实验室仪器操作简介-修改

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1、分 子 生 物 学2010实 验分子生物学实验室常用 仪器设备简介及操作实验一 分 子 生 物 学2010实 验实验室主要仪器，设备的简介及使用方法 微量移液器微量移液器 高速台式离心机高速台式离心机 PCRPCR仪仪 凝胶成像系统凝胶成像系统 电泳仪电泳仪 恒温气浴摇床恒温气浴摇床 超净工作台超净工作台 灭菌锅灭菌锅分 子 生 物 学2010实 验微量移液器分 子 生 物 学2010实 验微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。0.510l 10100l20200l 1001000l常见规格分 子 生 物

2、 学2010实 验量液的操作步骤：第一停点第二停点A 保持微量移液器垂直，将按钮压至第一停点；B 微量移液器头尖端浸入溶液，缓慢释放按钮；C 保持微量移液器垂直，将微量移液器头与容器壁接触，慢 慢压下按钮至第一停点；D 压至第二停点把溶液完全释放出；E 释放按钮回原状。 分 子 生 物 学2010实 验1 1 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。2 2 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读 数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。3 3

3、 不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。不要横放或倒拿带有残余液体吸嘴的移液器。4 4 不要用大量程的移液器移取小体积样品。不要用大量程的移液器移取小体积样品。5. 5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。量液操作注意问题：量液操作注意问题：分 子 生 物 学2010实 验台式高速离心机离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 3万转 超速：每分钟3万转以上 分 子 生 物 学2010实 验低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白，细胞器等 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开

4、低温离心技术 本实验室所用离心机:台式高速离心机（ Thermo ），配有角式转头：241.5ml；极限转速13000rpm ;台式低温高速离心机（sigma),极限转速20000rpm。离心机的功能：分离，纯化分 子 生 物 学2010实 验 1 1、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否、把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否放置平稳。放置平稳。 2 2、将离心管对称放入转子内，且要、将离心管对称放入转子内，且要事先平衡事先平衡。 3 3、锁紧门盖。、锁紧门盖。 4 4、插上电源插座，按下电源开关。、插上电源插座，按下电源开关。 5 5、设置转子号、转速、时间：、设置转子号

5、、转速、时间：（常用，最高转速为（常用，最高转速为13000r/min13000r/min，时间最长为，时间最长为20min20min）；）；注意注意：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。：对应的转子不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。 6 6、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。、当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。台式高速离心机使用步骤分 子 生 物 学2010实 验注意事项注意事项： 1 1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。 2 2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与、安放离心

6、机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与 台面接触和均匀受力，以免产生振动。台面接触和均匀受力，以免产生振动。 3 3、离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大、离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必 须对称放入。须对称放入。 4 4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停 机处理。机处理。 5 5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。、离心机彻底停止后，才可开盖，取样。分 子 生 物 学2010实 验PCR仪分 子 生 物 学2

7、010实 验PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等。PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，能使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括DNA变性、复性、延伸三个反应。分 子 生 物 学2010实 验操作程序:1）开机：打开电源，显示主界面；2）创建程序：使用”create”输入新程序（包括PCR循环数，预变性、变性、复性、延伸的时间和温 度），保存程序（包括用户名和方法名）;3）放入样品，盖上盖子;4）在所建用户名下按“run”键，找到设定的程序，按“star

8、t”键启动程序;5）运行结束后按“stop”键停止运行，取出样品，关闭 电源。分 子 生 物 学2010实 验1 1、预变性：可用、预变性：可用94949595，2 210min,10min,一般用一般用 5min5min。 2 2、变性：一般用、变性：一般用9494，30s2min,30s2min,一般一般45s1min45s1min。 3 3、退火：温度自定，、退火：温度自定，30s2min30s2min。 4 4、延伸：、延伸：7272，对于，对于(1kb=1min,(1kb=1min,每增加每增加1kb1kb加加1min)1min)。 5 5、循环数：一般、循环数：一般25253535

9、个循环个循环(2,3,4(2,3,4步循环）。步循环）。 6 6、最终延伸：、最终延伸：7272，5 515min15min。 7 7、保存：、保存：4 4，时间设为，时间设为0 0。 8 8、ENDEND。 如何设置一个如何设置一个PCRPCR程序：程序：分 子 生 物 学2010实 验FR-980生物电电泳图图像分析系统统分 子 生 物 学2010实 验系统简介：系统可以通过紫外/可见光分析装置及透光扫描仪直接获得核酸、蛋白质凝胶电泳图像。系统配置有SmartView生物电泳图像分析软件，可以进行密度扫描、密度定量、分子量计算等电泳分析。此外，该系统含有多种图像滤波器，可降低图像的噪音，从

10、而获得较清晰的图像。分 子 生 物 学2010实 验操作步骤 ：1）将电泳样品放入分析装置中2）打开电脑，运行Smart View 软件，单击“Import”键进入图像获取项目栏，选择“获取视频图像”键，进行图像采集3）选 择紫外或可见光源，在图像采集窗口中调节好图像大小、亮度及焦距4）单击“采集图像”键，根据图像质量选择好优化摄影时间（一般情况下在12秒左右），即开始采集。1、图像采集分 子 生 物 学2010实 验分 子 生 物 学2010实 验2、图像保存单击“System 键”选择“另保存图像为”键，出现一个“图像文件登记”窗口，输入标题，实验人，实验日期，实验摘要等信息，按“保存”键

11、完成图像文件登记，同时出现“另保存图像为”窗口，输入图像名，保存图像至桌面。 3、关闭操作系统（1）关闭紫外/可见光。（2）退出软件界面。（3）关闭紫外与可见分析装置的电源。分 子 生 物 学2010实 验注意事项：1、 不要戴“脏”手套触摸电脑鼠标、键盘及其它位置； 2、 不要戴“脏”手套触摸仓门和灯箱电源开关； 3、 不要戴“脏”手套触摸外接电源开关； 4、在图像获取过程中，若通过软件打开紫外/可见光，则 必须再通过软件关闭，若通过紫外与可见分析装置上打开紫外/可见光，则从分析装置上关闭，严禁互用，导致紫外灯长亮。分 子 生 物 学2010实 验电泳仪DYY-12型电脑三恒多用电泳仪（北京

12、六一仪器厂）分 子 生 物 学2010实 验操作程序：1）电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端连接（极 性不要接反）；2）打开电源，设置参数（选择稳压稳流方式及电压电 流范围）；3）按“启动”启动程序（输出为高电压，注意安全）；4）电泳结束，按“停止”键终止程序。分 子 生 物 学2010实 验注意事项注意事项 1 1、电泳仪工作时，禁止人体接触电极、电泳物及其它可、电泳仪工作时，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，以免触电，同能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，以免触电，同时要求仪器有良好接地端，以防漏电。时要求仪器有良好接地端，以防漏电。 2 2、仪器通

13、电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以、仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路。防短路。 3 3、由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳所通过的电、由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 4 4、使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常、使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外。气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外。

14、 分 子 生 物 学2010实 验使用及性能： 摇床（振荡器）广泛用于对 温度和振荡频率有较高要求 的细菌培养、发酵、杂交、 生物化学反应以及酶和组织 研究等。实验室常用的液体 摇匀，微生物、细菌和细胞 培养。恒温气浴摇床SHK-99-型台式空气恒温摇床分 子 生 物 学2010实 验1）样品瓶牢固放入弹簧夹中；2）接通电源开关，设定参数（温度、时间、转速等）；3）按启动键启动仪器，按暂停键可暂停托盘的旋转；4）按下控制面板的电源键两秒，显示屏显示消失，关闭电源总开关。操作程序：分 子 生 物 学2010实 验超净工作台使用及性能：超净工作台为分子生物学无菌操作提供可能，分为垂直送风和水平送风

15、两种。分 子 生 物 学2010实 验超净台由三相电机作鼓风动力，空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流，即所谓“高效的特殊空气”，能够防止附近空气可能袭扰而引起的污染，同时也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。工作人员就在这样的无菌条件下操作，可以保持无菌材料在转移接种过程中不受污染。 分 子 生 物 学2010实 验台面清洁消毒紫外灯灭菌紫外灯灭菌3030分钟分钟进行无菌操作清理工作台面紫外消毒30分钟关闭紫外灯、电源操作程序：1）工作台面上，不要存放不必要的物品，以 保持工作区内的洁净气流不受干扰。2 2）操作时

16、一定注意关掉紫外，防止对实验人员造成伤害注意事项：分 子 生 物 学2010实 验灭菌锅使用及性能：细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌；对于经过导入DNA重组分子的菌株，操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理 。分 子 生 物 学2010实 验1）开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没至板上；2）通电：打开控制面板上电源开关，若水位低则红灯亮； 3）堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过200mm100mm100mm为宜，各包装之间留有间隙，利于蒸汽穿透，提高灭菌效果； 3）密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，压紧锅盖；4）灭菌：121， 20min；如为液体，液体必须装在可耐高温的玻璃器皿中，不宜超过2/3；5）灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气。操作程序：分 子 生 物 学2010