《全血胆碱脂酶测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《全血胆碱脂酶测定（24页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、全血胆碱酯酶活性的测定三氯化铁比色法有机磷农药的简单回顾全血胆碱酯酶活性测定概述三氯化铁比色法有机磷农药 organophosphorous pesticide接触机会生 产施 用食 物误 服、自 杀毒作用机制抑制体内胆碱酯酶（ChE）活性使体内乙酰胆碱大量积聚，引发神经系统功能紊乱乙酰胆碱胆碱酯酶有机磷农药诊 断职业急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准(GBZ-2002) 职业史 现场职业卫生调查 临床症状体征 实验室检查全血胆碱酯酶（ChE）活性诊断分级标准全血ChE活性范围 急性轻度中毒-50%-70% 急性中度中毒-30%-50% 急性重度中毒-30%以下实验目的 加深对有机磷农药中毒机制的认
2、识 掌握全血ChE活性测定的意义 掌握全血ChE活性测定原理、方法意 义 有机磷农药中毒的重要诊断指标 中毒者治疗后的效果观察指标 接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标方 法 Asch-DTNB比色法（GBZ52） 三氯化铁比色法 溴麝香草酚蓝（BTB）比色法 纸片法 Biocheck法（便携式分析仪）三氯化铁比色法原理乙酰胆碱胆碱酯酶胆碱+乙酸碱性羟胺乙酰羟胺 HClFeCl3 羟肟酸铁(棕红色络合物 )器材 刺针 一次性自控式微量吸管（20l） 分光光度计 恒温水浴箱（370.5 ）试剂 磷酸盐缓冲液（PH=7.20） 碱性羟胺溶液 12盐酸溶液 10%三氯化铁溶液 乙酰胆碱标准应用液
3、（1ml含4mol）分析步骤1. 乙酰胆碱标准曲线的绘制2. 样品测定1.乙酰胆碱标准曲线的绘制 （1）取六只具塞试管，配制乙酰胆碱标准色列管号123456乙酰酰胆碱标标准应应 用液（ml）00.20.40.60.81.0水（ml）111111磷酸盐缓盐缓 冲液（ ml）10.80.60.40.20乙酰酰胆碱含量（ mol）00.81.62.43.24.0（2）各管加碱性羟胺4ml，立即振摇3min（3）各管加12盐酸溶液2ml，振摇1min（4）各管加10%三氯化铁溶液2ml，摇匀，过滤（5）测吸光度：520nm，参比管第1管（6）绘制标准曲线2.样品测定A管（样品管）B管（对照管）0.98
4、ml磷缓0.98ml磷缓20ul血20ul血37水浴 5min碱性羟胺4ml,振3min 乙酰胆碱标准应用液1ml乙酰胆碱标准应用液1ml37水浴 30min碱性羟胺4ml,振3min12盐酸溶液2ml,摇1min 10%三氯化铁溶液2ml摇匀、过滤、比色计 算1.被水解 的乙酰胆碱吸光度=对照管吸光度（B管）样品管吸光度（A管）2.查标准曲线，得出被水解乙酰胆碱（ mol ）-即0.02ml血经37 ，30min反应条件下的胆碱酯酶活性绝对值C3.胆碱酯酶活性相对值（%）浙江地区健康人胆碱酯酶活性绝对值男：3.22 0.336 mol 女：3.19 0.398 mol 注意事项 采血前先准备好试管，加入磷缓 采血时严格消毒，用过的棉球、刺 针集中放置 准确控制水浴温度和放置时间 加三氯化铁显色后，在20min内比色 参比管的溶液留用到最后实验报告要求 实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果 分析与讨论
