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1、 第十九节 消化道寄生虫的病原检查主要是根据 蠕虫的虫卵、幼虫、成虫或节片,原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊, 某些节肢动物; 可随粪便排出体外 有些虫体可在肛周产卵,绦虫孕节主动从肛门逸出过程中被挤破 、虫卵可散落在肛周, 所以,采用粪便检查或肛门周围检查寄生虫 注意: 保证粪便新鲜,一般不超过24小时 盛粪便的容器须干燥、洁净,无污染; 容器外贴有标签, 受检粪量一般为510g,或不少于30g, 要严格按照粪检程序进行操作,以免漏检 。 1. 直接涂片法 用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。方法简 便,连续作3次涂片,可提高检出率。 (1)蠕虫卵检查:滴一滴生理盐水于洁净的载玻 片,用棉签
2、棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块, 在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过涂 片约可辨认书上的字迹为宜。一般在低倍镜下 检查,如用高倍镜观察,需加盖片。应注意虫 卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状 和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵 内含卵细胞或幼虫。(2)原虫检查 活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵 。气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。必要 时可用保温台保持温度。 包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上, 以一滴碘液代替生理盐水。如碘液过多,可用吸 水纸从盖片边缘吸去过多的液体。若同时需检查 活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一 滴碘液,取少许粪便在碘液中涂匀,再盖上盖片
3、 。涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋 养体。 二、厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg(已用100目不锈钢筛除去粪渣)粪便,置于 载玻片上,覆以浸透甘油孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻 压,使粪便铺开(2025mm)。置于3036温箱中约 半小时或25约1小时。待粪膜稍干,即可镜检。玻璃纸准备:将玻璃纸剪成2230mm大小的小片,浸 于甘油孔雀绿溶液(含纯甘油100ml、水100ml和3孔 雀绿1ml的水溶液)中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现 绿色。使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。如粪膜 厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则 虫卵变形,也不易辨认。定量透明法 适用于各种
4、粪便内蠕虫卵的检查及计数。此法系应用改良聚 苯乙烯作定量板,大小为40301.37mm,模孔为一长圆 孔,大小为84mm,两端呈半圆形,所取的粪样平均为 41.7mg。操作时将大小约44cm的100目尼龙网或金属筛网 覆盖在粪便标本上,自筛网上用刮片刮取粪便,置定量板 于载玻片上,用一手的两指压住定量板的两端,将刮片上 的粪便填满模孔,刮去多余粪便。掀起定量板,载玻片上 留下一个长形粪样,然后在粪条上覆盖含甘油孔雀绿溶 液的大小约为5.02.6cm的玻璃纸条,展平后加压,使玻 璃纸下的粪便铺成长椭圆形。经12小时粪便透明后置镜 下计数。将所得虫卵数24,再乘上述粪便性状系数,即为每克粪便虫卵数
5、。 三、浮聚法:利用比重较大的液体,使原虫包囊或 蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有两种: (1)饱和盐水浮聚法:此法用以检查钩虫卵效果 最好。用竹签取黄豆粒大小的粪便置于漂浮杯( 高3.5cm,直径约2cm的圆形直筒瓶)中,加入少 量饱和盐水调匀,再慢慢加入饱和盐水到液面略 高于瓶口,但不溢出为止。此时在杯口覆盖一载 玻片,静置15分钟后,将载玻片提起并迅速翻转 ,镜检 。(2)硫酸锌离心浮聚法:此法可用于检查 原虫包囊,球虫卵囊和蠕虫卵。取粪便约 1g,加1015倍的水,充分搅碎,按离心 沉淀法过滤,反复离心34次,至水清为 止,最后倒去上液,在沉渣中加入比重 1.18的硫酸锌液(3
6、3的溶液),调匀后 再加硫酸锌溶液至距管口约1cm处,离心1 分钟。用金属环取表面的粪液置于载玻片上,加碘液一滴,镜检。 (3)蔗糖离心浮聚法:此法适用于检查粪便中隐 孢子虫的卵囊。取粪便约5g,加水1520ml,以 260目尼龙袋或4层纱布过滤。取滤液离心510分 钟,吸弃上清液,加蔗糖溶液(蔗糖500g,蒸馏水 320ml,石炭酸6.5ml)再离心,然后如同饱和盐水 浮聚法,取其表液膜镜检(高倍或油镜)。卵囊透 明无色,囊壁光滑,内有一小暗点和发出淡黄色的 子孢子。隐孢子虫的卵囊在漂浮液中浮力较大,常 紧贴于盖片之下,但1小时后卵囊脱水变形不易辨 认,故应立即镜检。也可用饱和硫酸锌溶液或饱
7、和盐水替代蔗糖溶液。 浓聚法 1沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集 于水底,有助于提高检出率。但比重较小的钩虫 卵和某些原虫包囊则效果较差。(1)重力沉淀法:取粪便2030g、加水成混悬 液,经金属筛(4060孔)或2、3层湿纱布过滤 ,再加清水冲洗残渣;过滤粪液在容器中静置25 分钟,倒去上液,重新加满清水,以后每隔15 20分钟换水一次(34次),直至上液清晰为止 。最后倒去上液,取沉渣作涂片镜检。如检查包 囊,换水间隔时间宜延长至约6小时换一次 (2)离心沉淀法:将上述滤去粗 渣的粪液离心(1500 2000rpm/min)12分钟,倒去上 液,注入清水,再离心沉淀,如 此反复沉淀3
8、4次,直至上液澄 清为止,最后倒去上液,取沉渣 镜检。 (3)醛醚沉淀法:置粪便12g于小容器内,加水10 20ml调匀,将粪便混悬液经2层纱布(或 100目金属筛网)过滤,离心( 2000rpm/min)2分钟;倒去上层粪液,保 留沉渣,加水10ml混匀,离心2分钟;倒去 上液,加10甲醛7ml。5分钟后加乙醚3ml ,塞紧管口并充分摇匀,取下管口塞,离 心2分钟,即可见管内自下而上分为4层。 取管底沉渣涂片镜检。如检查原虫包囊, 可加卢戈氏液染色,加盖片镜检。 六、钩蚴培养法钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫。 如冷开水约1ml于洁净试管内(110cm),将滤 纸剪成与试管等宽但较试管
9、稍长的T字型纸条, 用铅笔书写受检者姓名或编号于横条部分。取粪 便约0.20.4g,均匀地涂抹在紧竖条纸条的上 部23处,再将纸条插入试管,下端浸泡在水中 ,以粪便不接触水面为度。在2030条件下培 养。培养期间每天沿管壁补充冷开水,以保持水 面位置。3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩 蚴在水中常作蛇形游动,虫体透明。如未发现钩 蚴,应继续培养观察至第5天。气温太低时可将 培养管放入温水(30左右)中数分钟后,再行 检查。 五、肛门拭子检查法 适用于在肛周产卵(蛲虫),或常在肛门 附近发现带绦虫的虫卵检查。1棉签拭子法:先将棉签浸泡在生理盐水 中,取出时挤去过多的盐水,在肛门周围 擦拭,随后将
10、棉签放入盛有饱和盐水的试 管中,用力搅动,迅速提起棉签,在试管 内壁挤干盐水后弃去,再用饱和盐水法, 覆盖一载玻片,5分钟后取载玻片镜检。2 可将擦拭肛周的棉签放在盛清水的试 管中,经充分浸泡,取出,在试管内壁挤 去水分后弃去。试管静置10分钟,或经离 心后,倒去上液,取沉渣镜检。3透明胶纸法:用长约6cm,宽约2cm的 透明胶纸粘擦肛门周围的皮肤,取下胶纸 ,将有胶面平贴玻片上,镜检。 八、淘虫检查法 为考核驱虫疗效,常需从粪便中淘 取蠕虫进行鉴定与计数。取患者服药 后2472小时的全部粪便,加水搅拌 ,用筛(40目)或纱布滤出粪渣,经 水反复冲洗后,倒在盛有清水的大型 玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时,应在玻皿下衬以黑纸。 带绦虫孕节检查法 绦虫节片用清水洗净,置于两载玻片 之间,轻轻压平,对光观察内部结构 ,并根据子宫分支情况鉴定虫种。也 可用注射器从孕节后端正中部插入子 宫内徐徐注射炭素墨汁或卡红,待子 宫分支显现后计数。卡红染液配制:钾明矾饱和液100ml ,卡红3g,冰醛酸10ml。混合液置于 37温箱内过夜,过滤后即可应用。