不一定能杀死细菌芽胞或非病原微 生物。用以消毒的药品称为消毒剂。 33.防腐防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法 。用以防腐的药品称为防腐剂。4.清洁 通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数 量的过程。45.无菌和无菌操作无菌：不存在任何活菌、多是灭菌的结 果。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物 品的操作技术。5分为物理方法和化学方法两大类一、物理消毒灭菌法物理消毒灭菌的因素包括：热力、辐 射、滤过、干燥和
2、低温等第二节 消毒灭菌的方法6（一）热力灭菌法高温对细菌具有明显的致死作用，因此 最常用于消毒和灭菌。分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。71.干热灭菌法 杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性 。n焚烧 用于废弃物品或动物尸体等n烧灼 接种环、试管口等的灭菌。n干烤 干烤箱灭菌（160-170C，2h）适用于高温下不变质、不损坏、不蒸 发的物品。8n红外线 是一种0.7-1000m波长的电磁波，尤以1-10m波长的热效应最强。热效应只能在照射到的表面产生。多用于医疗器械的灭菌。92.湿热灭菌法 最常用效果优于干热灭菌法。湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性湿热的穿透力比干热大湿热的蒸气有潜热效应存在。10
3、湿热与干热灭菌效果的比较热型 温度（）时间 布层内的温度（）灭菌效 果（h） 20层 40层 100层 湿热 90-105.3 3 101 101 101.5 完全 干热 130-140 4 86 72 70.5 不完全11n巴氏消毒法 用较低温度杀灭液体中的病原菌或特 定微生物、保持物品中所需不耐热成分 不被破坏的消毒方法。用于消毒牛乳、酒类（ 61.1-62.8C，30min 或 71.7C，15- 30s）12n煮沸法 100C，5min 杀死细菌繁殖体100C，1-2h 杀灭细菌芽胞n流动蒸气消毒法 利用水蒸气的进行消毒。(1个大气 压 100C)细菌繁殖体15-30min可被杀灭。1
4、3n间歇蒸气灭菌法利用反复多次的流动热蒸气间歇加热 以达到灭菌的目的。100C，15-30min，37C孵箱过夜*3 次适用于一些不耐热的含糖、牛奶等培 养基。14n高压蒸气灭菌法 灭菌效果最好高压蒸气灭菌器是一个密闭、耐高压蒸 锅。15103.4kPa，121.3 C，15-20 min可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物 。常用于一般培养基、生理盐水、手术敷 料等耐高温、耐湿物品的灭菌。16n 新型的预真空压力蒸汽灭菌器先抽出灭菌器内空气约98%，再 送入蒸汽。灭菌时间只需34分钟。特别适用于周转快的物品。17（二）辐射杀菌法1. 紫外线 （1）波长240-300nm的紫外线具有杀菌作用 ，
5、其中以260-266nm最强。（2）主要作用于DNA，形成二聚体，干扰 DNA的复制与转录，导致细菌的变异或死 亡。18（3）紫外线穿透力较弱，一般只用于手 术室等的空气消毒，或用于不耐热物品 的表面消毒。（4）紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作 用，使用时应注意防护。192. 电离辐射 （主要包括射线和射线）n具有较高的能量和穿透力，对微生物有 致死作用。n常用于大量一次性医用塑料制品的消毒 ；亦可用于食品、药品和生物制品的消 毒或灭菌。203. 微波 波长为1-1000mm的电磁波n可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质， 但不能穿透金属表面。n主要用于食品、非金属器械、检验室 用品、无菌室和病室中食
6、品用具、药 杯及其他用品的消毒。21（三）滤过除菌法n用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌， 达到无菌的目的，但是不能除去病毒和支原体 。所用的器具是滤菌器 （薄膜滤菌器、玻璃 滤菌器、石棉滤菌器 、素陶瓷滤菌器）。n 主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生 素以及空气等的除菌。22空气除菌采用生物洁净技术。通过初、中、高三级高效分子空气滤过器，除 掉空气中的尘埃微粒，并采用合理的气流方式来达 到空气洁净的目的。n初级过滤：塑料泡沫海绵 过滤率50%n中效过滤：无纺布 过滤率 50%90%n高效过滤：超细玻璃滤纸 过滤率 99.9599.99%凡在送风系统上装有高效或亚高效过滤系统 的房
7、间,一般统称为生物洁净室。23（四）干燥和低温抑菌法有些细菌的繁殖体在空气 中干燥时会很快死亡。低温 可使细菌的新陈代谢减慢， 故常用作保存细菌菌种。为避免解冻时对细菌的损 伤，可在低温状态下真空抽 去水分，此方法称为冷冻真 空干燥法。该法是目前保存 菌种的最好方法。24超声波消毒法不被人耳感受的高于20kHz/s的声波， 称为超声波。超声波可裂解多数细菌，尤 其是G-菌。主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分 或制备抗原等。25二、化学消毒灭菌法化学消毒剂的杀菌机制：n 促进菌体蛋白质变性或凝固。n 干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团。n 损伤细菌的细胞膜。26常用的化学消毒剂及防腐剂对
8、人体组织都有危害，所以只限于外用或环境消毒。局限于：1、体表（皮肤、粘膜、伤口的消毒）2、手术器械消毒3、排泄物及周围环境的消毒 27 消毒剂的分类 1.高效消毒剂 可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物 。适用于不耐受热力灭菌，但要进入人 体内部的物品，如内窥镜、塑料外科器 材等的消毒。n如含氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛 类消毒剂、环氧乙烷282、中效消毒剂不能杀灭细菌芽胞，但能杀灭细菌繁殖体、真 菌和大多数病毒。适用于纤维内窥镜、喉镜、阴道窥器、麻醉器 材等。如含碘消毒剂、醇类消毒剂3. 低效消毒剂可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀灭细菌芽胞 及某些抵抗力较强的细菌、真菌和病毒。如季胺盐类消毒剂、
9、氯己定、高锰酸钾29第三节 消毒灭菌的运用 医疗器械物品的消毒灭菌 1. 高危器械物品 使用时需进入无菌组织的物 品高压蒸汽灭菌、高效消毒剂 2.中危器械物品 使用时不进入无菌组织，但需 接触粘膜的器械消毒即可。 3.低危器械物品 只接触未损伤的皮肤一般用后清洗、消毒处理即可。 4.快速周转的医疗器械采用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂快 速处理、中效或低效消毒剂与低热协同等方法。30 室内空气消毒灭菌1.物理消毒法紫外线照射（1.5w/m3,1小时）,滤过除菌（孔径0.2m）2.化学消毒法过氧乙酸喷雾,过氧化氢喷雾、二氧化氯溶液 、中草药31手和皮肤的消毒75%乙醇，0.05%-0.1%次氯酸
10、钠、0.2-0.4%过氧 乙酸 粘膜的消毒3%过氧化氢、0.1-0.5%氯己定或1g/L高锰酸钾 病人排泄物与分泌物 次氯酸钠、漂白粉等作用1h32病人污染物品的消毒日常生活小用具煮沸或流通蒸汽消毒，或过 氧乙酸擦洗、喷洒。饮水的消毒 氯气或漂白粉环境的消毒过氧乙酸，含氯消毒液厕所阴沟用生石灰等33消毒剂微生物环境性质 浓度数量种类有机物物理状态酸碱度作用时间第四节 影响消毒灭菌效果的因素温度 34一、微生物的种类不同微生物对消毒灭菌的敏感性不同。敏感性高低：真菌、细菌繁殖体、包膜病毒、 无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞二、微生物的物理状态消毒灭菌前的微生物的生长情况影响它们的抵 抗力。三、微生
11、物的数量数量越大，所需消毒的时间就越长。35四、消毒剂的性质、浓度与作用时间1.理化性质不同，对微生物的作用大小各异。2.同一种消毒剂的浓度不同，其消毒效果也不 同。一般消毒剂在高浓度时杀菌作用大（醇 类例外）。3.消毒剂在一定浓度下，对细菌的作用时间越 长，消毒效果也愈好。36五、温度 n消毒剂的杀菌作用实质是化学反应， 其反应速度随温度升高而加快。因此 ，温度升高可提高消毒效果。37六、酸碱度 消毒剂的杀菌作用受酸碱度的影响。（戊二醛溶液中加入碳酸氢钠后才有杀菌 作用。）七、有机物 环境中有机物的存在，能够影响消毒剂 的效果。38第五节 病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类第一类是
12、指能够引起人类或者动物非常严重疾 病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消 灭的微生物。 第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病， 比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动 物与动物间传播的微生物。 39第三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成 严重危害，传播风险有限，实验室感染后 很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和 预防措施的微生物。 第四类是指在通常情况下不会引起人 类或者动物疾病的微生物。40n第一类、第二类病原微生物统称为高致病 性病原微生物。n采集、运输高致病性病原微生物样本应当 防止病原微生物扩散和感染。容器或者包 装材料上应当印有生物危险标识
13、。41二、病原微生物实验室的分级n国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护 水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定 ，将实验室分为一级、二级、三级、四级。n 一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。n三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实 验活动。 42三、实验室感染的控制以及监督和法律责任1.控制工作2.监督内容3.法律责任的核心43复 习 思 考 题1.解释消毒、灭菌、防腐和无菌和无菌操作 2.试述高压蒸气灭菌法的用途与机理。 3.简述紫外线杀菌法的特点及机理。 4.试述影响消毒灭菌效果的因素。 5.试介绍热力灭菌的种类、原理及应用范围 。 6.试介绍各级病原微生物实验室的工作范围 。44
