血液透析内毒素检测的意义

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1、 内毒素检测的临床意义 -血液透析中内毒素检测的重要性热原反应 热原反应是血液透析中常见的并发症，发生 率约在10以下。因血液透析涉及环节诸多 ，往往难辨热原反应的直接发病因素，使防 治措施难具针对性。 热原反应特点:患者于透析开始1h左右，出 现恶寒、寒颤，或伴恶心、呕吐，体温升至 38左右。静脉推注地塞米松255 0mg或肌肉注射非拉更250mg，30min后 ，症状消失，体温逐渐降至正常。热原反应的相关因素 透析器因素 复用的透析器和血路管 透析液和透析用水 净化剂和消毒剂:次氯酸钠、双氧水、氢氧化钠等常用净化 剂，对透析膜有腐蚀作用，会增大膜孔径甚至引起破膜； 过氧乙酸是高效、广谱、速

2、效的消毒剂，但其化学性质不 稳定，消毒效果受配制浓度、储藏时间和室温的影响。 透析机的消毒和使用:在需要连续工作十几个小时的状态下 ，两班之间往往人为忽略消毒程序的运行，有造成医源性 交叉感染之嫌。 患者自身因素:有些患者潜在感染，血液透析时血流动力学 发生改变，加之肝素抗凝，容易造成局部感染扩散而在透 析中出现寒颤、发热等症状。透析患者并发败血症，也表 现为透析中高热、寒颤，而48 72的败血症是由血管 通路感染引起的。内毒素检测的重要性因此，保证透因此，保证透 析液微生物质析液微生物质 量是对现代血量是对现代血 液透析的基本液透析的基本 要求。血液透要求。血液透 析中对内毒素析中对内毒素

3、检测势在必行检测势在必行 。使患者产生低血使患者产生低血 压，肌肉痉挛，压，肌肉痉挛， 头痛，发热等症头痛，发热等症 状，严重的可导状，严重的可导 致休克。而长期致休克。而长期 内毒素刺激，会内毒素刺激，会 造成透析的长期造成透析的长期 并发症如腕管综并发症如腕管综 合症和慢性炎症合症和慢性炎症 反应等。反应等。尤其是内毒尤其是内毒 素，由于其素，由于其 水解后可以水解后可以 穿过透析膜穿过透析膜 进入到患者进入到患者 的体内，导的体内，导 致急性热源致急性热源 性反应。性反应。使用被微生物污使用被微生物污 染的透析用水和染的透析用水和 透析液可引起患透析液可引起患 者的多种急、慢者的多种急、

4、慢 性并发症，直接性并发症，直接 影响患者的透析影响患者的透析 质量和生存质量质量和生存质量 ，严重的甚至危，严重的甚至危 及生命。及生命。 2005年8月卫生部颁布了委托制定的血液透析器 复用操作规范中明确规定：水质要求：应定期检测复用用水细菌和内毒素的污染程度。 内毒素含量不得超过2 EU/ml，干预限度为1 EU/ml。中华人民共和国医药行业标准 YY 0572-2005 血液透析 和相关治疗用水（ISO 13959：2002，MOD）中明确规定：在水处理装置的输出端的细菌内毒素，应不得超过1EU/ml ；在血液透析装置入口的输送点上的细菌内毒素不应得超过 5EU/ml。中华人民共和国医

5、药行业标准 YY 0598-2006 血液透析 及相关治疗用浓缩物（ISO 13958：2002，MOD）中明确规 定：浓缩物以细菌内毒素检查用水配成透析液后，透析液细菌内 毒素含量应小于0.5EU/ml。国家相关标准解读各国标准美国医疗仪器协会（美国医疗仪器协会（American Association of Medical American Association of Medical InstrumentInstrument，AAMI/CDCAAMI/CDC）的标准：）的标准： 细菌生长数：透析用水不超过200CFU/ml，透析液中不超过 100CFU/ml。内毒素浓度：透析用水和透析液

6、中不超过0.25EU/ml。德国肾病协会建议标准：德国肾病协会建议标准：透析用水：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过100CFU/ml、0. 25EU/ml。透析液：细菌生长数和内毒素浓度分别不超过1000CFU/ml、 0.5EU/ml。欧洲药典用水标准：欧洲药典用水标准： 细菌生长数不超过100CFU/ml。内毒素浓度不超过0.25EU/ml。内毒素的定义什么是 内毒素 ？内毒素（Endotoxin, ET）是革 兰氏阴性细菌细胞壁的主要 成分，其化学成分为脂多糖 （Lipopolysaccharide，LPS），由类脂A、核心寡聚糖O及多肽侧链组成。体内内毒素的来源菌体死亡或人工裂解革兰氏

7、阴性杆菌的释放肠道内毒素的吸收败血症时血中细菌的释放外源性输入体内内 毒素的 来源内毒素的作用机理LPSLPS-LBP （LPS结合蛋白）LPS-SCO14 （细胞膜上的受体）信号传递信号传递CD14+细胞 （M，PMN，单核核细胞）CD14细胞 （上皮细胞等）吞噬作用 杀菌活性一级介质释放粘附分子表达细胞反应TNF、IL-1 IL-6、IL-8瀑布样反应，全身炎性反应综合症急性炎症PG、TXA、LTC、PAG、C5a、O2-、NO，弹力酶 （二级介质）脓毒综合征 （发热、低温、心动过速、尿少、酸中毒、低血压）DIC内毒素休克MOSF（多器官功能衰竭）死 亡Shwartzman（什瓦茨曼 现象

8、）5内毒素的生物学效应发热反应1白细胞反应2内毒素血症（ETM）与内毒素休克（ETS）3弥漫性血管内凝血（DIC）4内毒素检测方法目前内毒素检测 的方法主要有鲎试验自动化动 力学方法化学发 光法光纤维生 物传感法毛细管电泳法ELISA结合免疫 鲎试验法仪器简介北京金山川科技发展有限公司MB-80 SMB-80 VMB-80 DMB-80 EMB-80 MMB80微生物快速动态检测动态检测系统统 天津一瑞生物工程技术公司生产MB-80MB-80六六大特点大特点 快速快速：1 1个小时完成检测个小时完成检测 动态动态：动态检测动态检测 定量定量：定量检测定量检测 灵敏灵敏：内毒素：内毒素最低检测量

9、最低检测量1pg/ml1pg/ml 防干扰防干扰：检测不受血中抗生素等的影响检测不受血中抗生素等的影响 应用范围：血液透析液，透析用水, 血液 、尿液、脑积液、胸积液、腹水等 细菌内毒素细菌内毒素 因子因子C C 活化因子活化因子C C 因子因子B B 活化因子活化因子B B 凝固酶原凝固酶原 凝固酶凝固酶 凝固蛋白原凝固蛋白原 凝固蛋白（凝胶凝固蛋白（凝胶鲎试剂与内毒素的反应机理 仪器检测原理：仪器检测原理： 动态比浊法：动态比浊法：动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖），动态定量检测革兰阴性菌可溶性抗原（脂多糖）， 系统通过测定生物试剂与检测样品中抗原抗体反应生系统通过测定生物试剂与检

10、测样品中抗原抗体反应生 成浊度，采用动态比浊法，连续检测浊度的变化建立成浊度，采用动态比浊法，连续检测浊度的变化建立 时间（时间（T T）与微生物含量（）与微生物含量（C C）关系的标准曲线，通过）关系的标准曲线，通过 光电转换原理，经软件系统分析得出具体检测值，得光电转换原理，经软件系统分析得出具体检测值，得 出检测样品中含内毒素含量。出检测样品中含内毒素含量。检测检测方法内毒素/葡聚糖定量测定 MB80微生物快速动态诊断分析仪 天津一瑞生物工程技术公司生产1.血液标本的处理：抽取新鲜肝素抗凝血2ml ，0.1ml血浆加0.9ml血液前处理液，放70水 浴10min，取出后备用。 2.取鲎试

11、剂一支加处理后的血浆0.2ml放混匀 器上振荡30秒. 3.放入检测器，1小时后报告结果。内毒素检测检测的临临床意义义正常参考值：正常人血浆内毒素含量80%），而且血清丙氨酸转转氨酶水平与内毒素血症发发生 率及含量无明显显关系。内毒素检测的临床意义4.肝硬化：肝脏脏可摄摄取血流中内毒素的8090%，由于肝硬变变后造成的肝枯否氏细细胞清除能力下降及肝内组织结组织结构和血流的改变变，肝内毒素摄摄取减少，造成严严重的内毒素血症。5.胆道疾病：胆石症伴胆囊炎的内毒素血症的发发生率为为78；化脓脓性胆管炎为为20；梗阻性黄疸的程度与内毒素浓浓度以及持续时间续时间有一定关系，术术后的内毒素血症发发病率为为

12、5075%，是术术后出现现并发发症和患者死亡的一个重要原因。内毒素检测的临床意义6.急性胰腺炎：急性胰腺炎并发发内毒素血症较较常见见，约约占66，早期测测定内毒素水平有助于判断疾病的严严重程度，指导导治疗疗，防止恶恶化,值值得注意的是致死病例生前均并发发内毒素血症且持续续存在直至死亡。7.溃疡性结肠炎：此病的内毒素血症发发病率高达100，也有个别报别报道的阳性率仅为仅为25。但多数认为认为内毒素血症是该该病的重要并发发症。内毒素检测的临床意义8.细菌性感染的辅助诊断、治疗和预后判断全身性细细菌感染时时，内毒素浓浓度持续续升高标标志着炎症反 应应的加重，暗示预预后不良并提示存在感染病灶，内毒素 浓浓度下降则则表明炎症反应应逐步消失，提示潜在感染性病 灶治疗疗有效，感染得到控制。对对尿液进进行内毒素测测定可检检出革兰兰氏阴性细细菌菌尿症和 厌厌氧性阴性杆菌菌尿症(LPS50pg/ml)。 9.原因不明的发热免疫低下患者原因不明发烧时发烧时，如果找不到细细菌感染迹象和菌血症侯，内毒素血症可能是引起发热发热因素之一。内毒素检测的临床意义10.外源性输注的内毒素血症的诊断因治疗目的输入了有内毒素污染的液体、药物或血液等也可引起内毒素血症。内毒素检测的临床意义让我们携手共创医学美好的明天！