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1、探究：培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求 1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法 2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化 3、注意样方法的应用 4、体会影响种群数量变化的因素1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是: 兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考 :出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题? 比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧 量的控制等。例如：酵母菌的种群数量在营养条件有限 的情况下呈S型增长。探究：培养液中酵母菌种群数量的变化介绍:血球计数板的构造1、血球计数板：可用来测量细胞,细菌等一些微小物 体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。
2、 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成 的.玻片中有四条下凹的槽, 其中间又被一短横槽隔为 两半,每半边上面刻有一个方格网.25个中格16个小格16个中格25个小格25 X 16=400小格16 X 25=400小格计数室有长宽：1mm1mm, 2mm2mm 3mm3mm等 深度均为0.1mm。5、单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为 0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000 即1/10000mL即10-4 mL 。 4、计数室的规格：1mm1mm1mm每个计数室共有400小格，总容积为0.1mm33、使用方法:将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上
3、加盖专用 的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于 盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸 取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.如果使用16格25格规格的计数室, 要按对角线位,取左上,右上,左下,右下 4个中格(即100个小格)的酵母菌数.6、如何计数呢？25个中格16个中格*用规格为25格16格的计数板,除了取 其4个对角方位外,还需再数中央的一 个中格(即80个小方格)的酵母菌数. （ 五点取样法）每1ml菌液中所含的酵母菌个数 计算公式（如长和宽各为1mm） ： (1)16格25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数/ml= (100小格内酵母细胞个数/10
4、0)400稀释倍数 10-4 即(100小格内酵母细胞个数/100) 4 106稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数 10-4 即(80小格内酵母细胞个数/80) 4 106稀释倍数7、课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其 体积为0.4mm3.换算为1mL为0.4/1000即 4/10000mL即410 -4mL 则：每1ml菌液中所含的酵母菌个数 计算公式（如长和宽各为2mm） ： (1)16格25格的血球计数板计算公式 酵母细胞数/ml= (100小格内酵母细胞个数/100)400稀释倍数 4
5、10-4 即(100小格内酵母细胞个数/100)106稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml= (80小格内酵母细胞个数/80)400稀释倍数即(80小格内酵母细胞个数/80)106稀释倍数410-4使酵母菌混合均匀，减少误差不需要。因不同时间取样已形成对照需要。尽量减少误差。对每个样品计数三 次,取其平均值。只计相邻两边及顶角的酵母菌稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数7. 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相 邻两边及顶角计数。 第 1 天第 4 天第 6 天第 7 天死亡酵母菌的种群数量在营 养条件有限的情况下是呈S型增长。但之 后会下降。0酵母菌细胞
6、数（ 106个/mL）时间3影响酵母菌的种群数量增长的因素可能是什么？在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？ 培养液配制 灭菌 接种 培养无菌操作无菌操作培养条件培养条件试管 编号培养液 /mL无菌水 /mL酵母菌母 液/mL温度（ ） A100.128B100.15C100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变 化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完 成了有关实验。 时时 间间（ d）酵母菌细细胞数量（ 106个/mL）A组 B组 C组A1A2A3平 均B1B2B3平 均C1C2C3平 均 1 2 3 4 5 6 7温度、营养物质对酵母菌生长的影响 1.通常用血球计数板对培养液中酵
7、母菌进行计 数，若计数室为1mm1mm0.1mm方格，由400 个小方格组成，若多次重复计数后，算得每个 小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液 中酵母菌总数有 个。 540010000102108 2、检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检 测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸 取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液 体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液 体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻多少个。 80个小方格细胞总数/ 80 400100
8、00稀释倍数 n/ 8040010000105n105 （4）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数 的做法是错误的，正确的方法是 和 。 （5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错 误的，正确的方法是 。摇匀培养液后再取样培养后期的样液稀释后再计数 浸泡和冲洗 （2008江苏高考）3 （1）图中曲线、和分别是 _组、_组和_组的结果。 （2）B组和A组的实验结果不同的原因是B组（3）D组和B组的实验结果不同的原因是D组B A D 培养液较多，与空气接触面积较小，故供氧较少 葡萄糖浓度较低，故营养物质供应较少 4取少量酵母菌液放入血球计数板直接计数，测 得的数目是
9、（ ）A活细胞数 B死细胞数 C菌落数 D细胞总数A5、探究酵母菌的种群数量实验中，某学生的部分操作 过程如下：（1）把酵母菌培养液放置于冰箱中培养， （2）从静置试管中吸取酵母菌培养液计数，（3）到第 七天取样计数，请纠正其错误： （1）_ （2）_ （3）_.该同学用25格x16格,其中 长和宽各为2mm,深度为0.1mm的血球计数板计数,用五 点取样法读取酵母菌有40个,其中稀释了10倍,则1ml菌 液中所含的酵母菌个数为_应将静置改为轻轻振荡几次.应放在适宜温度下培养.应连续七天取样计数.（40/80 ）106 10=5 106计数时有哪些注意事项？从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次；如果酵母菌浓度过大，应先稀释。对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角计数；对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可 作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数。每个样品一般计数三次，取其平均值。
