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1、尿理学及湿化学检验医学检验系尿液pH测定l原理 PH试纸是多种指示剂适当配合的试带 ，显色范围为棕红至深黑l器材 洁净试管或尿杯。l试剂 pH广泛试纸1套(包括试带和标准色板) 。l标本 新鲜尿液。 操作l将手洗净擦干或配戴手套，取试纸1条，将其一端浸入尿液约0.5s取出自然光线下与标准色板比色读取尿液pH。 注意事项l1试带应密封、避光、干燥保存，远离酸性 和碱性物质以防失效。l2在规定时间内比色，1min内。 l3标本应新鲜，放置过久会因细菌繁殖或丧 失挥发性酸而使pH增高。尿比密测定（折射仪法）目的 熟悉折射仪的工作原理、使用及校正方法。原理 折射率与媒质的密度有关，密度越高，折射率越大
2、；其次也与光的波长及温度有关。经过大批量尿标本的研究，已经建立了折射率、比密和总固体量的经验公式，并将数字列成线图刻在目镜系列的适当位置中，测量时直接读数即可。器材 临床折射计，尿杯、吸水纸、滴管、镊子。 标本 新鲜尿液。操作零点校准 每次测试前必须用纯净水进行零 点校准：向标本室中加入足够的蒸馏水，轻微 调节旋转螺丝使边界线重合在1.000刻线上。标本测定程序 拭干标本室和标本盖上的蒸 馏水，在标本室内滴入足够的尿液，通过接目 镜读取数值或查表得出结果。 注意事项l1用过的滤纸、棉球等应及时焚毁，以免污 染环境。l2尿酸盐所致的浑浊可影响结果，需要加温 溶解后再测定，切不可弃去。l3细胞等有
3、形成分增多时，应离心后测定上 清液，测试完毕后用纯净蒸馏水擦拭干净。尿蛋白测定（磺基水杨酸法）目的 掌握尿蛋白定性的磺基水杨酸法原理及操作 原理 在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不容性的蛋白盐沉淀，沉淀的程度可反映蛋白质含量。l器材 小试管、滴管、吸管l试剂 200g/l磺基水杨酸溶液l标本 人工蛋白尿操作1加尿液 取小试管2支，各加清晰尿液lml。 2加试剂 于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加试剂作空白对照，1min内观察结果 。 3判断结果 按P70表2-2判断阳性程度及蛋白质的含量注意事项1该法灵敏，极轻微反应无意义。判断结果
4、应及 时，否则会使阳性增高。 2尿液偏碱时(pH9)，磺基水杨酸法可呈假阴性 ；尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。应 先将尿液PH值调到56。 3含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假 阳性，但其反应与蛋白尿不同，应仔细观察并结 合用药情况综合分析。 4尽量指导患者采集中段尿，或离心后测定。l原理：根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖 氧化酶特异性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和 过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下， 使指示剂氧化而呈现颜色变化。l标本：新鲜尿l器材：一次性尿杯、尿糖试纸尿葡萄糖定性检查 （一）尿糖试纸法操作l、将试纸的试垫区浸入样本中约秒钟，并 将其取出l、让试纸的边
5、缘沿着样本容器口轻轻撩拭， 以去除残余的尿液l、横握试纸，在秒内与瓶签上的 比色图谱比较，记录结果。试纸与标准色版相 同颜色即为尿样的尿糖值，如反应颜色在两个 标准色版颜色之间，则该尿样的尿糖值也介于 两者之间。注意事项l、用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快检 测，尿样在室温下的放置时间不可超过小时 ，否则应将尿样保存在冰箱中并在 小时内检测，不要在尿样中加防腐剂，尿样不 可离心，测试前要将尿样混匀。注意事项l、温度越低，反应所需要的时间要相应延长l、尿糖浓度时通过试纸由蓝色棕色的颜色变 化来指示，蓝色为无尿糖，棕色越深，尿糖越 高。l（二）班氏法（讲解）l目的 掌握班氏法原理方法l原理 葡萄
6、糖或其他还原性的糖的醛基在热硷 性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为 黄色的氢氧化铜，进而形成红色氧化亚铜沉淀l器材 试管架、中试管、滴管、试管夹、酒精 灯l试剂 班氏试剂操作1鉴定班氏试剂质量 取中号试管1支，加入 班氏试剂2.0ml，摇动试管徐徐加热至沸腾， 观察试剂有无颜色及性状变化，若试剂仍为透 明蓝色，可进行以下实验。 2加尿液 向班氏试剂中加离心后的尿液 0.2ml(约4滴)，混匀。 3加热煮沸 继续煮沸12min，或置沸水浴 5min，自然冷却。 4判断结果 注意事项1试剂与尿液的比例为10：1。2煮沸时应不时摇动试管以防爆沸喷出，也可 在沸水浴中实验。3检验糖尿病患者尿液中
7、葡萄糖，应空腹或餐 后2h留取尿标本。目的 掌握改良Rothera法尿酮体定性的方法。原理 亚硝基铁氢化钠Na2Fe(CN)52H2O遇尿分解为 Na4Fe(CN)6、NaNO2、Fe(OH)3和Fe(CN)53- 如尿中存在可 检出量的酮体(丙酮、乙酰乙酸)，在碱性环境中即与试剂 作用生成异硝基(HOON=)或异硝基胺(NH2OON=)，后者 与Fe(CN)53-生成紫红色化合物。 器材 试管或载玻片、药匙、滴管。试剂 Rothera试剂。标本 新鲜尿液。尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）l操作l1加入酮体粉 于载玻片上(或试管内)，加 入1小勺酮体粉。l2加尿液 滴加尿液于酮体粉上，至完全将 酮体粉浸湿。l3观察结果 观察酮体粉的颜色变化，5min 内出现紫色者为阳性。l4判断结果 判断结果的标准见P76表2-5。尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）作业l1.列表比较湿化学法与试带法的不同l2.列表说明4个实验的影响因素
