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1、第三讲 脱毒种薯生产技术一、马铃薯脱毒技术二、脱毒种薯快繁技术三、脱毒马铃薯栽培技术一、马铃薯退化的原因1、马铃薯退化的概念马铃薯品种连续种植几代后，植株逐渐变矮、分枝逐渐减少、 叶片皱缩、向上卷曲、生长势衰退、块茎变小、产量连年下降、 最后失去种用价值，这就是通常所说的退化。2、引起退化的原因1）环境学说此学说认为马铃薯退化是由于马铃薯从冷凉的安第斯山区传 播到暑热的地方种植所至。2）生理衰退学说此学说认为马铃薯退化是由于马铃薯长期进行无性繁殖所至 。3）病毒学说此学说认为马铃薯退化是由于病毒侵染所至，退化事实上是病毒病。3、侵染马铃薯的病毒种类在世界范围内、已知侵染马铃薯的病毒约有18种，
2、类病毒一种 。 18种病毒中9种是专门寄生于马铃薯上的病毒。寄生于马铃薯病毒 其他病毒 类病毒马铃薯X病毒（PVX） 烟草脆裂病毒（TRV） 马铃薯纺锤块茎马铃薯Y病毒（PVY） 烟草坏死病毒（TNV） 病毒(PSTV) 马铃薯S病毒 （PVS） 烟草花叶病毒（TRV） 马铃薯M病毒（PVM） 烟草条纹病毒（TRV） 马铃薯A病毒 （PVA） 番茄黑环病毒（TBRV） 马铃薯卷叶毒（PVRV） 番茄斑萎病毒（TSWA） 马铃薯奥古巴花叶病毒（PVMV) 黄瓜花叶病毒（CMV） 马铃薯蓬顶病毒（PVTV） 甜菜曲顶病毒（BCTV） 马铃薯黄矮病毒（PYDV） 甜菜西方黄化病毒（BWYV）马铃薯杂
3、斑病毒二、马铃薯的病毒的脱除病毒抟播的主要因素有如下几种：（1）蚜虫传播（2）机械摩擦（ 3）其他昆虫的叮咬病毒进入植株后首先到达细胞内，在此病毒利用细胞内提 供的必要物质进行不断增殖，并向四周扩散，最后扩散到块茎 当中。块茎播种后，病毒继续侵染增殖，因此病毒可在块茎中 逐年积累。脱除病毒的方法：实生种子（TPS）的利用法茎尖组织培养茎尖组织培养的方法 （1）茎尖组织培养的原理 病毒在植株中的分布不均匀性 细胞的全能性 （2）茎尖脱毒所需要的条件 无菌操作室和控温光照室各一间。 40 双目解剖镜一架 超菌工作台一个 高压灭菌锅一个 手术剪、镊子、解剖针、配制药品的器皿 培养皿、培养瓶和试管 制
4、培养基所需无机盐、有机物和植物激素 （3）脱毒方法 选择优良品种和单株马铃薯脱毒只解决病毒病问题，不能改变品种固有特性，因此 应该选择优良品种脱毒。同一个品种个体之间，在产量上、品质上、病毒感染程度上都 有很大差异，由于脱毒后获得的无毒苗是来自一个块茎的株系， 这个株系的好坏会直接影响到将来大田生产的产量和品质。因此 要在生长期间在田间选择具有本品种特性，生育健壮、产量高的 单株用于茎尖剥离。选择不含马铃薯纺锤块茎病毒（PSTV）的单株。 取材和消毒灭菌将块茎用自来水洗净后，用75%的酒精浸泡35秒，然后用 01%升汞溶液灭菌10分钟，用无菌水洗5次。将块茎于温室内催芽播种，在苗高45厘米时剪
5、芽。 茎尖剥离和接种取01 02毫米的茎尖培养条件温度：25光照：16小时20003000lx茎尖脱毒培养基配方成分用量（mg/L）成分用量（mg/L）硝酸铵（NH4NO3） 1650 硝酸钾（KNO3） 1900 磷酸二氢钾（KH2PO4） 170 硫酸镁（MgSO47H2O） 370 氯化钙（CaCl2 2H2O） 440 硼酸 （H3BO4） 62 硫酸锰（MnSO4 4H2O） 22 3 硫酸锌（ZnSO4 7H2O） 8 6 碘化钾（KI） 0 83 钼酸钠（Na2MoO4 2H2O） 0 25 硫酸铜（CuSO4 5H2O） 0 025 氯化钴（CoCl2 6H2O） 0 025硫
6、酸铁（FeSO4 7H2O） 27 8 四乙酸钠（Na2EDTA） 37 3 甘氨酸 2 0 盐酸硫胺素（B1） 0 1 盐酸吡哆素（B6） 0 5 烟酸 0 5 肌醇 100 BA 2 0 NAA 0 05 生物素 0 051、加入23%的蔗糖。 2、加入琼脂后加热溶解趁热分装 3、121、1 1个大气压灭菌20分钟注意事项： 1、消毒要严格 2、生长点的大小很关键 3、不同品种培养基不相同 4、脱毒只解决病毒病问题三、脱毒种薯快速繁殖技术 （一）脱毒试管苗快速繁殖技术1、基础试管苗的保存基础试管苗是指用于快速繁殖的那部分苗。一部分用于繁殖， 一部分用于保存。2、试管苗快速繁殖脱毒苗只有通过
7、快繁，才能扩大数量，在生产上发挥作用。 准备培养基培养基可采用固体或者液体培养基。以MS培养基为基础， 外加20克/升蔗糖，7克/升琼脂，pH值5.8，每个培养瓶加3035 毫升固体培养基，灭菌后备用。 茎节切段在无菌操作台上取出基础苗，切成带一个节的节段，转接到 新的培养瓶中。 培养条件 温度25，光照：16小时、 20003000lx 切繁速度一般20天可切繁一次。 y=cx（二）试管薯诱导技术试管薯又叫微型薯，它是通过采用一定的培养基，在一定的 培养条件下，由试管苗直接长出的“气生”薯（即直接在叶腋中 长出的小块茎）便于贮藏和种质交换。 培养基础苗用MS培养基培养带45个叶的节段培养15
8、天。 诱导试管薯MS培养基+5毫克/升6-BA+ 500毫克/升CCC68%的蔗糖培养温度20黑暗条件 试管薯的保存和利用试管薯收获后放入瓶中，在25 下保存用途：用作基础种进行种质交换诱导时间（周）培养基中蔗糖浓度对块茎形成的影响;0%,;3%,;6%,;9%块茎形成率（%）（三）工厂化生产脱毒小薯脱毒小薯又叫脱毒原原种，要求在无病毒传播源的条件下 进行工厂化生产。所谓工厂化生产，是指在防虫温室或者防虫网室内，进行 的无土栽培、连续性生产过程，一年内可以多茬栽培多茬收获。生产程序： 培养基础苗基础苗是指试管苗移栽到育苗盘中或者试管微型薯播种出苗后， 用作剪顶、腋芽扦插用的苗。培养土：蛭石或膨
9、胀珍珠岩洗掉琼脂、注意保湿。 剪顶、腋芽扦插基础苗长到78叶时，剪顶、腋芽扦插每周喷施5%复合肥（N：P2O5：K2O=10：10：10）1次。 小薯收获扦插90天后，叶片变黄时可以收获。收获后按大小分级包装贮藏。微喷下根的生长情况（四）无毒优质种薯的生产（良繁体系的建立）脱毒小薯每公斤需几百元，由于成本太高不能直接用于大田 生产，需要扩繁34代。生产上一般采取扩繁体系如图：温、网室栽培脱毒苗网室或隔离繁殖田网室或隔离繁殖田隔离繁殖田隔离繁殖田第一年第二年第三年第四年第五年原原种一级原种二级原种一级良种二级良种生产育种单位繁殖基础种 （省原种场繁殖）合格种薯 （县、村繁种场）脱毒小薯栽培中种植
10、密度对产量的影响种植密度 每株 每株块 每m2 每m2 20g块茎率 20g块茎率块茎数 茎重 （g） 块茎数 块茎重（kg） % %3020 3.9 110.3 65.1 1.84 82.1 17.96030 3.9 160.3 21.8 0.90 85.9 14.1（五）种薯检验和定级在脱毒种薯生产的各个环节中，种薯的检验和定级是保证种薯 质量的中心环节。种薯的分级：荷兰将基础种薯分为S、SE、E三级，合格种分为A、B、C三级英国和丹麦分为四级美国和加拿大分为五级中国基础种薯分为原原种、一级原种、二级原种合格种薯分为一级种薯、二级种薯、三级种薯种薯的检验：为了保证各级种薯的质量和正确进行种
11、薯分级，各级种薯都要 由专门的机构进行检验并发给种薯质量合格证书。种薯检验除检验品种纯度、种薯材料来源、田间长势、成熟度外， 重点检验通过块茎传播的病害、尤其是病毒病。原原种要用指示植物和血清法检测PVX、PVY、PVS、PVM、 PVA，并用核酸斑点杂交法等检测PSTVd。原种田在开花前期和开花期，每公顷检测250个样品。块茎检测：每公顷的田块上，按B字型收集中等大小的块茎200个 （原种）和100个（一级良种）进行检测。种薯分级的质量标准种薯级别基础种合格种 原原种一级原种二级原种一级良种二级良种品种纯度100 100 100 99 99各种病害最大允许量（%）普通花叶病毒病 0 0 1 2 4重型花叶病毒病 0 0 1 3 5卷叶病毒病 0 0 0.5 1 3纺锤块茎病毒病 0 0 0 0 1黑胫病 0 0 0.5 1 2环腐病 0 0 0 0 0青枯病
