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1、第七章 革兰阴性球菌第一节 奈瑟菌属革兰阴性双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛 对人致病：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌N. N. meningococcusmeningococcus Neisseria gonococcus 脑膜炎奈瑟菌临床意义致病物质脂多糖、荚膜、菌毛、内毒素所致疾病普通型暴发型慢性败血症型2.三种临床类型1.流行性脑脊髓膜炎我国A群为主菌毛、外膜蛋白、 蛋白水解酶、脂多 糖、铁调节蛋白淋病人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症新生儿 淋菌性结膜炎 新生儿由产道感染， 1%硝酸 银滴眼。致病物质淋病奈瑟菌临床意义1.形态染色 革兰阴性双球菌 直径0.61
2、.5m 形似双肾或咖啡豆样， 凹面相对 无动力，无芽胞，某些菌种形成荚膜三、生物学特性2培养特性 需在培养基中添加羊血、兔血或血清。 需氧生长，初次分离需57%CO2和高湿度。 最适生长温度为3537，低于30不生长，血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、透明或半透明、直径12mm的不溶血、圆形、灰兰色菌落。3生化特性 氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外）。 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶不同，常作为菌种间的鉴别依据。4抵抗力 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，对化学消毒剂敏感。 对青霉素敏感但近年来由质粒介导的内酰胺酶所致的耐药在淋病奈瑟菌中产生较多。 标本采集 无菌方法抽取脑脊
3、液、关节液、血液、瘀点穿 刺液等标本。 采集后立即送往实验室。 用血平板进行床边接种后置35孵育。 血液标本接种在血液培养瓶中置35孵育。 标本运送时需要35保温。标本直接检查 直接涂片检查 脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片。 皮肤瘀点渗出液涂片。 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性 双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似 脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早 期诊断。分离培养鉴定 脑脊液标本：接种在巧克力琼脂或羊血琼脂平板。 咽拭子或鼻咽拭子：接种在选择性培养基上如改良的MTM、NCY等培养基。 血液标本：经增菌培养基增菌培养后，移种至巧克力琼脂或羊血琼脂平板上。 置57%CO2
4、35孵育，每隔24h观察平板。鉴定 初步确定为奈瑟菌属直径12mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落涂片革兰染色见阴性双球菌氧化酶试验阳性 葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖类发酵阴性。 用分型血清确定血清型别。 平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报告为阴性。1检验程序2标本采集 阴道和宫颈分泌物：用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 停留1015秒时间，蘸取。 采集尿道分泌物：弃去前段脓性分泌物，留取后段作为标本。 新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物。3标本直接检查标本采集后涂片、革兰染色、显微镜检查4分离培养与鉴定 选择培养基如MTM，Martin-Lewis
5、（ML），或NYC。 置于5%CO2气体条件下3537孵育。 每隔24h观察平板。（1）形态和生化鉴定 可疑菌落 直径0.51mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴状 凸起的菌落。 确认 将菌落涂片，革兰染色见革兰阴性双球菌 氧化酶和触酶试验阳性 葡萄糖发酵试验阳性，其它糖类阴性 培养需观察72h后无菌生长可报告为阴性。（2）免疫学鉴定 直接荧光染色。 凝集试验或免疫渗滤技术。（3）分子生物学鉴定 检测靶片段的基因 隐蔽性质粒、染色体基因探针、抗淋病奈瑟 菌胞嘧啶DNA 甲基转移酶基因、透明蛋白 (opa)基因、菌毛DNA 探针、rRNA 基因探 针和porA 假基因。 基因探针杂交、核酸扩增。 卡
6、他莫拉菌（M.catarrhalis） 可存在于健康人群的上呼吸道 近十年来报道 导致中耳炎、鼻窦炎、慢性阻塞性肺炎 在免疫抑制和ICU的患者可导致菌血症 是社区呼吸道感染的主要病原体之一。 第二节 卡他莫拉菌临床分离 从中耳炎或鼻窦炎患者穿刺抽取标本 呼吸道感染患者应采取合格痰标本或支气管灌洗液 口咽部位存在卡他莫拉菌可污染痰液标本 痰液标本直接涂片革兰染色 如出现多个中性粒细胞、柱状上皮细胞以及大量的直 径为0.51.5m革兰阴性双球菌可怀疑卡他莫拉菌感 染。培养及鉴定 在血液琼脂或巧克力琼脂平板上生长良好3524h孵育后菌落直径13mm，灰白色、光 滑，用接种环推菌落可将整个菌落在平板表面 移动。 氧化酶和触酶阳性。 不发酵葡萄糖和其它糖类产酸。 大多数菌株还原硝酸盐和产生DNase。 三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶）试验阳性 可与奈瑟菌属鉴别。 可产生诱导型内酰胺酶 。奈瑟菌属和卡他布兰汉菌的鉴定复习思考题及作业题 临床送检标本如怀疑葡萄球菌属细菌感染， 应怎样处理标本并最终发出结果报告？ 临床送检标本如怀疑淋球菌，应怎样处理标 本并最终发出结果报告？
