生殖道支原体诊治专家共识的解析

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1、生殖道支原体诊治专家共识的生殖道支原体诊治专家共识的 解析解析n n泌尿科泌尿科/ /男科男科 n n 非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎NGUNGU 属于性病属于性病 n n UUUU是是NGUNGU的致病原的致病原 n n UUUU感染必须治疗感染必须治疗 关于支原体的经典观点关于支原体的经典观点n n妇产科妇产科 n n 观点观点1 1：UUUU与宫颈炎与宫颈炎 等多种疾病相关，应该等多种疾病相关，应该 予以治疗予以治疗 n n 观点观点2 2：UUUU的正常携的正常携 带率很高，如果没有炎带率很高，如果没有炎 症表现，应视为正常携症表现，应视为正常携 带，不必治疗带，不必治疗一个良好的平台一

2、个良好的平台n n 中国性学会性医学专业委员会生殖道感染学组中国性学会性医学专业委员会生殖道感染学组 n n 参加者参加者 妇产科医生妇产科医生 泌尿科医生泌尿科医生 男科医生男科医生 生殖医学医生生殖医学医生 皮肤性病科医生皮肤性病科医生 感染疾病专业医生感染疾病专业医生 生殖道感染沙龙生殖道感染沙龙- -对支原体致病性的讨论对支原体致病性的讨论支原体诊治专家共识支原体诊治专家共识 支原体的分类支原体的分类 支原体科支原体属脲原体属人型支原体解脲支原体生殖支原体微小脲原体解脲脲原体全国广泛检查的支原体全国广泛检查的支原体 n n解脲脲原体解脲脲原体 n n Ureaplasma urealy

3、ticumUreaplasma urealyticum，Uu Uu n n 解脲脲原体是仅有的人源种，它有解脲脲原体是仅有的人源种，它有2 2个生个生 物型和至少物型和至少1414个血清型个血清型 n n 其中其中1 1、3 3、6 6、1414型仅含型仅含17KDa17KDa多肽（多肽（B B 群）群） n n 其它型还包括其它型还包括16KDa16KDa多肽（多肽（A A群）群） 微小脲原体微小脲原体 n n20012001年年Janet A RobertsonJanet A Robertson提出将提出将B B群从群从 原来的原来的UUUU中分离出来作为一个新种中分离出来作为一个新种 n

4、 n 微小脲原体微小脲原体 n n Ureaplasma Parvum Ureaplasma Parvum 为什么把微小脲原体作为新种？为什么把微小脲原体作为新种？ n nDNADNA杂交杂交 n n A A、B B两群间的同源性在两群间的同源性在49-52% 49-52% n n 群内的基因同源性高于群内的基因同源性高于70% 70% n n 基因组大小基因组大小 n n A A群群840-1140kbp 840-1140kbp n n B B群群769kbp 769kbp n n 16SrRNA 16SrRNA n n A A、B B群间差异大于群间差异大于1.1% 1.1% n n 群群

5、在我国，在我国，UUUU大多依靠培养法检测大多依靠培养法检测n nUU UU n n 液体培养基：变色因液体培养基：变色因 为尿素水解产氨导致为尿素水解产氨导致 pHpH值上升值上升, ,酚红变色酚红变色 n n 琼脂平板培养：菌落琼脂平板培养：菌落 直径直径15-30m15-30m，褐色，褐色 颗粒状丛状菌落颗粒状丛状菌落 n n 不能区分不能区分UpUp与与Uu Uu 如何区分如何区分UpUp和和UuUu ？ n n生物学特性生物学特性 n n UpUp的生长周期稍的生长周期稍 长于长于UuUu（ 30h/22h) 30h/22h) n n 液体培养基液体培养基pHpH值值 达到达到7.5

6、,Uu7.5,Uu需要需要 13h,UP13h,UP需要需要20h 20h n n 基因分析基因分析 n n UpUp基因组小基因组小 n n 可采用可采用16SrRNA16SrRNA 的序列进行核酸分的序列进行核酸分 析析 n n菌落形态完全菌落形态完全 一致一致 n n采用培养法临采用培养法临 床区分困难床区分困难 n n核酸分析是唯核酸分析是唯 一的方法！一的方法！ 为什么要区别为什么要区别UpUp和和UuUu？ n n UpUp常常见于正常人携带常常见于正常人携带 n n 北京体检人群北京体检人群261261例例, ,宫颈采样，培养法宫颈采样，培养法/PCR /PCR n n UuUu

7、阳性阳性159159例（例（60.9%60.9%） n n U. parvumU. parvum群群-95.0% -95.0% n n 以以1 1、3 3、6 6型单纯感染为主型单纯感染为主(90.1%)(90.1%)。 n n 目前的证据尚不能做出结论目前的证据尚不能做出结论UpUp的致病性弱于的致病性弱于Uu Uu n n 有待更大样本的研究有待更大样本的研究 刘朝晖等刘朝晖等. .中国实用妇科与产科杂志中国实用妇科与产科杂志.2003,19(3):161-163.2003,19(3):161-163人型支原体人型支原体 在有氧及无氧环境中均能生长，生长除胆固在有氧及无氧环境中均能生长，生

8、长除胆固 醇外，尚需要精氨酸。醇外，尚需要精氨酸。 液体培养基下呈球形，双球形及丝状体，球液体培养基下呈球形，双球形及丝状体，球 形者直径为形者直径为300300800nm800nm。 目前至少目前至少7 7个血清型。个血清型。 人型支原体寄居于生殖道，性成熟女子子阴人型支原体寄居于生殖道，性成熟女子子阴 道后穹隆或阴道中常有携带，男性尿道携道后穹隆或阴道中常有携带，男性尿道携 带率低。带率低。 生殖支原体生殖支原体 （Mycoplasma. Mycoplasma. genitaliumgenitalium） n n最小：最小：0.3 - 0.5 0.3 - 0.5 m m n n 无细胞壁；

9、无细胞壁； - - 对青霉素、头孢对青霉素、头孢 菌素等具有抗性菌素等具有抗性 n n 烧瓶状，通过烧瓶状，通过 MgPaMgPa吸附蛋白粘吸附蛋白粘 连在宿主细胞上连在宿主细胞上 MGMG研究历程研究历程 19811981年年- -首次从非淋菌性尿道炎（首次从非淋菌性尿道炎（NGUNGU）的男性病人中分离）的男性病人中分离 出出 - - 生长极其缓慢（生长极其缓慢（ 5050天）天） - - 分离相当困难分离相当困难 n n19901990年年- - 随着随着PCRPCR技术的发展，研究者开始进行技术的发展，研究者开始进行MGMG相关相关 疾病研究疾病研究 n n19951995年年- -

10、基因组测序完成，当时已知基因组测序完成，当时已知 的的n n最小基因组（最小基因组（580kbp580kbp）n nHimmelreich, 1995 Himmelreich, 1995 MGMG的诊断方法的诊断方法 n n MgMg对培养基要求极高且生长缓慢对培养基要求极高且生长缓慢, ,培养较难培养较难, ,尤其是临床尤其是临床 标本中标本中MgMg的培养更不容易成功的培养更不容易成功 Tully1981Tully1981年建立了对医学支原体具有重要意义的年建立了对医学支原体具有重要意义的SP-4SP-4培培 养基养基. . n n SP-4SP-4培养基培养基, ,不含醋酸铊不含醋酸铊,

11、 ,含含MgMg代谢所需的葡萄糖及其它代谢所需的葡萄糖及其它 营养成份营养成份, ,最适最适pHpH为为7.4-7.5,7.4-7.5,可通过加入可通过加入0.8%Noble0.8%Noble琼琼 脂或脂或0.50.6%0.50.6%琼脂而固体化琼脂而固体化, ,用于克隆菌株用于克隆菌株, ,观察菌落观察菌落 ,Tully,Tully等利用这种培养基等利用这种培养基, ,从从1313份尿道分泌物标本中分离份尿道分泌物标本中分离 培养获得培养获得2 2株株Mg,Mg,培养期约为培养期约为5050天天. . 由于分离培养困难，周期长，营养条件要求高，阳性率低，由于分离培养困难，周期长，营养条件要求

12、高，阳性率低， 所以很少人再研究涉及，经过数年无人过问所以很少人再研究涉及，经过数年无人过问 直到直到PCRPCR技术问世，生殖支原体的研究才重新开始技术问世，生殖支原体的研究才重新开始 生殖支原体生殖支原体 采用组织细胞培养支原体，可为支原体提供采用组织细胞培养支原体，可为支原体提供 良好的类似体内的生长环境良好的类似体内的生长环境 9090年代，年代，JensenJensen等开始尝试用细胞培养法等开始尝试用细胞培养法 来进行来进行MgMg的繁殖，并借此在电镜下观察到的繁殖，并借此在电镜下观察到 MgMg侵入细胞的过程以及在细胞内的定位侵入细胞的过程以及在细胞内的定位 生殖支原体检测生殖支

13、原体检测 根据根据MgMg的免疫学特性，人们建立了用检测的免疫学特性，人们建立了用检测MgMg抗体抗体 和检测与鉴定和检测与鉴定MgMg抗原的血清学方法抗原的血清学方法 n n Taylor-RobinsonTaylor-Robinson等报道应用间接等报道应用间接MIFMIF检测检测 NGUNGU患者患者MgMg抗体，认为间接抗体，认为间接MIFMIF试验是一种具有试验是一种具有 足够敏感性、特异性和简便易行的检测方法足够敏感性、特异性和简便易行的检测方法 n n JensenJensen等曾用等曾用EIAEIA检测有尿道炎症与无尿道炎症检测有尿道炎症与无尿道炎症 状的男性状的男性STDST

14、D患者急性期血样标本中患者急性期血样标本中MgMg抗体，结抗体，结 果发现反应性较弱，且与果发现反应性较弱，且与MpMp存在广泛的交叉反应存在广泛的交叉反应 生殖支原体检测生殖支原体检测 n n NAATNAAT是是研究研究MgMg的最常用手段的最常用手段 n n DNADNA探针斑点杂交探针斑点杂交 n n PCR PCR n n RNA RNA n n 生殖支原体粘附蛋白生殖支原体粘附蛋白PaPa基因为靶基因设计的引物基因为靶基因设计的引物 n n mgPa-476mgPa-476：5 5 ATG GCG AGC CTA TCT TTG ATC CTT TAA 3ATG GCG AGC C

15、TA TCT TTG ATC CTT TAA 3 n n mgPa-1 5AGA TGA TGA AAC CCT AAC CCC TTG G3 mgPa-1 5AGA TGA TGA AAC CCT AAC CCC TTG G3 n n 生殖支原体生殖支原体16SrRNA16SrRNA基因为靶基因设计的引物基因为靶基因设计的引物 n n Mg-1Mg-1，5 5 GAA TGA CTC TAG CAG GCA ATG GCTG3GAA TGA CTC TAG CAG GCA ATG GCTG3 n n Mg-2Mg-2，5 5 ATT TGC TGC TCA CTT TTA CAA GTT GGCT3ATT TGC TGC TCA CTT TTA CAA GTT GGCT3 泌尿生殖道支原体存在无症状携带泌尿生殖道支原体存在无症状携带 泌尿生殖道支原体存在无症状携带泌尿生殖道支原体存在无症状携带 支原体在泌尿生殖道存在定植现象，人群中存在着支原体在泌尿生殖道存在定植现象，人群中存在着 相当数量的支原体携带者而没有症状和体征，以相当数量的支原体携带者而没有症状和体征，以 UUUU最为突出。