红细胞检验的基本方法

上传人:mg****85 文档编号:50566887 上传时间:2018-08-08 格式:PPT 页数:64 大小:1.44MB
返回 下载 相关 举报
红细胞检验的基本方法_第1页
第1页 / 共64页
红细胞检验的基本方法_第2页
第2页 / 共64页
红细胞检验的基本方法_第3页
第3页 / 共64页
红细胞检验的基本方法_第4页
第4页 / 共64页
红细胞检验的基本方法_第5页
第5页 / 共64页
点击查看更多>>
资源描述

《红细胞检验的基本方法》由会员分享,可在线阅读,更多相关《红细胞检验的基本方法(64页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

1、红细胞检验的基本方法叶云血液学教研室 叶云 1.来源 2.形态 3.功能红细胞红细胞 红细胞疾病 1.缺铁性贫血 2.巨幼贫 3.溶贫 4.其他IDA blood smear本章 概况 1.有关铁指标、叶酸和维生素B12的检验 。 2.红细胞膜缺陷、酶缺陷的检验。 3.血红蛋白异常的检验。 4.PNH的检验。 5.免疫性溶血的检验。铁指标检验的几个概念 1.血清铁(serum iron )。 2.血清转铁蛋白(serum transferrin)。 3.血清铁蛋白(serum ferritin)。 4.血清总铁结合力(TIBC)。 5.转铁蛋白饱和度。1.原理一、 SI(serumSI(ser

2、um iron) iron)的测定的测定SF PH+还原剂 Fe2+显色剂络合物 2、参考值:成年男性11.631.3molL 成年女性9.030.4molL3、临床评价: 降低:见于缺铁性贫血(IDA)、慢性失血和感染等。 增高:见于肝疾病、铁粒幼细胞贫血、慢性溶血和反复输血等。1、原理:二、 SF(serumSF(serum ferritinferritin) )的测定的测定(125I标记SF+待测血SF)+定量抗体 125I 复合物1+复合物2125I标记SF+定量抗体 125I复合物3成人男性15200gL,女性12150gL , 小儿低于成人;2、参考值:3、临床评价:降低:见于ID

3、A早期、失血、慢性贫血等。 增高:见于肝疾病、血色病、急性感染和恶性肿瘤等。三、 TIBCTIBC测定测定1、原理:1.过量铁标准液+血清SF 2.SF PH+还原剂Fe2+显色剂有色络合 物TIBC:男性5077molL女性54 77molL UIBC:25.151.9molL2、参考值:3、临床评价: 增高:见于IDA和红细胞增多症等。 降低或正常:见于肝疾病、恶性肿瘤、溶血性贫血、慢性感染和肾病综合征等。1、原理:当体内缺铁时,铁蛋白的利用加快,肠道 对铁吸收也增加。口服放射性59Fe,测定 体内59Fe 放射性量比率的变化,可推算出 铁吸收率。2、参考值:3、临床评价:增加:见于IDA

4、,可高达5080。 降低:见于肠道吸收不良综合征。 正常:见于正常人、再障、巨幼细胞贫血、急性失血等。正常值:26.035.0四、铁吸收率测定五、血清转铁蛋白测定1、原理:免疫散射比浊法:利用抗人转铁蛋白血清与 待检测的转铁蛋白结合形成抗原抗体复合物 , 其光吸收和散射浊度增加,与标准曲线比较 , 可计算出转铁蛋白含量。2、参考值: 免疫散射比浊法为28.651.9molL。增高:见于IDA和妊娠。 降低:常见于肾病综合征、肝硬化、恶性肿瘤、炎症等。3、临床评价:1、原理:六、血清转铁蛋白受体测定双抗体夹心法。1.血清中转铁蛋白受体+抗体2.抗原抗体复合物+酶抗体;3.加入底物和显色剂,其颜色

5、的深浅与转铁 蛋白受体的量成正比。2、参考值:以不同浓度标准品的吸光度值绘制标准曲线 , 通过标准曲线查出未知标本的转铁蛋白受体 水平。3、临床评价:升高:常见于缺铁性贫血和溶血性贫血。 降低:见于再障、慢性病贫血、肾功能衰竭等 。 用于临床观察骨髓增生状况和治疗反应。小低贫的初步诊断1.HGB(g/L) 男性120 女性110 2.HCT 0.35 男性0.40 女性 3.RBC (1012/L) 男性4.0 女性3.5 4.MCV(fl) 80 fl=10-15L 5.MCH (pg)27 pg=10 12g 6.MCHC 0.32血清铁指标检验的应用小细胞低色素性贫血的鉴别铁 总铁结合力

6、 铁饱和度 铁蛋白缺铁贫 减低 增高 减低 减低 地贫 正常 正常 正常 正/高 慢感贫 减低 正/低 减低 增高 铁粒贫 增高 减低 增高 增高体积不同红细胞的形态第二节 叶酸和维生素B12 的检验一、血清和红细胞叶酸测定二、血清维生素B12测定三、血清维生素B12吸收试验四、血清内因子阻断抗体测定1、原理:一、血清和红细胞叶酸测定叶酸测定(measurement of folacin)RIA, 核素+叶酸放射碘叶酸化合物。2、参考值: 血清叶酸:成年男性8.6123.8nmolL 女性7.9320.4nmolL 红细胞叶酸:成人3401020nmolL红细胞3、临床评价:红细胞与血清中的叶

7、酸浓度相差几十倍,当 未发生巨幼细胞贫血时,红细胞叶酸测定对 判断叶酸缺乏尤其有价值。叶酸减低:巨幼细胞贫血,红细胞过度增生(如溶贫、骨髓增生性疾病等)。1、原理:二、血清维生素B12测定RIA法,用抗氧化剂和氰化钾在碱性环 境下(pH12),将人血清中的维生素B12从 载体蛋白中释放出来。加入57Co 标记的维生 素B12,与固定在微晶纤维颗粒上纯化的维生 素B12结合物竞争结合,检测其放射活性,其 量与受检血清的维生素B12含量成反比,与标 准管作对照,换算出维生素B12含量。2、参考值:成人148660pmolL3、临床评价:降低:增高:白血病患者 真性红细胞增多症 恶性肿瘤和肝细胞损伤

8、巨幼细胞贫血。1、原理:三、血清维生素B12吸收试验给受检者口服放射性核素57Co标记的维生素 B120.5g,2小时后肌注未标记的维生素B12 1mg,收集24小时尿测定57Co排出量。2、参考值: 正常人73、临床评价:巨幼细胞贫血7 恶性贫血51、原理:四、血清内因子阻断抗体测定用57Co标记的维生素B12与血清中的内因子结 合,形成57Co标记的维生素B12内因子复合 物;当存在内因子抗体时,形成的复合物的 量减少。检测其放射活性,与阳性对照管进 行比较,可得知内因子抗体的存在。2、参考值:阴性:正常人,比值1.000.10 阳性:比值阳性对照血清比值0.10 3、临床评价: 内因子阻

9、断抗体阳性:多见于由维生素B12 缺乏引起的巨幼细胞贫血、恶性贫血等。第三节 溶血的检验一、红细胞寿命测定二、血浆游离血红蛋白检测四、血浆高铁血红素白蛋白检测三、血清结合珠蛋白检测五、尿含铁血黄素试验六、尿卟啉检测1、原理:一、红细胞寿命测定红细胞寿命测定(erythrocyte life span determination)是将放射性核素(51Cr)标记 的红细胞注入血循环后,逐日观察其消失率, 记录成活曲线,计算出红细胞寿命。2、参考值:半寿期为2532天3、临床评价:红细胞寿命缩短: (1)溶血性贫血,约为14天。 (2)再生障碍性贫血,约为1529天。溶血的检验1.血浆(plasma

10、):血液中除去红细胞、白 细胞、血小板的无形成分,含有除钙离 子外其他所有凝血因子。 2.血清(serum):血液自然凝固后分离出来 的淡黄色液体,缺少某些凝血因子(、 、因子)。plasma and serumplasma and serum 四、血浆高铁血红素白蛋白检测高铁血红素白蛋白+硫化铵 铵血色原 用光谱仪在绿光区558nm 处有一最佳吸收区带 。2、参考值:正常人呈阴性血管内溶血时,血浆中游离血红蛋白大量增 加,血浆中可检测出高铁血红素白蛋白。3、临床评价:1、原理1、原理五、血清结合珠蛋白(Hp)测定1.待侧血清+Hb液Hp-Hb复合物+未结合Hb。 2.电泳分离出Hp-Hb复合

11、物。2、参考值:电泳法 0.51.6g/L3、临床评价: 1.减低:常见于各种溶血,尤其是血管内溶 血。排除严重肝病及传单。 2.增高:感染、SLE、创伤、恶肿、妊娠等 。1.原理六、尿卟啉检测尿中卟啉类物质在酸性条件下,经乙醚提取 ,于405nm处显红色荧光,从而可对尿卟啉 进行定性检测。2、参考值:正常人呈阴性3、临床评价: 增加:先天性红细胞生成性卟啉病、迟发性 皮肤型卟啉病、肝红细胞生成型卟啉病等。 对缺铁性贫血、铅中毒、铁粒幼细胞贫血和 珠蛋白生成障碍性贫血等的诊断有一定价值 。1、原理: 五、尿含铁血黄素试验又称Rous试验。当血红蛋白通过肾滤过时, 部分铁离子以含铁血黄素的形式沉

12、积于上皮 细胞,并随尿液排出。尿中含铁血黄素是不 稳定的铁蛋白聚合体,其中的高铁离子与亚 铁氰化钾作用,在酸性环境下产生普鲁士蓝 色的亚铁氰化铁沉淀。尿沉渣肾小管细胞内 外可见直径13m的蓝色颗粒。2、参考值:正常人呈阴性3、临床评价: 阳性提示慢性血管内溶血,尿中有铁排出 。无论有无血红蛋白尿,只要存在慢性血 管内溶血如PNH,本试验结果即呈阳性, 并可持续数周。 溶血初期,虽然有血红蛋白尿,此时本试 验可呈阴性反应。第四节 红细胞膜缺陷的检验一、红细胞渗透脆性试验二、自身溶血试验及其纠正试验三、红细胞膜三磷酸腺苷活性测定四、酸化甘油溶血试验五、高渗冷溶血试验六、红细胞膜蛋白电泳分析1.原理

13、一、红细胞渗透脆性试验渗透脆性试验(osmotic fragility test)检测红细 胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在 低渗盐溶液中,当水渗透其内部达一定程度时 ,红细胞发生膨胀破裂。2、参考值:简易半定量法 开始溶血:75.282.1mmolL(4.44.8gL)NaCl 完全溶血:47.954.7mmolL(2.83.2gL)NaCl3、临床评价:脆性增加:遗传性球形红细胞增多症、椭圆 形红细胞增多症和部分自身免疫性溶血性贫 血。 脆性降低:珠蛋白生成障碍性贫血、血红蛋 白C、D、E病,低色素性贫血、肝疾病等。1、原理:二、自身溶血试验及其纠正试验红细胞在37孵育48小时,其

14、间由于膜异常 引起钠内流倾向明显增加,ATP消耗过多; 或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等 原因可导致溶血,称为自身溶血试验。在孵 育时,加入葡萄糖或ATP作为纠正物,观察 溶血可否有一定的纠正,称为纠正试验。2、参考值:正常人红细胞孵育48小时,不加纠正物的溶血 率3.5,加葡萄糖的溶血率1.0,加 ATP纠正物的溶血率0.8。 3、临床评价:遗传性球形红细胞增多症自身溶血率增加 ,加入葡萄糖或ATP后明显纠正。 G6PD缺乏症等戊糖旁路代谢缺陷的病 人自身溶血率增加,能被葡萄糖纠正。 丙酮酸激酶缺乏症时不能利用葡萄糖产生 ATP ,其自身溶血率明显增加,加葡萄糖不 能纠正,加ATP可

15、纠正。 获得性溶血性贫血或自身免疫性溶血时试 验结果常各有不同,对诊断意义不大。 本试验不够敏感和特异,仅对遗传性球形 红细胞增多症有较大诊断价值.二、自身溶血试验及其纠正试验1、原理:三、红细胞膜三磷酸腺苷活性测定NaKATP酶、Ca2Mg2ATP酶和Mg2 ATP 酶都是红细胞膜上的ATP酶。为测定酶 的活性可分别测定酶作用于ATP的水解产物无 机磷含量,若在基质中只加入Ca2Mg2 ATP酶可测定Ca2Mg2ATP酶的活性,若 在基质中加入Na、K、Mg2和ATP,测定的 为NaKATP酶和Mg2ATP酶的共同含量 ,再在基质中加入NaKATP酶的抑制剂 ,测定结果仅为Mg2ATP酶活性,两者的差 为NaKATP酶活性。2、参考值:红细胞膜NaKATP酶:(2.930.67)mU109 红细胞Ca2Mg2ATP酶:0.42.5molL1mg 膜蛋白h13、临床评价: 遗传性球形红细胞增多症:NaKATP酶活 性增加,Ca2Mg2ATP酶活性减低。 蚕

展开阅读全文
相关资源
正为您匹配相似的精品文档
相关搜索

最新文档


当前位置:首页 > 生活休闲 > 科普知识

电脑版 |金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号