基础医学实验技术

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1、基础医学实验技术基本操作技术 溶液的配制 缓冲溶液天津医学高等专科学校 基础医学部 生物化学教研室 吕学儒基础医学实验技术吕学儒基 本 操 作 技 术溶液的配制缓冲溶液P39 P40 P8*基础医学实验技术吕学儒实验一 基本操作技术实验目的掌握玻璃仪器的清洗; 学会正确使用吸量管、微量移液器、酒精计 、粗天平的使用。玻璃仪器烧杯、试管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。*基础医学实验技术吕学儒实验一 基本操作技术一、玻璃仪器的洗涤与清洁 (一)新购玻璃仪器的清洗清水冲沾洗衣粉刷清水冲蒸馏水洗(二)使用过的玻璃仪器清洗1.一般玻璃仪器清水冲沾洗衣粉刷清水冲蒸馏水洗2.容量仪器清水冲铬酸洗液浸泡清水

2、冲蒸馏水洗3.比色杯清水冲盐酸洗液浸泡清水冲蒸馏水洗*基础医学实验技术吕学儒二、刻度吸量管的使用量取10ml以下的任意体积时用 。 刻度标记有两种:上为零刻度,下为总量刻度;上为总量刻度,下为零刻度的 。放液后,将吸量管尖在容器 内壁上垂直停留15秒即可。 实验一 基本操作技术*基础医学实验技术吕学儒近年来为了便于准确快速地选取吸量管,国际标准化组 织统一规定:在刻度吸量管的上方印上各种彩色环,以利 辨别,其容积标志如下表:标准容量 (ml)0.10.20.250.512510色标红黑白红黄黑红橘红环数单单双双单单单单实验一 基本操作技术*基础医学实验技术吕学儒实验一 基本操作技术吸量管的使用

3、选择执管取液调准刻度放液洗涤*基础医学实验技术吕学儒三、微量移液器的使用 1.调体积选取钮至所需数值。2.套上吸嘴,旋紧。3.垂直持握微量移液器外壳, 按下大拇指至取液按钮。4.将微量移液器吸嘴插入溶液 ,徐徐松开大拇指,使其复原。5.排放时,重新将大拇指按下 ,比取液时高一档以排空。 注:移液过程中应控制速度, 力度。如需移取另一样品,按吸 嘴排放钮,更换吸嘴。实验一 基本操作技术*基础医学实验技术吕学儒四、酒精表的使用选择酒精表的测试范围在70%80% v/v。在没有其他量器的条件下,将酒精以适量蒸馏水稀释,用酒精表检测浓度,当刻度指向75时即为消毒酒精。实验一 基本操作技术*基础医学实验

4、技术吕学儒五、托盘天平的使用 1调零点2. 称量 称量时,左放物,右放码。实验一 基本操作技术*基础医学实验技术吕学儒3.称量完毕 砝码放回砝码盒中,游码移至刻度“0”处,天平的两个托盘重叠后,放在天平的一侧,使天平休止,以保护天平的刀口。 实验一 基本操作技术*基础医学实验技术吕学儒实验目的熟悉三种浓度溶液配制;学习配制常用医用溶液一、仪器与试剂(一)仪器托盘天平、量筒(100ml、)、100ml烧杯、刻度吸管(10ml、 5ml)、容量瓶(50ml)酒精计、玻璃棒、药匙、毛刷。(二)试剂95%乙醇、NaCl固体、新洁尔灭、TD。实验二 溶液的配制*基础医学实验技术吕学儒实验二 溶液的配制1

5、.75%酒精的配制: 用95%(ml/ml)酒精配制75%的酒精50mL。 用酒精表测75%的酒精度2.配制0.1%新洁尔灭溶液50ml3.配制生理盐水50ml。4.制备1%TD消毒液10ml。溶液的配制与稀释*基础医学实验技术吕学儒1.缓冲原理:v NaH2PO4Na2HPO4H2PO42- 是抗碱成分HPO42- 是抗酸成分v 在溶液加少量的碱时, OH-与H2PO42- 电离产生的H+生成H2O,使溶 液的PH值不发生明显变化。v 在溶液加少量的酸时, H+与HPO42- 结合生成H2PO42- ,溶液的PH值也不发生明显变化。v 所以,缓冲溶液具有抗酸、抗碱的作用。实验三 缓冲溶液*基

6、础医学实验技术吕学儒实验三 缓冲溶液2.配制缓冲溶液v 用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 5.0毫升,浓度为0.2M NaH2PO4 10.0毫升,混匀后用pH试纸测定其pH值。v 用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 10.0毫升,浓度为0.2M NaH2PO4 5.0毫升,混匀后用pH试纸测定其pH值。问题:两种比例不同的缓冲溶液pH值为何不同?*基础医学实验技术吕学儒3.缓冲溶液的抗酸、抗碱作用v 将制好的两种缓冲溶液各分成两份,分别加入少量盐酸及少量氢氧化钠溶液,用pH试纸测定其pH值。v 多加一些盐酸及氢氧化钠溶液后又有何变化,用pH试纸测定其pH值。实验三 缓冲溶液

7、*基础医学实验技术吕学儒知识拓展v 酒精又叫乙醇,是最常用的皮肤消毒剂,75的酒精用于灭菌消毒;50的酒精用于防褥疮;2050的酒精擦浴用于高热病人的物理降温。不同浓度的酒精都是由高浓度(95)酒精用蒸馏水稀释而成的。v 酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固,从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精,对细菌蛋白脱水过于迅速,使细菌表面蛋白质首先变性凝固,形成了一层坚固的包膜,酒精反而不能很好地渗入细菌内部,以致影响其杀菌能力。75的酒精与细菌的渗透压相近,可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入,使细菌所有蛋白脱水、变性凝固,最终杀死细菌,酒精浓度低于75时,由于渗透性降低,也会影响杀菌能力。 *基础医学实验技术吕学儒实验报告1.名称 2.目的 3.材料4.方法5.结果6.分析*天津医学高等专科学校 基础医学部 生物化学教研室 吕学儒

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