贝克曼库尔特血细胞分析VCS技术

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1、白细胞五分类VCS技术从三分类到五分类u三分类：u淋巴细胞u单核细胞u粒细胞u 中性粒细胞u 嗜酸细胞u 嗜碱细胞u五分类：u淋巴细胞u单核细胞u中性粒细胞u嗜酸细胞u嗜碱细胞LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴细胞单核细胞粒细胞淋巴嗜碱单核嗜酸中性粒细胞五分类VCS技术u运用V、C、S三种探针,在 流式通道的某一位点,对通 过的单列白细胞，进行逐 个的、同时的、三重的检 测，以及三维分析,以确定 其亚群性质。lV-低频波，分析细胞体 积；lC-高频波，分析细胞核 型；lS-激光，分析细胞的颗 粒特性。接近原态的WBC分析uScatter Pak双试剂系统的作用l去红

2、细胞: 红细胞溶解剂通过渗透压差溶解红细胞l保持白细胞原态: 溶解终止液令白细胞恢复到“接近原态”大小接近原态的WBC分析接近原态的白细胞进入流式通道进入流式通道混合池和流式通道接近原态的WBC分析：前处理装置流体动力聚焦u流体动力聚焦的流式通道l单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过 流式通道l将重叠限制到最低限度正常压力差：标本压力小于鞘流压力异常压力差：标本与鞘流压力差过小VCS检测八千多个白细胞逐个、直接 、同时地在流式通道内接受 VCS三重检测，得到各自的 三维座标值VCS增强型流式通道VCS增强型流式通道运用三种独立的能量探针来分析细胞,是目前最全面先进的分析工具更好的体积测量方法V

3、 是以库尔特原理检测 细胞的体积获得的是完全的细胞体 积VCS - DC更好的细胞内部结构测量方法C 运用高频探针检测 细胞的内部结构获得细胞核复杂程度的 信息区分分叶核和非分叶核 细胞VCS - RFVCS - LaserS 是运用一个宽角度的 散射范围（10 -70） 来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区 分淋巴细胞、中性粒细 胞和嗜酸细胞更好的细胞颗粒特性测量方法逐个、同时、直接的三维检测NENEDCDC MeanMean细胞的三维定位NENEOPOP MeanMeanNENE RLSRLS MeanMean三维分析技术u将检测过的8,192个细胞分 布到一个以V、C、S为三维 坐标

4、的空间内，显示出细 胞群特征。u高智能的计算机软件分析 分析细胞群的位置、相对 密度、轮廓、和大小。u三维坐标的数据分析位点 多过 16 106个。三维细胞定位三维空间的多侧面表示-DF1-体积(V),激光散射(S)嗜酸细胞中性粒细胞淋巴细胞单核细胞DF2-体积(V),传导性(C)单核细胞淋巴细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞十余种异常细胞的报警提示123 45 678910VCS三维分析的技术特点u接近原态的白细胞分析l一个分类试剂包u增强型流式通道，VCS直接、同时、三重检测l分析细胞的视角与手工相似l真正的三维检测lVCS，汇集最全面的物理检测工具u三维分析的高分辨率 (256 256 25

5、6)l白细胞五项分类l10多种异常细胞的检测VCS三维分析的技术特点u流体动力聚焦 u统计8000多个白细胞u分类结果与手工的相关性好u流式通道还可检测网织红细胞u被世界上最多实验室采用的五分类原理IntelliKineticsTM（智能调控) &AccuGateTM（精确定位）两种新技术令报警的假阳性 和假阴性减少到前所未有的 水平VCSVCS三维技术的优化三维技术的优化专利的IntelliKinetics 技术u对标本在测量前的预处理作最适化控制u根据实验室环境温度，控制l仪器内细胞与试剂的反应温度l试剂加入量l试剂与细胞的反应时间l从流式通道获取数据的时间先进的标本预处理技术先进的标本预

6、处理技术专利的 AccuGate 定位技术AccuGate 定位技术u真正的三维分析l全周边限定细胞亚群u对细胞特征进行实时刻划l每个细胞亚群都独立定义u清晰的细胞亚群分界l超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性u标本具48小时的分类稳定性。以崭新方式展示白细胞分类数据从一个分类点图上了解更多信息转动 从任意角度观察根据需要隐藏/显示细胞亚群AccuGate 定位技术u增加新的怀疑性报警提示l怀疑有中性、淋巴、或单核系原母细胞n分辨不同细胞系的原母细胞 l衰老标本l低细胞数量标本(绝对值)报警语更为准确和精确报警语更为准确和精确经典的库尔特专利技术 。 -蠕动摇床 .u全自动u90度摇匀u吸样前自动设

7、置初始化编号u唯一具备样本识别无错管理256 X 256 X 256淋巴单核嗜酸中性充满信心的最低人工复检率 u独有的非线性分类方式u柔变轮廓l细胞亚群多维参数的精确演算l原始细胞的特征描述l精确的报警Coulter HmXTM 非线性柔变轮廓分类非线性柔变轮廓分类( (AccuGateAccuGate) ). .u对异常标本最精确的检测及结果报告u对重叠及被掩盖的群落进行精确分类u激发软件对分类结果异常的样本进行进一步分析u超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性u标本具有更好的分类稳定性u增加新的怀疑性报警提示u大大降低假阳性率和假阴性率Coulter HmXTM 非线性柔变轮廓分类非线性柔变轮廓分

8、类( (AccuGateAccuGate) ). .Coulter HmXTM 智能动力系统智能动力系统 IntellikineticsIntellikinetics TMTM. .u在任何一种血细胞分析仪 的分析过程中， 细胞与试 剂之间的反应过程都对结 果的准确度起到至关重要 的作用。l细胞和溶血剂的反 应（物理法）l细胞和染色剂的反 应（化学法）根据实验室环境条件，调整 ：加入试剂的温度加入试剂的量试剂与细胞的反应时间 （从流式通道获取数据的 时间） 屏蔽分析环境的内、外源噪 音Coulter LH 755TM智能动力系统智能动力系统 IntellikineticsIntellikine

9、tics TMTM. .u消除实验室环境对结果的影响l保证在不破坏白细胞的前提 下,完全溶解红细胞l保证白细胞恢复原态u更精确的结果，降低复检率u整体提高实验室工作效率Coulter LH 755TM智能动力系统智能动力系统 IntellikineticsIntellikinetics TMTM. .1. 1. 试剂温度试剂温度2. 2. 试剂量试剂量3. 3. 反应时间反应时间优秀，经济的幼稚细胞检测Coulter HmXTM 卓越的幼稚细胞报警功能基于VCS技术，结合库尔特非线性柔变轮廓分类技术 ，COULTER HmX的研究队伍根据国际行业标准，在 结果报告单中提供无与伦比的包括十余种幼

10、稚细胞的 准确报警，与同类仪器相比， COULTER HmX的幼稚 细胞功能独有如下优点： 基于多维参数基础上，结合多种创新科技的准确的、 分系的幼稚细胞报警 无需额外的试剂，降低实验室成本 根据国际行业复检标准，只提供准确的报警以供人工 复检参考NE BlastsImm NE 2Imm NE 1LY BlastsVariant LYMO BlastsNRBCs Coulter HmXTM 卓越的幼稚细胞报警功能u有核红细胞 u单核系原始细胞u淋巴系原始细胞u粒系原始细胞u不成熟粒细胞u中性杆状核细胞u异型淋巴细胞u过度溶解的淋巴细胞u血小板凝集团和巨大血小板u细胞寄生虫(疟原虫等) Coul

11、ter HmXTM 卓越的幼稚细胞报警功能有核红细胞在HmX上的体现.uVCS技术为基础u在散点图上有单独的群落u报告方式符合国际标准uWBC分类不受影响，结果 准确u最准确的分类结果，最低 的假阳性率，假阴性率u最低的成本u无限扩展性有核红细胞精敏调节系统AccuFlexTM u专利的AccuFlex软件技术 可以让您选择每一项报警的 灵敏度水平，由此来建立相 应的复检标准。对您的实验 室而言，库尔特VCS技术 平台与AccuFlex, AccuGate, and Intellikenetics 等技术的组 合意味着将复检率降低到前 所未有的水平，同时也意味 着以更高的效率完成更大的 工作

12、u网织红细胞计数是用作红细胞产生或红细胞生成的指标，是诊 断或监测贫血治疗最常用的临床指标 u传统的手工计数网织红细胞的方法因其固有的不精确性，当用 做监测实验时有一定的局限性，尤其是用在计数范围的低限或 高限时。涂片厚薄，染色深浅，有限的细胞计数以及技师间的 差异均会导致结果的变异系数为25%到50%。 u流式细胞术测量网织红细胞不但大大提高了网织红细胞计数的 准确性和精确性，还能提供一些反映网织红细胞成熟度和大小 的非传统参数。临床研究已经开始将这些非传统参数应用于许 多贫血性疾病的诊断和治疗 自动网织红细胞功能Coulter LH750创新科技令操作更简便试剂u非荧光染料-新亚甲蓝来沉淀

13、网织红细胞内的RNA。网织 红细胞染色是为了把网织红细胞与成熟红细胞区分开来。u脱蛋白溶液(酸性、低渗)- 在血液与新亚甲蓝混匀孵育一 段时间后加入u将网织红细胞内的血红蛋白除去，而保留着 色的RNA。u红细胞肿胀成球形但不胀破 自动网织红细胞功能 Coulter LH750创新科技令操作更简便方法：l漂清本底后，以VCS技术在增强型流式通道内对细胞进 行分析，即同时采用体积、传导性和光散射三维分析来确定 细胞并将其分类。nV:直流电测量的体积确定细胞的大小。网织红细 胞的分析高度依赖细胞的大小信息，根据定义，未成熟 的红细胞大于成熟的红细胞。数据图的y轴为体积nC:传导性或射频测量提供细胞的

14、内部特性信息 。数据图的z轴为传导性，它只能在旋转的三维图中才可 看到nS:细胞通过氦-氖激光束测得的光散射提供细胞 表面特性和细胞颗粒特性的信息。网织红细胞分析高度 依赖光散射信息因为含有残余RNA的红细胞的光散射强 于成熟红细胞的光散射。数据图的x轴为光散射 自动网织红细胞功能 Coulter LH750创新科技令操作更简便网织红细胞的检测u网织红细胞是介于晚幼红 细胞和成熟红细胞之间的 不成熟红细胞,通常较成熟 红细胞稍大,其胞质中尚残 存部分嗜碱性物质(RNA,核 糖体),经碱性染料染色后 可见深染的网状结构,故名 。u右图中标记A、B、C的细胞 分别代表不同成熟度的网 织红细胞的。新

15、亚甲蓝-VCS检测法u以经典的超活染料新亚甲蓝（NMB）着色网织红细 胞内残存的RNA。u漂去除红细胞内血红蛋白(酸性试剂)u在流式通道，运用VCS三维技术，将网织红细胞与 成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区 分开来。网织红细胞的VCS三维分析u运用VCS三维技术分析染色后的红细胞。l低频波检测细胞体积l高频波(阻光性)检测细胞的内部成分，可剔除非红 细胞颗粒l激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来(网 织红细胞胞浆含较 RNA 物质，散射较多的激光，在散 点图上分布于红细胞的右侧)。l网织红细胞成熟度越差,在散点图上分布越靠右u检测与白细胞分类共享一个流式通道。网织红细胞 VCS三维散点图分析网织红细胞网织红细胞亚群分辨网织红细胞亚群分辨网织红细胞高成熟度网织红成熟红细胞白细胞非红细胞干扰 低成熟度网织红 网织红细胞参数意义参数 英文 正常参考网织红细胞百分比 RET% 0.5% - 2%2% - 6%网织红细胞绝对值 RET# (25 75) 109/L网织红成熟度 IRF 0.2-0.4平均网织红体积 MRV 100-125fl平均球形红细胞体积 MSCV 84-100fl高散射网织红百分比