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1、T细胞亚群结果的解读山东省聊城市人民医院ICU 吴铁军淋巴细胞分化图u按T细胞所处的活化阶段初始T细胞（naive T cell）效应T细胞（effector T cell）记忆性T细胞（memory T cell）u按T细胞表面受体（TCR） 分类 + T细胞 + T细胞u按T细胞CD4和CD8分子表型CD4+ T细胞CD8+ T细胞 u按T细胞的功能分类 Th（辅助T细胞）TS（抑制T细胞）Tr（调节T细胞）T淋巴细胞的分类方法外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴细胞CD4T淋巴细胞CD8T淋巴细胞淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合血液分析常规检
2、测依据白细胞、淋巴细胞比例 及计数绑定机体免疫状况， 无法精确判断。T淋巴细胞亚群 比例检测 临床常用，但较片面T淋巴细胞亚群数量观察免疫细胞数值变化，评估 免疫状况，通常采用流式细胞 仪法，特别针对CD4的检测，已 成为“金标准”。功能、数量、比 例结合更精确评估机体免 疫状态1234目前临床主要可以做以下项目的检测n淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数nT细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值）nMHLA-DR（单核细胞HLA-DR)nCD4CD25Treg（调节细胞）及Th17细胞（我们工作）目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目项项 目百分含量（ %淋巴
3、细细 胞）Total B lymphocyte (CD19+)5-18%NK cell (CD3- /CD16+56+)7-40%Total T lymphocyte (CD3+)50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+)27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)健康中国人参考范围项项 目百分含量（ % T淋 巴细细胞 ）绝对绝对 含量 （ cells/ L）Total T lymphocyte (CD3+)770-2041Thelper/inducer cel
4、l (CD3+/CD4+ /CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytot oxic cell (CD3+/CD4- /CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8 + cell0.5-4.0%6-56CD4+、 CD8+ T淋巴细胞的计数方法一（FCM)n取100l全血，加三种不同荧光素标记的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb，阴性对照。n加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。n用PBS洗1次，PBS重悬细胞，上机检测。nFCM分析 电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。简单、快速、相对精确nCD3+T细胞正常范围为：50-84%nCD4+T细胞
5、正常范围为： 27-51% nCD8+T细胞正常范围为： 15-44%nCD19+B细胞正常范围为：5-18%n与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后 乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度 。CD4T淋巴细胞的计数方法二（推算 ）不精确、繁琐省钱举例如下患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 109 /L,淋巴细胞比例测定结果CD3 为64.9%,CD4为 32.5%,CD8为31.1%CD3细胞计数为0.63109/L64.9%0.41 109 /LCD4细胞计数为0.63109/L32.5%0.20 109 /LCD8细胞计数为0.63109/L31.1%0.19 109 /L推算单
6、核细胞人类白细胞抗原DR（ CD14/HLA-DR）nCD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞，HLA-DR为活化标志。nCD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能，30%提示免疫麻痹。也有人认为HLA-DR浓度如果连续两天低于8000AB/C可认为存在免疫麻痹。n广泛应用于临床。T淋巴细胞亚群研究研究逐年增多淋巴细胞亚群变化的常见临床意义nCD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者nCD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等nCD4CD8比值异常：比值降低：一般被称为“免疫抑制
7、”状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等比值增高：表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应15The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.脓毒症休克期存在免疫麻痹存在免疫麻痹的
8、Septic患者死亡率大大增加100名septic患者28天死亡无免疫麻痹免疫麻痹脓毒症休克患者T淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱存活与死亡Septic中T淋巴细胞亚群的变化一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 13461357严重多发伤患者免疫细胞的变化特点CD4/CD8降低MHLA-DR降低T细胞及单核细胞 凋亡增加烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点n烧伤患者白细胞低于正常组n早期CD3、CD4、CD8细胞计数 均明显下降。nHLA-DR表达降低。nCD4/CD8比值下降。CD4T细胞亚群新分类：Th1
9、 、Th2 、Treg 、Th17我们的研究抗炎细胞Treg及其分泌的抗炎介质IL-10；促炎细胞Th17 及分泌的促炎介质IL-17、IL-6在人体的炎性免疫稳态中 发挥重要作用。23中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.结论一：脓毒症患者中Treg明显升高，表明抗炎反应的增强24结论二：在脓毒症患者中Th17表达明显升高吴铁军,亢翠翠, 中华急诊医学杂志, 2012, 21(04): 378-380.脓 毒 症 组对 照 组脓毒症患者中Th17表达明显升高，提示促炎反应的增强。25重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡淋巴细胞Ag-NoR在健康组中的表达
10、淋巴细胞Ag-NoR在Sepsis组中的表达吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志, 2010, 09(04): 416-418.脓毒症组对照组重症脓毒症患者存在免疫麻痹中国急救医学杂志, 2011, 31(9): 836-838.CD14+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR) 表达情况对 照 组脓 毒 症 组27T淋巴细胞亚群的研究越来越多某种T细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免疫功能是处于什么状态。 T细胞亚群的表达受多种因素影响 常“变幻莫测”，因此T细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态监测更有意义。严重脓毒症存在免疫紊乱，T淋巴细胞的凋亡，与预后有一定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。总结
