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1、血常规分析中的误差因素及 血涂片复检规则多种病理条件对血常规检测的干扰n假性血小板减少或增多n假性红细胞减少或增多n假性白细胞减少或增多假性血小板减少或增多的干扰因素n假性血小板减少u样品采集环节中的血小板聚集uEDTA诱导的血小板聚集u血小板卫星现象u巨大血小板n假性血小板增多u红、白细胞碎片u小红细胞WBC LYM% MXD% NEUT% PLT PDW MPV P-LCR6.3 0.131 0.058 0.811 58 12.0 9.6 0.232109/L109/L fL fLWL* WL* WL* WL* AGEDTA诱导的血小板聚集EDTA诱导血小板聚集n发病率u0.07%0.11
2、%n诱因u健康人u自身免疫病、慢性炎症、病毒或细菌感染u肿瘤n潜在的误诊风险高u预防性血小板输血的医学决定水平 血小板计数为20109/L u误诊为ITP或TTPEDTA诱导血小板聚集的发病机制n血小板糖膜改变，血小板膜内隐匿性抗原暴露n血浆中自身抗体与隐匿性抗原形成复合物n激活细胞膜中的磷酯酶n血小板膜水解并释放血小板活性物质uAA、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原等n血小板纤维蛋白原受体被活化n血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团n出现血小板假性减少 EDTA诱导血小板聚集的处理方法n光学显微镜镜检u采用血小板稀释液进行稀释u瑞氏染色n更换抗凝剂重新抽血检测u枸橼酸钠u肝素钠血小板卫星现象
3、n自身抗体引起的一种免疫反应nIgG型抗体识别中性粒细胞和血小板上共同抗原结构u血小板的GPIIb-IIIau中性粒细胞上的FcRIII片断n处理方法u形态学镜检巨大血小板PLT-I 32 109/L(x 1000)PLT-O 65 109/L红、白细胞碎片的干扰n红细胞碎片的产生u弥散性血管内凝血u微血管病性溶血性贫血u心源性溶血性贫血u其它 化学中毒、肾功能衰竭、血栓性血小板减少 性紫癜和化疗n白细胞碎片的产生uAML、淋巴瘤、严重感染、化疗排除红、白细胞碎片对血小板干扰假性红细胞减少或增多的干扰因素n红细胞冷凝集所致假性红细胞减少n巨大血小板所致假性红细胞增多红细胞凝集所致干扰及处理RB
4、C HGB HCT MCV MCH MCHC RDW2.23 144 0.249 111.7 64.6 578 0.2541012/L g/LfL pg g/LRU*RU* RU* RU* RU*处理方法处理方法 加温到加温到3737OOC C后再测定后再测定红细胞冷凝集所致假性红细胞减少n冷凝集素综合症u在31以下u自身红细胞抗原发生可逆性凝集n病因u白血病、恶性淋巴瘤或全身性红斑狼疮u肺炎支原体属感染u传染性单核细胞增多症u血吸虫病、丝虫病、疟疾u肝硬化、非典型性肺炎假性白细胞减少或增多的干扰因素n白细胞聚集所致假性白细胞减少n红细胞溶血不良所致假性白细胞增多n有核红细胞所致假性白细胞增多
5、溶血剂剂滴下后正常人RBC肝硬化病人RBC红细胞溶血不良n因脂类代谢异常所致红细胞膜表面与外周血脂 类结合形成脂质颗粒保护膜，或红细胞膜表面 结构异常，正常浓度的溶血素无法破坏红细胞 膜表面n常见于以下疾病u肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞)u高脂血症u高胆固醇制剂输液治疗过程中u异常血红蛋白症(Hgb-S症、Hgb-C症)红细胞溶血不良的原因红细胞溶血不良处理办法：人工显微镜形态学镜检淋巴细胞峰左边上翘 显示碎片明显 涂片显示大血小板、棘形红细胞WBC 6.9109/L LYM% 34.3% MXD% 19.4% NEUT% 46.3%有核红细胞的存在n血液学疾病：u急性髓细胞白血病u
6、急性红白血病u急性淋巴细胞白血病u慢性粒细胞白血病u慢性淋巴细胞白血病u多发性骨髓瘤u骨髓增生异常综合征u恶性淋巴瘤u骨髓转移癌u骨髓纤维化u原发性血小板增多症 n血液非肿瘤性疾病 u缺铁性贫血u巨幼细胞贫血u溶血性贫血u增生性贫血u再生障碍性贫血u原发性血小板减少性紫癜n感染性疾病n原发性脾亢脾 有核红细胞对白细胞检测的干扰WBC 56.1X109/L外周血中红细胞的数量是白细胞的三次方数量级排除NRBC对白细胞检测的干扰n形态学镜检n高端仪器WBC 6.90 109/LNRBC 0.34 109/LA (blood) smear campaignA (blood) smear campai
7、gnBlood, 1 April 2003, 101(7), 2453-2453Blood, 1 April 2003, 101(7), 2453-2453 临检是实验室风险最大的部门ISO对血常规形态学的相关要求n5.5 检验程序 b）血液学检查部门需制定如下标准/程序并形成文件（不仅限于如 下标准/程序）： 血细胞分析的显微镜复检标准（检测结果出现异常计数、警示标志 、异常散点图等情况时结果的确认方法和程序）；血涂片制备和检验的 书面程序/过程；对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准 及程序。 c）血液计数结果超出仪器线性范围时宜规定识别和解决方法（如对 血样进行适当稀释和重复检
8、验）；对于检测样本存在一些影响因素（如 有核红细胞、红细胞凝集、小红细胞、红细胞有内容物或疟原虫、血小 板凝块、巨型血小板等）时，对仪器检测结果可靠性的判定和纠正措施 需有书面规定。CAP对血常规形态学的相关要求nHEM.34200 Has the laboratory established criteria for checking and reviewing leukocyte differential counter data, histograms, and/or blood films for clinically important results flagged by the
9、automated differential counter?nHEM.34300 Is the quality of blood films satisfactory (properly stained, free of precipitate, good cell distribution)?nHEM.34350 Are slides uniquely identified? NOTE: Slides or cover slips must be uniquely identified by element (s) such as specimen or accession number,
10、 or patient name and/or number.nHEM.34450 Are blood films retained for at least one week for possible review and/or reference? NOTE: It may be desirable to retain outpatient films for a longer period and significantly abnormal films indefinitely for teaching purposes.国内常用血细胞分析仪复检规则的制定nSysmex XE-2100
11、nBeckman Coulter 系列nSiemens Bayer Advia 120/2120 协和医院血常规检查仪器配置北京协和医院检验科协和医院东院区检验科协和医院西院区检验科门诊 HST-XE-302 ADVIA 2120病房 ADVIA 2120 XS-800i国际医疗部/特需ADVIA 2120急诊 XT-1800 XS-800i病房/门诊XE-2100 XE-2100急诊 XT-180011台涂片复检规则设置流程确定实验方法及目标仪器校准/比对确定镜检阳性标准双盲法分别进行 仪器检测和镜检设定/调整复检规则满足预设定目标？验证实验NY磨刀不误砍柴工参考发表数据并调整记录完整数据D
12、ata mining推片率30%,假阴性2%n异型淋巴细胞5%n存在巨大血小板n存在血小板聚集镜下形态异常样品分类n1223例血常规样本来自体检者、门诊及住院患者n其中阴性标本37.4%、阳性标本62.3%，阳性标本包括细胞数量异 常、白细胞分类异常和细胞形态异常n镜下形态异常样品203例（16.6%）对国际复检规则进行评估n采用相同涂片复检标准，不同型号仪器的筛选性能大致相同，略有差异n虽然假阴性率符合目标，但XE/XT漏掉2例AL病例，XS漏掉其中1例。 2例AL都未触发41条规则，但镜下发现白细胞分类异常并有异常红细胞n推片率过高阳性率阳性率假阳性率假阳性率阴性率阴性率假阴性率假阴性率符
13、合率符合率推片率推片率XE-210014.23%23.71%59.61%2.45%73.83%37.94%XT-1800i14.06%21.50%61.98%2.45%76.04%35.56%XS-800i13.90%19.54%63.86%2.70%77.76%33.44%ADVIA 212014.64%23.30%60.16%1.88%74.82%37.94%N = 1223对加强的国际复检规则进行评估n血液科标本全推，以避免漏掉严重的血液病病人n假阴性率下降但推片率过高，工作中实现难度增大n我们确定的推片复检规则以此为基础，从降低假阳性入手阳性率阳性率假阳性率假阳性率阴性率阴性率假阴性率
14、假阴性率符合率符合率推片率推片率XE-210014.39%24.94%58.38%2.29%72.77%39.32%XT-1800i14.23%22.40%61.08%2.29%75.31%36.63%XS-800i13.98%20.77%62.63%2.62%76.61%34.75%N = 1223导致假阳性的主要触发规则WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 原始细胞 核左移 异型淋巴细胞WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 有核红细胞 异常红细胞 血小板聚集WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)10
15、00不成熟粒细胞 血液科全推WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 小细胞(+/+/+) 大细胞(+/+/+) 细胞大小不等(+/+/+)XE-2100XE-2100XT-1800iXT-1800iXS-800iXS-800iADVIA-2120ADVIA-2120导致假阳性的主要触发规则XE-2100XE-2100WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 原始细胞 核左移 异型淋巴细胞XT-1800iXT-1800iWBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 有核红细胞 异常红细胞 血小板聚
16、集XS-800iXS-800iWBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 血液科全推ADVIA-2120ADVIA-2120WBC (x109/L)30 PLT (x109/L)1000不成熟粒细胞 小细胞(+) 大细胞(+) 细胞大小不等(+)降低假阳性同时必须使真阳性率改变不大4种型号血细胞分析仪复检规则的分析结果N = 1223阳性率阳性率假阳性率假阳性率阴性率阴性率假阴性率假阴性率符合率符合率推片率推片率XE-210013.57%16.43%67.13%2.86%80.70%30.00%XT-1800i13.33%16.68%66.89%3.11%80.21%30.01%XS-800i13.74%16.35%67.05%2.78%80.87%30.09%ADVIA
