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1、专题二 细胞工程 动物细胞工程 动物细胞培养和核移植技术常用常用 技术技术 手段手段动物细胞核移植动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体动物细胞培养动物细胞工程 (基础)动物细胞培养 定义从动物机体中取出相关的组织,将它 分散成单个细胞,然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖。动物组织块动物组织块剪碎剪碎胰蛋白酶(或胶胰蛋白酶(或胶 原蛋白酶)原蛋白酶)处理处理 分散成单个细胞分散成单个细胞配制成配制成 细胞悬细胞悬浮液浮液原代培养原代培养将动物组织消化后的初次培养将动物组织消化后的初次培养动物细胞培养 过程原代培养原代培养 过程胰蛋白酶的作用: 动物组织
2、细胞间隙中含有一定量的 弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形 成具有一定弹性和韧性的组织和器官, 可用胰蛋白酶处理,使组织分散。接触抑制现象:当贴壁细胞分裂生长到 表面相互接触时,细胞就会停止分裂增 殖。动物细胞培养 过程左图显示了创面愈合过 程中一个十分有趣的 现象。当周边的上皮 向创面中央爬行时,一 旦上皮细胞互相接触, 就停止分化和增殖。 该现象就叫“接触抑制 “。因此,创面上不会 出现多余的皮赘。这 是一种十分巧妙和“神 秘“的调控现象。 动物细胞培养动物组织块动物组织块剪碎剪碎胰蛋白酶(或胶胰蛋白酶(或胶 原蛋白酶)处理原蛋白酶)处理 分散成单个细胞分散成单个细胞配制成配制成 细胞悬细
3、胞悬浮液浮液原代培养原代培养动物细胞培养 过程传代培养传代培养传代培养将贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶将贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶 处理,分瓶继续培养的过程处理,分瓶继续培养的过程 原理细胞增殖动物细胞培养 条件 无无菌、无毒的菌、无毒的环境环境 营养营养 温温度度和和pHpH 气气体环境体环境l l生产有价值的蛋白质制品(如病毒疫生产有价值的蛋白质制品(如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)苗、干扰素、单克隆抗体)l l培养基因工程的受体细胞培养基因工程的受体细胞l l检测有毒物质检测有毒物质l l用于生理、病理、药理等研究用于生理、病理、药理等研究动物细胞培养 应用植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目 植物组织培养动物细胞培养原理原理培养基性质培养基性质培养基成分培养基成分培养结果培养结果培养目的培养目的固体培养基固体培养基 各种营养物质各种营养物质 植物激素植物激素植物体植物体 快速繁殖、培育快速繁殖、培育 无病毒植株等无病毒植株等细胞群体细胞群体各种营养物质各种营养物质 动物血清动物血清液体培养基液体培养基获得细胞或获得细胞或 细胞产物细胞产物细胞全能性细胞增殖