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1、实验三 尿本周蛋白定性检查一、凝溶法【目的】 掌握本周蛋白凝溶法检查。【原理】本周蛋白在pH4.90.1条件下,加热 至4060时可发生凝固,温度升至 90100时沉淀消失,当温度降低恢复 至4060时又可重新凝固。【操作】 1标本处理 2加入试剂 3观察结果 4验证结果 【注意事项】1收集临床上已诊断轻链疾病患者的尿液做此试 验。尿液应新鲜,减少清蛋白、球蛋白分解变性 产生的干扰。混浊尿液须先行离心取上清液。2严格控制或调节pH,凝溶法最适pH为4.55.5 。 3煮沸过滤时,动作迅速,保持高温,不要振荡 ,防止BJP夹杂于其他沉淀蛋白中被过滤除掉而造 成假阴性。过滤用漏斗、滤纸、试管等用品
2、,需 保持高温状态,以避免温度降低使BJP凝固。4凝溶法特异性高,操作繁琐、费时,灵敏度低 (0.32.0)g/L。二、对-甲苯磺酸法【目的】 掌握本周蛋白尿测定的对-甲苯磺 酸法。【原理】 对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量 较小的本周蛋白,而对相对分子质量较大 的清蛋白和球蛋白不起反应。【操作】 1加尿液 2加试剂 3观察结果 【注意事项】1收集临床上已诊断轻链疾病患者的尿液做此试 验。尿液应新鲜,混浊尿液须先行离心取上清液 。服用利福平类抗结核药物的患者可能出现周蛋 白假阳性。2尿液中其他球蛋白5.0g/L可出现假阳性,需 进行验证。如果尿液中本周蛋白含量低,则需先 对尿液进行浓缩,与此同时,还应做患者血清蛋 白电泳及正常人的血清蛋白电泳。