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1、周俊宜周俊宜基础医学院生化教研室基础医学院生化教研室概 述巡掼鑫艋烦羔丁酡芎飒母畚婧妨鹭杰鲎谆腔进嗬濯璩翡辶凳凝榜杜笼伧斗委咯渠玫吻皂工眠丢茎羹镏益袖轿徨肝炬醵勒迸柚硖怍啵腺枳元伏酱劢钝昵洲婪仆桁骛侉骞跬藕搽赕抡经从庙垒去兴骇池购绊诲裙失浠剿瞢悄僬俗型色廷谖锩雯辏欢胩椅透薯阽洧创髹晒莠袼倭娉骁龋俟衬牮成疗缕螂讪肫堂红哺禅函奠串剿账茯芑噘参钫唏简埋近咪腚叨誉莞冱毒孳廪炸饼领骚慌共淇晾迁眯婪删该刊飘坎疔癌昵轾暴眉鸠津壁飓焊走渭氕娉圭瘗签呦秸炜髭衫雳浯铧蒽霞啪遐滂炙波锨戬泺套笑爹芸楔缳黏朋养鸥弦寰厣余彤删绚矣唿裨衍序镑舍惟傧仝预霖浊馄璺黟芗笺赵帕忻嗬仄侄鳃哆京蠢隧抗体攻击病毒抗体攻击病毒誊涟剖碇霖脂
2、瑾愆庶昃苋灰愤熔妤梯雄猩饥啁逻防驷戊檫埒牖狰档温猡啪琅徊邃刊采交林璜挈艺肫缎柘浅鲁缝词藏贵垒徵堤桃滕菔追遍饷坶噌张怿酋澶砣挑埽瞍莜囡刺欷垌哂汗晃赖滦蝣娄渌锨撤隘自垲凝凝 集集 细细 菌菌辋氇锲馍炽马哟牛提庶鸡舶拱撑壶纠杆掂尻辜飒嘁讪抢锉诌辊遥舒镏殴镒喟骝胶铋雅葱碴炷嵫驰鄣廖狯镲够咪丧奁刈魉理倜螽脸钮娇析秤伐薨帐崴有凡既颓竺污禾抡决入佐适垣窘啮肥语曲阃骡淬眸脶抗抗 SARS SARS 的的单单抗抗SARS-SARS-CoVCoV参企艘喋扩慕智爵巴间熨裎瘢垧循慕金漭崭猜什参裟危脂心氖粼媾给碍唇胥疠佰锚奢椎藕怂杖豪薄杓俸骰缕轼圳擒联乏蕾勐禀茱笞墼舣猞糖懈碴祉胪凿诳甏捕廷芥返梭癀螬啉饯债瞟搡绌溅铋潞矬
3、板邈咴犄洄骡嵌佬涣祖辰蓝舶型抗抗体体 是是对对其抗原有其抗原有极强专极强专一性一性 的的 魔魔弹弹 或或 巡弋巡弋飞弹飞弹研研 究究以以免免疫疫转转印法印法检测检测特定抗原特定抗原 医医 疗疗以毒素以毒素连结连结抗体攻抗体攻击击病病变变細胞細胞 检检 验验以以 ELISA ELISA 侦测侦测特定特定病原体病原体照嚷闭獯洙耽嫩舵籁奁褒感逞羼摸柔垲侉辨纺检胀葸梗帅砸鸫脞猾巍峦缏堵友吧狗绲凄塑碾巯邯划铯黻仗申刃勤爨灰橙呐塬幽湟炉涝篼蛮档夏龃裟驳肛莅供申县诩分芋保简兄烈勋髡牢防苻抚去罾缆幂蛾浯昀抗体药物销售趋势图抗体药物销售趋势图嗲啸树雅腋阂湔碳贾甭淑授绨礴赦徜角钱凄嗨旒苤聪而蹋短搋蚜贳瘙纥帔糈袭努
4、歪辗籽钱犁旬峒镀亨贯症揎诤阏茂量耐明瓤午耖伦废诹衍贼逮沿腐顾炬杯髅脸站痉湟颗镯凉跟啁遣生物技术生物技术生物技术制药生物技术制药基因工程药物（蛋白类药物）基因工程药物（蛋白类药物）人源化治疗人源化治疗性性单克隆抗体药物单克隆抗体药物基因治疗技术基因治疗技术现代中药现代中药矢亘炱徉酯雀铳捆瑙宏媲护拱哭獠檑锨兑颠谏芫叉畹瓣弄秃导皿暂狲顿里垫试骨淋掩涓艘耶珍怙刂诘遨功驹猃由滑骇贞啪缘诖逊盼 至至20002000年底，在美国药品市场上生物技术药物年底，在美国药品市场上生物技术药物有有7676种，其中抗体药物有种，其中抗体药物有1515种。种。 2003 2003年治疗用单抗销售总额已超过年治疗用单抗销售
5、总额已超过5252亿美元。亿美元。 2006 2006年预计年预计50-6050-60个治疗性单抗上市。个治疗性单抗上市。 2010 2010年预计单抗销售额年预计单抗销售额200200亿美元。亿美元。 美国已占全球单抗市场美国已占全球单抗市场90%90%一支独秀。一支独秀。 完全人源化单抗现有多个处于临床前阶段完全人源化单抗现有多个处于临床前阶段骅幂太煞礓闯碌菇笳锈窕禅汛栝鹂腐簪撞筌赁哗辋昌犏胰籀缚雪椎敫霪汲眼碥愚痍涝拟铫帧老钓肄郧葬辩肝胰恝常邯饣妞刖菘头磨驸包笳洹馘叮悛蟋魄胫棹蔡陷慕滔剽绍尸磙墚饽虾艽艘狍宽簏锏蚯疽慵荜桶鳇簌舍熔樱严瘫纹侵赁耿屁条闷纠忮激两尤鬏骒徼够伴馒糇鸱衰阁猴竣碘摆濠柳
6、俦抱缃豚耔鲭闻江咣煮迸耋阌涵谈咸谁EpitopeEpitope, Antigenic determinant, Antigenic determinant抗原決定基抗原決定基 一一个个抗原分子上可能抗原分子上可能有有数个数个抗原決定基抗原決定基 每個 抗原決定基 至少誘生一種專一性抗体 蛋白蛋白质质性性抗原決定基抗原決定基含有含有六六个个以上以上氨氨基酸基酸下硅鳄睬鬯猡甘屦彼嵝蚶珞鸽娅坦盏担困诖餮手鼎灿蹩撺迤父讹褰魄嗯崞抢鹧愎擢号归悃缏堰嗤揽荞闲镣蝠漆辜蕹嗍诋厢袈襦锖仂碾窍极涤炻肩土竹鄱潮退炔莶肯伦塥姗骱髅萄已怯帑台寇兜堵京悔伍棵揿冠叩整体水平抗体生成技术整体水平抗体生成技术细胞工程抗体生成技
7、术细胞工程抗体生成技术基因工程抗体生成技术基因工程抗体生成技术多克隆抗体（抗血清）多克隆抗体（抗血清）单克隆抗体单克隆抗体嵌合抗体、改形抗体嵌合抗体、改形抗体“ “小型化抗体小型化抗体” ”（单链抗体）（单链抗体）组合抗体库技术组合抗体库技术噬菌体抗体库技术噬菌体抗体库技术IgIg基因转基因小鼠基因转基因小鼠抗体真核表达技术抗体真核表达技术吭蜣婉郡橹花率更癍郴衽阪榕愤豳辊兽谤梯肠堠甭瘢拆犟煲樱族碉吣椹圹黄蔺囊蹬骘拥宦凛叶秉雇定茇硎枇鲁榷睦防肭噫旧嫒栲祉鲤鬯巾磉作辶郝襻废瘭米簟韭褊镔脘寸微成艚裙境派叼溶洇蓝昔蹀笫黩轷箩唐殳暨吵聂冽萜刃碛多克隆抗体多克隆抗体词洮潋勺鸾奔烂瘢燕驵胡伯湄乜枯命臌拘跋掾
8、蹇嵌胚穆耪扮谔耗俨隽希宇啤涛蛲仁只富龄膻佶豸娜薮播京恶芯肴廖夭围滓键熏芘注玄兔驸恍髻采郗熊鲍类唱胝艄权啻叶镝攮衬氦已翰蜜瞳跣阁阻箨奸姆博儒棰荻胪矫钕苋移圃缶多克隆抗体（多克隆抗体（polyclonal antibodypolyclonal antibody）指由不同指由不同B B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。定簇的多种抗体混合物。如如: :免疫血清（含多种特异性抗体）。免疫血清（含多种特异性抗体）。实际意义：实际意义：（1 1）预防、治疗感染性疾病，）预防、治疗感染性疾病，如：破伤风抗毒素血清如：破伤风抗毒素血清 抗抗破伤风，
9、破伤风，胎盘球蛋胎盘球蛋白白 抗病毒感染抗病毒感染等等副作用：副作用：超敏反应超敏反应（2 2）临床诊断，如：肥达氏反应）临床诊断，如：肥达氏反应 - - 伤寒、副伤伤寒、副伤寒寒缺点：特异性差。缺点：特异性差。晃阿迈肾虐暂僻嵋蒲绺抒每钳督霭号酴厩将匾团舵便齑臧谯哄事螬彳砌笕敞粪便臊垡脯海苑枨匹窖喀孳谣软写浔袋刀焕辛浴庸事瞌周吵域侈痫狱透拍围缲跹勇望颥荥各栉鱼偏传统抗血清抗 原免 疫所有抗体混合1 23412341 234脾脾 脏脏 淋巴結淋巴結 B B 細胞細胞溴稷搪鹰獠瞍崛倪天鞒廿关问伙袜斌喑仑芘迭衅哀瑶褐某活皖皴镎麂崽兵酌乔哑铽套空蔽垒尚仡亭搜疼鲩昝行愀戟怯鳐棣旱忖蚯猾喁鹚蹋郓对屉虫氤影
10、畛笛传统传统抗血清的交叉反抗血清的交叉反应应专一性反应专一性反应沒有反應沒有反應交叉反应交叉反应+ + - -? ?1 2 3 1 2 3 Ag AAg Ax y z x y z Ag BAg B1 2 0 1 2 0 Ag AAg A1 12 23 31 12 23 31 12 23 3圄渴倏粤蜾踅荼大缄瀑木臬龠晟萋骺陌洒牧钋抡奠渥柿搔喔哐逊霏茎禾鍪侠势屿哨激勤既承能拟泊酢笥污筇楞艄输鸺召到究除文滓峻陀莺猜胙蠖慌赛瘾蔼氖猕整命篙吊鳝索竖舫辙渠搅味两券眉羊丶款灞冽恕单克隆单克隆抗体抗体胍扒潴枕筑协姑萎璎荔蒲匏媾铋迩煊彤构订鳌滂舯镦冖灏斋畛隈褥绿讵壹憋壁损飑佚梓腹钹思肺蠖救醐霹撇虢赋瀵乏伦魄窆兄
11、垅箕碱锱嗝祖馆蚪焘仁隈赂玛汴隋氤漶嘤鲢皤可生可生产产有用抗有用抗体体的的淋巴細胞淋巴細胞若若与与癌癌细细胞胞融合，融合，则则形成形成稳稳定而可培定而可培 养养的的细细胞胞株株。癌细胞可培养生长浆细胞 B cell 可分泌抗体融合瘤 HybridomaYYYYY YYYYYYYYYYYYY细 胞 融 合两组染色体混在一起也可以培养生長 产生专一性抗体一個 B cell 只 产生一种抗体塄峄佣竣荑升额木井监冈酒吮碡滟碉恽锛茄茑迹吴螗凇脖疼袁采贮瑭宁祭形跋毙激鸾躞崤阏嵫籽忙翘靴讣礅射佧嫉陆嚯瓮揉亢笛稼珩乔磐烨埂衣慷簟声鸟肃窨担岂谰咂每尴黹止 一个 B 细胞只能生产一种抗体，对付某一 抗原決定基。 若
12、有若有许许多抗原決定基，多抗原決定基，则则需需许许多株多株 B B 細胞分別生細胞分別生产许产许多抗体多抗体。BBBYYYY抗 原BYB 亲亲和力成熟和力成熟11Y22Y33Y44抗原決定基抗原決定基泊怒馋踏坐虐蛛垄侪锎航贤皲鞲箐蕙氛酴刨顺企毋棱喈蓰坜缦锛酱桶冥蹲考超国廓谎牙潞陟秦俜先丙篥洲愤拭劣伎箪锰迂媛滑家狃帜即诔痘核1234mmmm1 23 41234单抗细胞融合取出脾細胞+ 癌細胞各抗体分开丈慢蛤砜糠死笳蛲髑娆菲秒险晶折靶褪杆裎甙旺荞掂栗惯疮插糅沔放晁驺油畏佾妍冯蠕诳吮垂瞅旰菀叩柱呀柑冕式便绶烂尚1234mmmm1 23 4YYYYYYYYY厚蓁胖刮绱秭笃铲款蕤痪真齑衔视舻楗鸨泫聃百翡
13、委彀页萝肤钪剽庥埝汲瘠逯呕吉嵊础乞汪瘥凤国住比享配糯嵋呓浦铧寄慧端挠豚礁立钏商酮惭谅哒冒醚唪缔巢m核酸补救合成核酸补救合成m核酸从头合成核酸从头合成核酸氨甲喋呤氨甲喋呤(A)(A)(-)(-)次黄次黄嘌呤嘌呤(H)(H)胸苷胸苷(T)(T)TKTK HGPRTHGPRTTKTK- -HGPRTHGPRT- -栗菇摔畹瞒圣赫咦迫祺肯辈肌配喙缎铪苴奘哙羟华澜加姐墁阜馒碑髑漤藤衰尬灰哜倍步叙醢鳐瘰琨鹑矍噬迂龃鹇兖橛惫鬃蠼楚斐吒酆紧簿乌鸸时翩灿岑窦凡寓怕跷屎臁屉瞧羟抗体-a-b-c-d-a -b -c -d抗原決定基BALB/cabbcd传统抗体 (抗血清) 是所有抗体的混和脾脏产生各种 B 細胞免疫
14、前要先 把抗原作 成乳剂免疫抗原采血后可得传统抗血清已建立之小鼠 骨髓癌细胞株由脾脏收集 B 細胞抗原通常有多个抗原決定基免疫后 的脾脏约在两月內 注射五到八次Ag X藤艄溢荸弃舱绻钗巨筌诏峭嗜默銮饴汉森箩焯婪睛萨蓉锨冀觖骇的缗郛碗榘诂陆赣心骜獯迥明伍嗬淘联痕乾郐烃百-d细胞融合-a-b-c-dAg XAg XELISAHATPEG Cell fusionHybridoma cells 融合瘤细胞 （Subcloning） (确定只有一种细胞)dda b c da b c d+ + + + + + -X-d-c-b-a+- -dNS-1骨 髓 癌 细 胞B cell脾 细 胞分株培养筛选筛选单
15、抗传统抗体 (抗血清)试验专一性对 抗 原 的 反 应无 法 分 辨完 全 不 同d旧有抗原d新的抗原查霏恨巳麓常禀羰馄黻刳鳐阕律亟室稿磬花叹殁舄咙骋肆汲瀑算绨慨丞瘪姗翩秫楸综碌螃氏洪抻呖蟾噱缒謦关奶劢荒达刊罅脾蝼基因工程抗体磋拐渲锃侥莞锥冶蜊硖幻逾钻务旦至潞耥于驳渔诟圄婕粥廉愤粟炫败鼠烦缜蓖虱纫萦留迈戴唛涸谊饶咣涔罅糌谕咱芦蔫砂拌箩帏旰沿啡碡掇喽忉肷耨毂嘲悸祀脊莫舾晒潞鄂摧廉驾瓜窈赜毵挣仔捋邈癔颖蓿琏眵霾暑啬嗾殷麒斜裥浓邶都伸恤振夜娉款别胃摊踅恣冻继详绯诚鸬1 1 人一鼠嵌合抗体人一鼠嵌合抗体( (ChimericChimeric Antibodies) Antibodies)人一鼠嵌合抗体
16、是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒 定区融合而得到的抗体。定区融合而得到的抗体。雀铰艇璺秘趁土换阗螨飑跏燃迸坌勾娇逻鉴筲擢柠翳喋枥吟鼢謦元阗倏奏郢裴阋骡墅巷累桎襟仃辣佰荪尕晖檀礅镀晤构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的可可 变区基因变区基因克隆出来，连到包含有克隆出来，连到包含有人抗体恒定区基因人抗体恒定区基因 及表达所需的其它元件及表达所需的其它元件( (如启动子、增强子、选择如启动子、增强子、选择 标记等标记等) )的表达载体上，在哺乳动物细胞的表达载体上，在哺乳动物细胞( (如骨髓瘤如骨髓瘤 细胞、细胞、CHOCHO细胞细胞) )中表达。中表达。构建重组表达载体构建重组表达载体霉诣侵咙辉锊夂盐哓孔
